实验仪器操作规范标准考试题集

实验仪器操作规范标准考试题集前言实验仪器操作规范的掌握是保障实验安全、数据准确性及仪器使用寿命的核心前提。本考试题集围绕液相色谱仪、气相色谱仪、紫外可见分光光度计、电子天平、高压灭菌锅等常用实验仪器，通过选择题、判断题、简答题、实操题四类题型，系统考查操作人员对仪器操作流程、维护要点、安全规范的理解与应用能力，适用于实验室人员考核、技能培训及自我检验。一、选择题（每题2分，共30分）1.液相色谱仪操作规范（1）液相色谱仪流动相配置时，需使用的过滤膜孔径为（）A.0.22μm有机相膜B.0.45μm水相膜C.0.22μm水相膜（流动相为纯水体系）D.0.8μm混合膜（解析：流动相过滤膜需匹配溶剂类型，水相体系选0.22μm水相膜，有机相用有机相膜；0.45μm膜精度不足，0.8μm更粗，故C正确。）（2）液相色谱仪开机顺序正确的是（）A.工作站→泵→检测器B.泵→检测器→工作站C.检测器→泵→工作站D.泵→工作站→检测器（解析：需先开泵使流动相稳定，再开检测器预热，最后启动工作站，B正确。）2.气相色谱仪操作规范（1）气相色谱进样时，微量注射器需（）A.直接插入进样口注射B.排气泡后快速注入C.缓慢推注样品D.注射后停留5秒再拔出（解析：进样需排气泡，快速注入避免样品扩散，注射后立即拔出，B正确。）（2）气相色谱柱老化的目的是（）A.去除柱内残留污染物B.降低柱温C.增加柱效D.缩短分析时间（解析：老化通过高温烘烤去除柱内残留杂质，A正确；老化会升高初始温度，不直接增加柱效或缩短时间。）3.紫外可见分光光度计操作规范（1）紫外比色皿的正确使用方法是（）A.用手触摸透光面B.待测液润洗比色皿3次C.比色皿装满样品后测定D.不同样品共用同一比色皿（不清洗）（解析：透光面不可触摸，需润洗避免残留干扰，样品量以没过光程为宜，不同样品需清洗，B正确。）（2）紫外分光光度计波长校准应使用（）A.蒸馏水B.重铬酸钾溶液C.镨钕滤光片D.氯化钠溶液（解析：镨钕滤光片用于波长校准，重铬酸钾用于吸光度校准，C正确。）4.电子天平操作规范（1）电子天平称量时，应（）A.打开防风罩快速放样品B.待天平稳定后读数C.称量腐蚀性样品直接放秤盘D.多次称量同一样品取平均值（未清零）（解析：需关闭防风罩、待稳定读数，腐蚀性样品需用容器，多次称量需清零，B正确。）（2）电子天平的校准周期为（）A.每月一次B.每季度一次C.半年一次D.每年一次（解析：根据使用频率，通常每季度校准一次，B正确；高频使用可每月，低频可半年。）5.高压灭菌锅操作规范（1）高压灭菌锅灭菌时，需先（）A.加热升压B.排冷空气C.放入样品D.设置灭菌时间（解析：冷空气会影响灭菌温度，需先排尽，B正确。）（2）高压灭菌锅的灭菌温度与压力对应关系（100kPa下）为（）A.100℃B.115℃C.121℃D.134℃（解析：标准灭菌条件为100kPa（表压）下121℃，C正确。）二、判断题（每题2分，共20分）1.液相色谱仪使用完毕后，应直接关闭电源，无需冲洗系统。（×）（解析：需用纯水/甲醇冲洗色谱柱和管路，避免残留堵塞。）2.气相色谱进样后，注射器应立即拔出进样口。（√）（解析：快速拔出可减少样品扩散，避免进样口污染。）3.紫外分光光度计测定样品时，比色皿可装样至满刻度。（×）（解析：样品量以没过光程（约2/3体积）为宜，过满易溢出腐蚀仪器。）4.电子天平称量时，可在天平开启状态下添加砝码校准。（×）（解析：校准需在天平关闭、空载状态下进行。）5.高压灭菌锅灭菌结束后，可立即打开锅盖取样品。（×）（解析：需待压力降至0、自然冷却后开盖，避免蒸汽烫伤。）6.液相色谱流动相可直接用自来水配制。（×）（解析：需用超纯水，避免杂质干扰检测。）7.气相色谱仪柱温箱温度可设置高于色谱柱最高使用温度。（×）（解析：柱温需低于色谱柱最高温度，否则损坏色谱柱。）8.紫外分光光度计的比色皿使用后，可用铬酸洗液浸泡清洗。（×）（解析：铬酸洗液会腐蚀石英比色皿，应使用纯水或乙醇清洗。）9.电子天平的防风罩可在称量过程中打开。（×）（解析：防风罩需关闭，避免气流影响称量精度。）10.高压灭菌锅的安全阀需每月手动排气检查。（√）（解析：定期检查安全阀确保压力释放功能正常。）三、简答题（每题10分，共30分）1.简述液相色谱仪日常维护的关键步骤。答：①流动相维护：实验前过滤、脱气，实验后用纯水/甲醇冲洗管路及色谱柱（梯度洗脱需先过渡到低有机相）；②色谱柱维护：使用后用适配流动相冲洗，柱压过高时反向冲洗（部分色谱柱不可），长期不用需封存（两端堵头）；③仪器清洁：进样针、进样口定期清洗，检测器池体用溶剂冲洗；④软件与硬件检查：工作站数据备份，泵、检测器压力/波长校准。2.气相色谱仪进样操作的“三快一慢”指什么？有何作用？答：“三快”指进样快、拔针快、程序升温快（或进样后快速启动分析程序），“一慢”指推样慢。进样、拔针快：减少样品在进样口的扩散，保证峰形尖锐；推样慢：避免样品倒吸或进样量不均；程序升温快：快速达到分析温度，缩短分析时间，减少峰展宽。3.高压灭菌锅灭菌失败的常见原因有哪些？如何排查？答：常见原因及排查：①冷空气未排尽：观察灭菌过程中压力-温度曲线，若温度滞后压力，需重新排气；②安全阀故障：手动排气时压力无法维持，检查安全阀是否堵塞；③密封圈老化：灭菌时压力下降快，更换密封圈；④加热管损坏：升温缓慢，检测加热管电阻；⑤样品过多/过紧：灭菌腔内蒸汽循环受阻，减少样品量、松散摆放。四、实操题（每题20分，共20分）考核项目：液相色谱仪开机与系统平衡操作操作步骤及评分点（总分20分）：1.准备工作（3分）：检查流动相余量（≥500mL），确认色谱柱连接正确（流动相流向与柱箭头一致），废液桶未满。2.开机顺序（4分）：依次开启泵→检测器→工作站（顺序错误扣2分）；设置泵流速（1mL/min）、柱温（30℃）、检测器波长（254nm）。3.流动相排气（4分）：打开泵“排气阀”，按“purge”键排气3-5min（无气泡后关闭排气阀）。4.系统平衡（5分）：观察泵压力稳定（波动≤0.5MPa）、基线噪声≤1×10⁻⁴AU，记录平衡时间（≤30min为合格）。5.关机前准备（4分）：提前10min切换至10%甲醇水冲洗系统（梯度洗脱需过渡），冲洗后关闭泵、检测器、工作站，填写使用记录。附录：仪器操作规范核心文件清单1.《液相色谱仪操作维护SOP》2.《气相色谱仪进样与色谱