2026届江苏省宿迁市宿迁中学生物高三上期末学业水平测试模拟试题含解析

2026届江苏省宿迁市宿迁中学生物高三上期末学业水平测试模拟试题注意事项1．考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回．2．答题前，请务必将自己的姓名、准考证号用0．5毫米黑色墨水的签字笔填写在试卷及答题卡的规定位置．3．请认真核对监考员在答题卡上所粘贴的条形码上的姓名、准考证号与本人是否相符．4．作答选择题，必须用2B铅笔将答题卡上对应选项的方框涂满、涂黑；如需改动，请用橡皮擦干净后，再选涂其他答案．作答非选择题，必须用05毫米黑色墨水的签字笔在答题卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律无效．5．如需作图，须用2B铅笔绘、写清楚，线条、符号等须加黑、加粗．一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．早在19世纪末有医生发现，癌症患者术后意外感染酿脓链球菌，其免疫功能增强、存活时间延长，从而开启了“癌症免疫疗法”的大门。“癌症免疫疗法”是指通过自身免疫系统来抗击癌细胞的疗法。下列相关叙述正确的是（）A．癌症免疫疗法主要是通过增强患者的细胞免疫功能来杀死癌细胞B．癌症免疫疗法通过改变癌细胞的遗传信息来达到治疗目的C．患者免疫功能增强是因为酿脓链球菌侵入癌细胞使其裂解死亡D．酿脓链球菌激活患者的非特异性免疫功能从而消灭癌细胞2．目前，对种子萌发和休眠的调控机理目前尚无定论。最能被接受的是Khan和Waters提的“植物激素三因子”假说，其模型如图所示。GA、CK和ABA分别是赤霉素、细胞分裂素和脱落酸下列相关分析错误的是（）“+”表示激素存在生理活性浓度；“-”表示激素不存在生理活性浓度A．根据实验结果可初步判断，种子的休眠和萌发是多种植物激素调节的结果B．第3和6组对照的自变量是有无GA，而CK和ABA都是无关变量C．据第5、6、7、8组可知，不管CK和ABA是否存在生理活性浓度，若GA不存在生理活性浓度，种子都处于休眠状态D．综合8组实验结果，ABA对GA作用的发挥起到促进作用，CK是种子萌发的必要激素3．某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌分离和计数的相关叙述，正确的是（）A．分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2作为碳源的B．倒平板时应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C．培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定D．若实验组菌落平均数为37个/平板，空白对照平板上有3个菌落，则本组菌落数的平均值为34个/平板4．不同浓度的生长素影响某植物乙烯生成和成熟叶片脱落的实验结果如下图所示。下列有关叙述正确的是（）A．乙烯浓度越高脱落率越高B．脱落率随生长素浓度达到一定值后不断降低C．生长素和乙烯对叶片脱落的作用是相互拮抗的D．生产上要喷施高浓度生长素类似物降低脱落率5．细胞作为基本的生命系统，各组分之间分工合作成为一个统一的整体，使生命活动能够在变化的环境中自我调控、高度有序地进行。下列叙述错误的是（）A．在抗体的合成和分泌过程中，胰腺细胞的核糖体、内质网、高尔基体密切配合B．在抗体的合成和分泌过程中，高尔基体在囊泡运输中的作用受基因的调控C．在动物细胞有丝分裂过程中，中心体、纺锤体和线粒体共同参与染色体的均分D．在动物细胞有丝分裂过程中，细胞周期的运转受原癌基因和抑癌基因的调控6．下列与细胞相关的叙述中正确的是（）A．动物细胞没有原生质层，因此不能发生渗透作用B．细胞膜中的磷脂分子是由胆固醇、脂肪酸和磷酸组成的C．组织液中的可以通过自由扩散进入组织细胞中D．真核细胞的遗传物质彻底水解后可以得到5种碱基7．人在正常情况下保持70次/min左右的心率，当看到恐怖画面时，产生害怕的感觉同时心率加快。图是心脏运动调节的部分示意图，图中A为大脑相应功能区，①一⑧代表相关神经纤维，箭头表示兴奋传导方向。有关叙述错误的是（）A．①所在神经元的细胞体位于脑干B．脑干中有控制心脏和血管运动的神经中枢C．①—③过程与心脏节律运动有关D．看到恐怖画面引起心率加快属于条件反射8．（10分）如图为某基因型为AaBb的雄性动物一个进行减数分裂的细胞。在不考虑变异的情况下，下列叙述正确的是A．该细胞含有4套完整的遗传信息，即4个染色体组B．该动物体内细胞的染色体组数可能是1、2、4C．该细胞为初级精母细胞，基因型为AaBbD．若用适量秋水仙素处理该细胞，染色体的着丝粒将无法分裂二、非选择题9．（10分）2019年底爆发的新型冠状病毒肺炎（COVID-19）是由SARS-CoV-2病毒引起的，能否快速、准确地检测出病原体成为疾病防控的关键。请回答：（1）下图表示SARS-CoV-2病毒检测的部分流程。科学家以病毒的RNA为模板通过①____________过程合成cDNA，再对cDNA进行PCR扩增，这项技术称为RT-PCR。（2）进行RT-PCR需要加入的酶是____________和___________。要从cDNA中扩增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核壳蛋白基因N关键在于要加入__________、dNTP及所需的酶一起构成反应体系。（3）RT-PCR加入Taqman荧光探针可以通过测定荧光强度来检测产物浓度，原理如下：Taqman荧光探针为一段与_____________互补的核苷酸单链，两端分别连接一个荧光基团R和一个淬灭基团Q。探针结构完整时，R发射的荧光被Q吸收；而PCR扩增时结合在模板链上的探针被切断，使R和Q分离，R基团发射的荧光不被淬灭，这样通过对荧光信号强弱的监测就可实现对产物的检测。荧光信号达到设定的阈值时，经历的循环数越少，说明含有病毒的概率越____________。（4）一次核酸检测历时需16小时，为快速检测可采用抗原-抗体杂交技术，这一技术的关键是要生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体.请写出生产这种抗体的思路：__________________。10．（14分）真核细胞分裂过程中，染色体完成复制后产生的姐妹染色单体保持相互黏附状态，在分裂期才会分离并平均分配到子细胞中。黏连蛋白（姐妹染色单体之间的连结蛋白）的裂解是分离姐妹染色单体的关键性事件，分离酶（SEP）是水解黏连蛋白的关键酶。下图a、b、c分别表示分裂过程中细胞内发生的变化以及对应细胞内某些化合物的含量变化。（1）据图分析，a图处于分裂__________期，你的判断依据是____________________。（2）细胞器是细胞内执行重要功能的结构，b中①所示的细胞器是__________，该细胞器内进行的生理过程包括__________。A．葡萄糖氧化分解B．CO2生成C．乳酸生成D．O2的消耗（3）分离酶（SEP）的活性需要被严密调控。保全素（SCR）能与分离酶紧密结合，并充当假底物而阻断其活性。据此分析，下列描述正确的是__________。A．分离酶没有专一性B．保全素和黏连蛋白是同一种蛋白质C．保全素和黏连蛋白空间结构有局部相似之处D．保全素和黏连蛋白竞争分离酶的活性部位（4）若在细胞培养物中加入APC抑制剂，则细胞分裂会停留在b图时期，该时期为分裂__________期。由此，结合图中信息分析，APC的作用是____________________。11．（14分）真核生物基因中通常有内含子（位于编码蛋白质序列内的非编码DNA片段)，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。有人利用RT-PCR技术（mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增)，获得了牛的G基因，导入到大肠杆菌中，成功表达出G蛋白（一种免疫蛋白）。请回答下列问题：（1）RT-PCR过程需要的酶有_____________；在进行PCR扩增时需要设计_________种引物。（2）RT-PCR的产物经过BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切后，与经过同样双酶切得到的PBV载体连接，该操作程序属于_________，也是基因工程的核心步骤。与单一酶切相比，双酶切具有的优点是________________（答出两点）。（3）若要检测G基因是否翻译出G蛋白，可采用的分子水平的检测方法是_________________。（4）有人从牛的基因组文库中获得了G基因，同样以大肠杆菌作为受体细胞却未得到G蛋白，其原因是________________。12．果蝇体内的Ⅳ号染色体多一条（三体）或少一条（单体）均可以存活并能够繁殖，没有Ⅳ号染色体的个体不能存活。果蝇正常眼（E）和无眼（e）是一对相对性状，基因E、e位于常染色体上。回答下列问题：（1）现有染色体正常的纯合正常眼和无眼果蝇、Ⅳ号染色体单体的纯合正常眼和无眼果蝇可供选择，若要通过一次杂交实验确定E、e这对等位基因是否位于Ⅳ号染色体上，请写出实验思路，并预测实验结果及结论：________。（2）现已证明E、e基因位于Ⅳ号染色体上，若将基因型为EEe的Ⅳ号染色体三体的果蝇与染色体正常的无眼果蝇杂交，则理论上子代的表现型及比例为________，子代正常眼中Ⅳ号染色体正常的果蝇占________。（3）果蝇眼的红色（R）和白色（r）由等位基因R、r控制，现将一只染色体正常无眼雌果蝇和一只染色体正常红眼雄果蝇交配，发现F1中雌果蝇全为红眼，雄果蝇全为白眼。据此推测，雄性亲本的基因型为________；F1雌雄果蝇交配，F2正常眼雌果蝇中纯合子所占的比例为________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、A【解析】

免疫疗法的靶点是正常免疫细胞，通过激活人体自身的免疫细胞，让免疫细胞去杀死癌症细胞。在抗原刺激下，机体的特异性免疫应答一般可分为感应、反应和效应3个阶段。感应阶段是抗原处理、呈递和识别的阶段；反应阶段是B细胞、T细胞增殖分化，以及记忆细胞形成的阶段；效应阶段是效应T细胞、抗体和淋巴因子发挥免疫效应的阶段。【详解】A、由题意可知，癌症免疫疗法主要是通过增强患者的细胞免疫功能来杀死癌细胞，A正确；B、癌症免疫疗法通过直接杀死癌细胞来达到治疗目的，B错误；C、患者免疫功能增强是因为酿脓链球菌侵入导致发生自身免疫而攻击癌细胞，C错误；D、酿脓链球菌激活患者的特异性免疫功能从而消灭癌细胞，D错误。故选A。【点睛】本题考查细胞免疫系统在维持稳态中的作用，要求考生掌握细胞免疫的具体过程，能根据题干要求作出准确的判断。2、D【解析】

本题结合图解，考查植物激素的调节，要求考生识记五大类植物激素的种类、分布和功能，能结合图中信息准确判断各选项。分析题图：第5、6组对比发现，无GA和CK时，不管ABA存在与否，种子都休眠。第6、8组比较发现，无GA有ABA，不管CK存在与否，种子也都休眠；第5、7组比较，无GA和ABA时，不管CK存在与否，种子也都休眠。【详解】A、据图示实验结果可知，种子的休眠和萌发是多种植物激素共同调节的结果，A正确；B、由第3组和6组实验对比，不同的是第3组有GA，第6组无GA，两组同时无CK和有ABA，可知自变量是有无GA，CK和ABA都是无关变量，B正确；

C、根据上述分析可知，第5、6组对比发现，无GA和CK时，不管ABA存在与否，种子都休眠。第6、8组比较发现，无GA有ABA，不管CK存在与否，种子也都休眠；第5、7组比较，无GA和ABA时，不管CK存在与否，种子也都休眠。因此，不管CK和ABA是否存在生理活性浓度，如果GA不存在生理活性浓度，种子都处于休眠状态，C正确；

D、根据第4、5两组，可知GA是种子萌发的必需激素。由于GA是种子萌发的必需激素，但第3组GA和ABA同时存在时休眠，可知，ABA对GA作用的发挥起到抑制作用，D错误。

故选D。3、C【解析】

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。【详解】A、分解尿素的细菌是异养型，不能以CO2作为碳源，A错误；B、倒平板时，不能将打开的培养皿盖放到一边，以免微生物污染，正确的做法是：用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；C、无机盐可以作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定，所以培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定，C正确；D、在完全正确的操作情况下，空白对照组中不应出现菌落。若空白对照组出现菌落，说明操作过程中存在微生物污染，属于实验失误，所有实验数据均不应采用，D错误。故选C。4、B【解析】

分析曲线图：随着生长素浓度的升高，乙烯的浓度也不断提高，成熟叶片的脱落率是先增加后减少；在一定范围内随着乙烯浓度的升高，脱落率提高，但是超过一定范围后，随着乙烯浓度的升高，脱落率逐渐降低。【详解】A、在一定范围内随着乙烯浓度的升高，脱落率提高，但是超过一定范围后，随着乙烯浓度的升高，脱落率逐渐降低，A错误；

B、随生长素浓度的增加，成熟叶片的脱落率是先增加后减少，即脱落率随生长素浓度达到一定值后不断降低，B正确；

C、生长素浓度较低时，随着生长素浓度的增加，乙烯浓度和叶片脱落率均增加，乙烯与生长素对叶片脱落不是拮抗作用，C错误；

D、由图可知，高浓度生长素可降低成熟叶片脱落率，由于不同器官、幼嫩部位与衰老部位对生长素的敏感程度不同，高浓度的生长素可能降低了成熟叶的脱落率，但有可能提高了幼嫩叶或花的脱落率，此实验结果不一定适用于农业生产，D错误。

故选B。5、A【解析】

1.分泌蛋白的合成与分泌过程：附着在内质网上的核糖体合成蛋白质→内质网进行粗加工→内质网“出芽”形成囊泡→高尔基体进行再加工形成成熟的蛋白质→高尔基体“出芽”形成囊泡→细胞膜，整个过程还需要线粒体提供能量。2.有丝分裂过程：（1）间期：进行DNA的复制和有关蛋白质的合成，出现染色单体；（2）前期：核膜、核仁逐渐解体消失，出现纺锤体和染色体；（3）中期：染色体形态固定、数目清晰；（4）后期：着丝点分裂，姐妹染色单体分开成为染色体，并均匀地移向两极；（5）末期：核膜、核仁重建，纺锤体和染色体消失。【详解】A、在抗体的合成和分泌过程中，浆细胞（而不是胰腺细胞）的核糖体、内质网、高尔基体密切配合，A错误；B、高尔基体通过囊泡运输发挥的定向分选作用，必然与基因指导合成的蛋白质分子的精准导向作用密切相关。也就是说，在抗体的合成和分泌过程中，高尔基体在囊泡运输中的作用受基因的精密调控，B正确；C、在动物细胞有丝分裂过程中，中心体发出星射线，形成纺锤体，纺锤丝牵引染色体，线粒体为这些过程供能，它们间接或直接地共同参与染色体的均分，C正确；D、在动物细胞有丝分裂过程中，原癌基因负责调控细胞周期，控制细胞的正常生长和分裂进程。抑癌基因阻止不正常的细胞增殖，故细胞周期的运转受原癌基因和抑癌基因的调控，D正确。故选A。【点睛】本题考查细胞的有丝分裂，以及在抗体分泌和有丝分裂过程中各细胞器之间的分工与合作的知识，意在考查学生对所学知识的理解与掌握程度，难度不大。6、C【解析】

原生质层包括细胞膜、液泡膜以及它们之间的细胞质，原生质层相当于一层半透膜。细胞生物的遗传物质是DNA；组织细胞中由于不断进行有氧呼吸消耗氧气，因此其中的氧气浓度是低的，因此组织细胞中的氧气能通过自由扩散的方式进入细胞。【详解】A、动物细胞没有原生质层，但有细胞膜，因此能发生渗透作用，A错误；B、细胞膜中的磷脂分子是由甘油、脂肪酸和磷酸等组成的，B错误；C、细胞内的氧气浓度是低的，故组织液中的可以通过自由扩散进入组织细胞中，C正确；D、细胞的遗传物质是DNA，DNA彻底水解后可以得到4种碱基，D错误。故选C。7、A【解析】

反射弧包括感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器（传出神经末梢和它所支配的肌肉或腺体）组成；反射包括条件反射和非条件反射，条件反射指出生后在生活过程中通过训练而逐渐形成的，即与高级神经中枢脑有关，也与脊髓等低级中枢有关。【详解】A、①所在神经元的细胞体位于脊髓，A错误；B、据图分析可知：脑干中有传出神经与心脏和血管相连，故脑干中有控制心脏和血管运动的神经中枢，即脑干可以控制两者的运动，B正确；C、①—③过程为受刺激后心率加快的过程，该过程中受神经系统和激素的调节，心脏有节律地收缩、舒张，C正确；D、看到恐怖画面引起心率加快，该过程有完整的反射弧，“产生害怕的感觉同时心率加快”，该过程同时感到害怕，有大脑皮层的参与，这一反射属于条件反射，D正确。故选A。【点睛】解答此题需要明确反射弧的组成，区分条件反射与非条件反射的不同，进而结合题图分析作答。8、B【解析】

本题结合细胞分裂图像考查细胞分裂的知识，要求考生理解有丝分裂和减数分裂过程中染色体变化规律，能利用所学知识分析、判断该细胞处于减数第一次分裂后期，进而分析、判断各选项。【详解】A、分析图像可知，该细胞内染色体平分成两组分别向细胞两极移动，每一极均含有染色单体但不含同源染色体，故该细胞是处于减数第一次分裂后期的初级精母细胞，此时细胞内含有2套完整的遗传信息，即2个染色体组，A错误；B、由上述分析可知，该动物的体细胞内含有2对共4条染色体，在其有丝分裂后期细胞内会出现4个染色体组，其次级精母细胞内可能含有1个（前期和中期）或2各染色体组（后期），B正确；C、该细胞为初级精母细胞，此时细胞的基因型为AAaaBBbb，C错误；D、若用适量秋水仙素处理该细胞，染色体的着丝粒可正常分裂，但由于纺锤体无法形成，故着丝点分裂后染色体无法移向细胞两极，D错误。故选B。二、非选择题9、逆转录（或：反转录）逆转录酶Taq酶（ORF1ab和核壳蛋自基因N）的特异性引物目的基因大①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白（或灭活的新冠病毒）：②提取免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经多次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞；③将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养、或注射到小鼠腹腔内增殖，从培养液或小鼠腹水中就提取大量的单克隆抗体【解析】

1.将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后，完成高温变性、低温复性、适温延伸的热循环，并遵守聚合酶链式反应规律，与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断，荧光素游离于反应体系中，在特定光激发下发出荧光，随着循环次数的增加，被扩增的目的基因片段呈指数规律增长，通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度，求得Ct值，同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照，即可得出待测标本目的基因的拷贝数。2.单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用单克隆抗体技术来制备，单克隆抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。【详解】（1）以RNA为模板合成DNA的过程为逆转录或反转录，故题图中以病毒的RNA为模板合成cDNA的过程为①逆转录，再对cDNA进行PCR扩增，这项技术称为RT-PCR。（2）RT-PCR是扩增DNA的过程，因为加入的模板是RNA，故需要加入的酶是逆转录酶和Taq酶。要从cDNA中扩增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核壳蛋白基因N关键在于要加入（ORF1ab和核壳蛋自基因N）的特异性引物、dNTP及所需的酶一起构成反应体系，从而实现了相关基因的扩增。（3）RT-PCR加入Taqman荧光探针可以通过测定荧光强度来检测产物浓度，原理如下：Taqman荧光探针为一段与目的基因互补的核苷酸单链，两端分别连接一个荧光基团R和一个淬灭基团Q。探针结构完整时，R发射的荧光被Q吸收；而PCR扩增时结合在模板链上的探针被切断，使R和Q分离，R基团发射的荧光不被淬灭，这样通过对荧光信号强弱的监测就可实现对产物的检测。若荧光信号达到设定的阈值时，经历的循环数越少，说明扩增次数少，说明更多的荧光探针与目的基因进行了碱基互补配对，可推测获得的核酸产物中含有病毒的概率越大。（4）若采用抗原-抗体杂交技术进行病毒检测，需要制备能与新冠病毒结合的特异性抗体，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高且能够大量制备的优势，故设计的思路是设法获得能产生该特异性抗体的杂交瘤细胞，步骤如下：①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白（或灭活的新冠病毒），目的是要获得能能产生特异性抗体的效应B细胞；②提取免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经多次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞；③将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养、或注射到小鼠腹腔内增殖，从培养液或小鼠腹水中可以提取大量的单克隆抗体。【点睛】熟知逆转录、PCR扩增和单克隆抗体的相关知识是解答本题的关键！能够理解题目中关于荧光检测的关键信息是解答本题的难点，获取信息能力是本题考查的重要能力。10、间有完整的核膜核仁线粒体BDCD中APC含量上升将使得保全素（SCR）分解，于是释放分离酶，分离酶分解染色单体之间黏连蛋白，为染色单体移动到细胞两极完成DNA均分做准备【解析】

根据图表信息，分析三种蛋白质的相互关系，SCR与SEP结合会抑制SEP发挥作用，二者分离，SEP会促进黏连蛋白的水解。由图可知，a时期APC含量很低，SCR与SEP结合，对应有丝分裂间期。b时期，APC含量升高，与SCR结合，释放SEP，且SCR含量降低，对应有丝分裂中期。c时期，APC和SEP含量进一步升高，且SCR含量降低，对应有丝分裂后期。【详解】（1）据图分析，a图核膜核仁完整存在，处于分裂间期；（2）b中①所示的细胞器有特殊结构—嵴，为线粒体，该细胞器内进行的生理过程包括CO2生成和O2的消耗。故选BD；（3）A、分离酶具有专一性，只能催化黏连蛋白的水解，A错误；B、保全素和黏连蛋白是不同蛋白质，B错误；C、保全素和黏连蛋白空间结构有局部相似之处，因为二者可以结合，C正确；D、保全素和黏连蛋白均可与分离酶结合，故二者竞争分离酶的活性部位，D正确。故选CD；（4）b图时期着丝粒排列在赤道板上，该时期为分裂中期。间期a时，APC含量很低，中期b时，APC含量又升高；APC含量上升，将使得保全素（SCR）分解于是释放分离酶，分离酶分解染色单体之间黏连蛋白，为染色单体移动到细胞两极完成DNA均分做准备。【点睛】本题需要准确判断各细胞状态图像对应的有丝分裂时期，再结合三种蛋白的含量变化判断其相互作用，学生要学会从题干中提取相关的信息，结合所学知识作出回答。11、逆转录酶和Taq酶（热稳定的DNA聚合酶）2构建基因表达载体防止目的基因（或载体）自身连接；防止目的基因与运载体反向连接抗原—抗体杂交从基因组文库获取的G基因有内含子，在大肠杆菌中，其转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出G蛋白【解析】

分析题文描述可知：本题综合考查学生对基因工程的基本操作程序，特别是基因表达载体的构建、目的基因的检测与鉴定等相关知识的识记和理解能力。【详解】（1）RT-PCR过程，首先是以mRNA为模板逆转录为cDNA，此时需要逆转录酶参与催化；其次是将cDNA进行PCR扩增，在扩增过程中不开Taq酶（热稳定的DNA聚合酶）的催化。在进行PCR扩增时需要设计2种引物，以便分别与两条DNA模板链结合。（2）基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心步骤。与单一酶切相比，双酶切具有的优点是：防止目的基因或载体自身连接；防止目的基因与载体反向连接。（3）若要检测G基因是否翻译出G蛋白，可采用抗原—抗体杂交技术。（4）真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有内含子；牛为真核生物，大肠杆菌属于原核生物；原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。可见，从牛的基因组文库中获得的G基因有内含子，在大肠杆菌中，其转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出G蛋白，因此以大肠杆菌作为受体细胞时未能得到G蛋白。【点睛】本题的难点在于对（4）题的解答，其关键在于从题意中提取有效信息，即真核生物基因中通常有内含子，原核生物基因中没有内含子，原核生