2026年全日制医学博士研究生入学考试实验操作题库

2026年全日制医学博士研究生入学考试实验操作题库一、显微镜观察技术（共3题，每题10分）1.显微镜下观察人体组织切片题目：取一张已制备好的“人胃黏膜组织切片”，在显微镜下观察并回答以下问题：（1）描述胃黏膜上皮细胞的结构特点及主要功能。（2）简述胃黏膜固有层中哪种细胞与胃酸分泌直接相关，并说明其形态学特征。（3）指出胃黏膜上皮细胞与非上皮细胞（如腺上皮细胞）的细胞连接方式及意义。答案与解析：（1）胃黏膜上皮细胞为单层柱状细胞，顶部有微绒毛，细胞核位于细胞中部，呈圆形或椭圆形。其主要功能是吸收营养物质和分泌黏液。（2）与胃酸分泌直接相关的细胞是壁细胞，其形态学特征为体积较大，细胞质呈强嗜碱性（因富含胃酸分泌酶原颗粒）。（3）上皮细胞间主要存在紧密连接，防止胃液渗漏至固有层；此外还有桥粒连接，增强细胞稳定性。2.显微镜下观察肿瘤细胞异型性题目：取一张“人肺癌组织切片”，在显微镜下观察并回答：（1）描述肿瘤细胞与正常肺泡上皮细胞的形态差异（至少三点）。（2）指出肿瘤细胞核浆比例的变化及其临床意义。（3）简述肿瘤细胞间质成分的变化及其对肿瘤侵袭性的影响。答案与解析：（1）肿瘤细胞较正常细胞更大，形态不规则；核染色质增多、边移位；细胞核形态异常（如核分裂象）。（2）核浆比例显著增大，提示细胞增殖活跃，是肿瘤恶性程度的重要指标。（3）肿瘤间质中胶原纤维减少，血管增生，为肿瘤生长和转移提供通路。3.显微镜下观察炎症细胞浸润题目：取一张“急性阑尾炎组织切片”，在显微镜下观察并回答：（1）描述阑尾腔内及黏膜下层的主要炎症细胞类型及形态特征。（2）简述中性粒细胞与淋巴细胞在炎症反应中的不同作用。（3）指出炎症局部血管的变化及其对炎症进程的影响。答案与解析：（1）阑尾腔内以中性粒细胞为主（核染色质呈粗块状），黏膜下层可见淋巴细胞及浆细胞。（2）中性粒细胞主要吞噬病原体，淋巴细胞参与免疫调节和记忆反应。（3）炎症局部血管扩张、通透性增加，利于炎症介质和细胞渗出。二、生化实验操作（共4题，每题10分）1.蛋白质定量分析题目：使用Bradford法测定某样本（如血清）的蛋白质浓度，回答：（1）简述Bradford法的原理及指示剂（CoomassieBrilliantBlueG-250）的作用机制。（2）若样品中存在高浓度糖类干扰，应如何消除干扰？（3）写出蛋白质浓度计算的公式，并说明各符号含义。答案与解析：（1）Bradford法基于蛋白质与染料结合后颜色变深，因蛋白质分子与染料结合后结构改变，吸收峰波长移动。（2）可通过添加脱糖剂（如DNase）降解糖类，或采用双缩脲法（对糖类干扰小）替代。（3）公式：蛋白质浓度（mg/mL）=（A样品-A空白）×稀释倍数×标准曲线斜率。2.DNA提取与电泳检测题目：从新鲜血液中提取DNA并使用琼脂糖凝胶电泳检测，回答：（1）简述DNA提取的常用方法及关键步骤。（2）若电泳结果出现弥散条带，可能的原因有哪些？（3）说明DNA在电场中迁移的原理及染色方法。答案与解析：（1）常用方法包括苯酚-氯仿法，关键步骤：细胞裂解、蛋白酶K消化、酚氯仿抽提、乙醇沉淀。（2）弥散条带可能因DNA降解、浓度过高或电泳条件不当（如电压过高）。（3）DNA带负电荷，在电场中向正极迁移；染色常用EB（溴化乙锭）或SYBRSafe。3.酶活性测定题目：测定某组织匀浆中的乳酸脱氢酶（LDH）活性，回答：（1）简述LDH测定原理及反应体系的主要成分。（2）若酶活性测定结果偏高，可能的原因有哪些？（3）说明酶活性单位定义及计算方法。答案与解析：（1）LDH催化乳酸氧化为丙酮酸，生成NADH，通过spectrophotometer测定吸光度变化。（2）可能原因：反应温度过高、底物浓度不足或存在抑制物。（3）单位：μmolNADH/min/mgprotein。计算：活性=（ΔA/min）×稀释倍数/蛋白浓度。4.脂质化学分析题目：测定血清总胆固醇（TC）含量，回答：（1）简述胆固醇测定的酶法原理及关键酶的作用。（2）若测定结果偏低，可能的原因有哪些？（3）说明胆固醇测定的质量控制措施。答案与解析：（1）胆固醇在胆固醇酯酶作用下水解为自由胆固醇，与胆固醇氧化酶反应生成胆固醇酸，通过显色剂测定吸光度。（2）可能原因：样品溶血、酶活性不足或试剂失效。（3）需使用标准品校准、定期质控及避免样品污染。三、病理实验操作（共3题，每题10分）1.染色技术比较题目：比较苏木精-伊红（H&E）染色与免疫组化（IHC）技术的应用场景，回答：（1）简述H&E染色的原理及细胞核和细胞质的染色特点。（2）IHC技术中抗体选择需注意哪些问题？（3）说明H&E染色在肿瘤诊断中的主要作用。答案与解析：（1）H&E染色基于细胞成分对酸碱染料的不同亲和力，核呈蓝紫色，质呈粉红色。（2）IHC需选择特异性抗体、优化稀释度及避免交叉反应。（3）H&E可评估组织结构完整性、细胞异型性及炎症反应。2.细胞培养技术题目：体外培养某肿瘤细胞株，回答：（1）简述细胞培养的基本步骤及无菌操作要点。（2）若细胞出现接触抑制，可能的原因有哪些？（3）说明细胞冻存与复苏的注意事项。答案与解析：（1）步骤：细胞复苏、贴壁培养、传代，要点：无菌环境、避免污染。（2）可能原因：培养基成分不足、pH失衡或细胞密度过高。（3）冻存需加入DMSO降低冰晶损伤，复苏后需缓慢恢复培养条件。3.组织切片制作题目：制备“肝组织石蜡切片”，回答：（1）简述组织固定、脱水、包埋的原理及常用试剂。（2）若切片出现脱片现象，可能的原因有哪些？（3）说明染色前组织预处理的目的。答案与解析：（1）固定用10%中性缓冲甲醛，脱水用乙醇梯度，包埋用石蜡。（2）可能原因：包埋不均、切片刀钝或染色前处理不当。（3）预处理（如脱水、脱蜡）使组织透明，利于染料渗透。四、临床实验技能（共4题，每题10分）1.心电图（ECG）分析题目：分析一份“心肌梗死患者ECG”，回答：（1）描述ST段抬高型心梗的典型ECG表现。（2）若出现T波倒置，需排除哪些干扰因素？（3）说明ECG导联选择的临床意义。答案与解析：（1）ST段抬高、病理性Q波、T波倒置。（2）需排除低钾血症、药物影响（如洋地黄）。（3）导联选择反映不同心肌区域损伤，如V1-5导联评估前壁损伤。2.实验室检验质控题目：评估某生化检验项目的室内质控（IQC），回答：（1）简述IQC的常用方法及判断标准。（2）若质控值超出范围，需采取哪些措施？（3）说明质控品与患者样本的区别。答案与解析：（1）常用方法：每天检测质控品，结果在±2SD内为在控。（2）需检查试剂、仪器或操作，必要时重新校准。（3）质控品成分稳定，用于日常检测，患者样本需评估个体差异。3.微生物学实验题目：进行“金黄色葡萄球菌药敏试验”，回答：（1）简述Kirby-Bauer法原理及结果判读标准。（2）若菌株出现耐药，可能的原因有哪些？（3）说明药敏试验的临床意义。答案与解析：（1）基于抑菌圈直径判断敏感性，如≥15mm为敏感。（2）可能原因：基因突变、质粒介导耐药或抗生素不当使用。（3）指导临床合理用药，避免耐药菌扩散。4.影像学读片题目：分析一张