2022Agilent 1260 lnfinity荧光检测器用户手册

Agilent1260AgilentAgilent1260FLDAgilent1260FLD 小 警告Agilent1260Infinity(G1321BSPECTRAAgilent1260Infinity(G1321C)Agilent1260FLDAgilent1260FLDAgilent1200Infinity 如何使用“峰中的全部光谱”和“仅顶点光谱”模式收集光 6故障排除和诊断 拉曼ASTM信噪比测 Agilent1260FLDAgilent1260FLD BCD电 CAN/LAN电 与计算机相连的Agilent模 设置8位配置开关（不带板载 报废电子电气设备(WEEE)指令 PEEKAgilentTechnologiesAgilent1260FLD Agilent Agilent1260FLDAgilent1260FLD表 在2013年6月作为不带光谱和多信号功能的1260InfinityFLD74Hz为A.06.54。通过具有固件B.02.16版本的手持控制器、驱动程序A.02.08、AgilentOpenLABCDSChemStationEditionC.01.05、OpenLABEZChromEditionEEA.04.05、ICFA.02.01和LabAdvisorB.02.04进行控制。G1321C无法转换为G1321A/B。G1321BSPECTRA 在2010年6月作为带光谱和多信号功能的1260InfinityFLD74Hz。G1321BG1321A（模拟模式）G1321C数据采集速率提高为最大值144.9Hz（仪器固件 在1998年8月作为带光谱和多信号功能的1100系列FLD18HzG1321BFLDGLPG1321B(G1321B40性能指标图 Agilent1260Infinity荧光检测 Agilent1260FLDAgilent1260FLD第12页的图2”。例如钠的h㛑㑻㛑㑻㛑㑻h㛑㑻图 第13页的图3”。物质的吸收特征最大值为λEX，而发射特征最大值为λEM。图 后的发射延迟的不同。如果分子被照射之后发光时间为10-9秒到10-5秒，这10-3秒，则这一过程叫做与溶剂分子发生碰撞时）（T），请第13页的图4”。图 E= Agilent1260FLDAgilent1260FLD

(⊶䭓

图 EiEs（即让Ev=Ei-（如果有的话）。（176 Agilent1260FLDAgilent1260FLD䮾䮾㾺⇭䮾⣁㓱㘮ܝ䗣䬰⣁㓱䬰Exܝᷙ㒘REF图 光源是一个氙灯。此灯以3µs的闪烁频率发出200nm到900nm的连续光谱。光输出分布可以用间隔为100nm第18页的图7”。此灯可以使用约1000小时，具体取决于灵敏度要求。在自动操作过程UV（特别是低于250nm时）与可见光相比要厉害得多。一般使用“LAMPONduringrun（在运行过程中开灯）economymode”⊶䭓图 1200ܝܝᷙ(Ex)ݙ图 1703020的9ডᇘⱘডᇘⱘ0䰊200800ডᇘⱘ1䰊200800ডᇘⱘ1䰊4000rpm外区250nm左右的1级光，而发射光栅反射可见光区400nm左右的光。流通池是由固体熔融石英体做成，可承受最大20bar的背压。背压如高于20bar图 过滤掉，以便减小1级散射光和2第20页的图9”。宽是20nm。2211”。这些电用是由打拿极上的电压所致，它可由微处理器进行控制。您可以通过PMTGAIN䰇图 第17页的图6”。PMTPMT200600nm佳的灵敏度。如在较高的波长范围使用对红光敏感的PMT可以提高其性能。(EX)（取决于EX波（176”）。该柔光器采用石 Agilent1260FLDAgilent1260FLD12”。化学发光的寿命很短，所以荧光检测器仅可以在灯照射之后的很短时䎳䏾ᯊ䯈[­12荧光的测量（FLDᯊ䯈[­图 296Hz296图 注意 取消“economy”（经济）模式将会显著降低灯的寿命。为了节约灯的寿命，在 数据的分辨率在响应时间为4s（缺省值，相当于1.8s的时间常数，适合于标准色谱条件）时是20位。弱信号的分辨率不足，因而会导致定量分析时出PMTGAIN。如果与设置值差距较大，就改变方法或检查溶剂的第117页的寻找最佳信号放大值”。您可以使用PMTGAIN来放大信号。根据您设置的PMTGAIN，落在光电倍增管上PMTGAIN⻋㤻图 PMTGAIN2PMTPMTGAIN2个因子（018）。为了在发射光强最高时优化峰的放大，请增加PMTGAIN的设置值，使信噪比达最佳。外跟踪和保存。保存后，信号通过A-D（数字）。这些数据点以11个数据为一束组成数据串，这是数据处理的第一步。集束有利于（第28页的图16”所显示的大黑点）随后经过脉冲串过滤器过RESPONSETIME串单元的长度：RESPONSETIMERESPONSETIME（比如由1秒增加到4秒）信噪比增加两倍。䲚㛝

ᣛᅮ3↣Ͼ㛝Ł

催图 Agilent1260FLDAgilent1260FLD1200Infinity图 溶剂盒(1)设计为可存放最大体积为6L的溶剂。溶剂盒中存放的单个溶剂瓶2.5LAgilent1200Infinity（Internet(4)(5)67 Agilent1260FLDAgilent1260FLD对于Agilent1260Infinity生物惰性LC系统，AgilentTechnologies在流泛的接受，因为它们对生物样品具有最佳惰性，能够确保在较宽的pH范围内对表 在Agilent1260Infinity系统中使用的生物惰性材 Agilent1260InfinityAgilent1260InfinityAgilent1260InfinityAgilent1260InfinityMWD/DAD10mm，13120bar12MPaBIO（部件号G5615-68755）(G5615-60022)（Agilent1260InfinityDAD

表 在Agilent1260Infinity系统中使用的生物惰性材 10mm,V(s)1.0µL)(G5615-60018)以及60mm,V(s)4.0µL)（Agilent1200InfinityDAD8µL，20bar(pH1–12)，包括毛细管套件流通池BIO（部件号G5615-68755）G5615-60005)（Agilent1260InfinityFLDG5616-（Agilent1290Infinity

PEEK（ Agilent使用不锈钢包层的PEEK触到钢，使压力稳定在600bar以上。 注意 要确保获得Agilent1260Infinity生物惰性LC系统的最佳生物兼容性，不要在流路中包括非惰性标准模块或部件。不要使用未标记为Agilent“生物惰性107材料信息Agilent1260FLD Agilent Agilent1260FLDAgilent1260FLD393 警 如果设备连接到高于规定数值的线路电压， 警 只要未拔掉电源线，即使在切断电源时模块仍会部分带电。 小 无法触及电源插头。 警 没有接地连接或使用非指定的电源线 警 使用非随附电源线EMC 警 不当使用随附电源线2.5cm（1.0）空间，并在背部留出大约8cm（3.1英寸），以用于空气流通和电路连接。HPLC 小 模块内的冷凝水 Agilent1260FLDAgilent1260FLD表11.5kg(26140x345×435mm(7x×17100–240VAC,±105060Hz，±5VA/70W/239040°C(32-104–70°C(-40<（40°F)2000m(65624600m(15091

安装类别II，污染程度 表 性能指标Agilent1260Infinity荧光检测器 H2O500（信号时测Ex=350nm，Em=397nm450nmH2O3000（暗值时Ex=350nm，Em=397nm450nm

H2O300Ex350nm，Em397nm且Ex350nm，Em450nm5W4000296Hz74Hz74Hz，145145HzA.06.54200nm1200带宽：20nm（固定300 表 表Agilent1260InfinityAgilent1260FLDAgilent1260FLD 范围：可设置200nm-1200nm带宽：20nm（固定400nm 最多4个单波长、响应时间、PMT增益、基线行为（增补、自 扫描速度：28ms（0.6s200400nm，10nm）1–20nm 重复性+/-0.23nm 标准：8µL体积和20(2MPa)1mL为8µL生物惰性：8µL20bar(2MPa)(pH微量：4µL20bar(2MPa)最大压力控制和数据评估AgilentChemStationforLCAgilentG4208A，带表 性能指标Agilent1260Infinity荧光检测器1V100mV100LU是建议范围，请参见《FLD 控制器局域网(CAN)、RS-232C、 手持控制器、AgilentLabAdvisor和色谱数据系统提供故GLP功能 早期维护反馈(EMF)用于根据亮 0–40°C恒定温度（湿<95（不冷凝）时 140mmx345mmx435(5.5x13.5x17（xx 11.5kg(25.5 表 表Agilent1260Infinity表Agilent表Agilent1260InfinityAgilent1260FLDAgilent1260FLDH2O500（Ex=350nm，Em=397nm450nmH2O3000（暗值时Ex=350nm，Em=397nm450nm 5W，寿命4000h 296Hz针对单一信号模式74Hz针对节能模式 74 范围：可设置200nm-1200nm带宽：20nm（固定300nm 范围：可设置200nm-1200nm带宽：20nm（固定400nm 最多4个单波长、响应时间、PMT增益、基线行为（增补、自

0.23nm标准：8µL20(2MPa)1mL8生物惰性：8µL20bar(2MPa)(pH微量：4µL20(2MPa)AgilentChemStationforLCAgilentG4208A100mV100LU1V100LU围，请参见《(CAN)、RS-232C手持控制器、AgilentAdvisorGLP功能 早期维护反馈(EMF)用于根据亮 0–40°C恒定温度（湿<95（不冷凝）时 140mmx345mmx435(5.5x13.5x17（xx 11.5kg(25.5表 性能指标Agilent1200系列荧光检测器 H2O500（信号时测Ex=350nm，Em=397nm450nm，标准流通池H2O300Ex350nm，Em397nm且Ex350nm，Em450nm 5W，寿命4000h

表Agilent表Agilent1200 表 表Agilent1200Agilent1260FLDAgilent1260FLD 296Hz针对单一信号模式74Hz针对节能模式 37 范围：可设置200nm-1200nm带宽：20nm（固定300nm 范围：可设置200nm-1200nm带宽：20nm（固定400nm 最多4个单波长、响应时间、PMT增益、基线行为（增补、自 扫描速度：28ms（0.6s200400nm，10nm）1–20nm 重复性+/-0.23nm标准：8µL20(2MPa)1mL8生物惰性：8µL20bar(2MPa)(pH微量：4µL20(2MPa)AgilentChemStationforLCAgilentG4208A100mV100LU1V100LU围，请参见《(CAN)、RS-232C（G4208AGLP功能 早期维护反馈(EMF)用于根据亮 0–40°C恒定温度（湿<95（不冷凝）时 140mmx345mmx435(5.5x13.5x17（xx 11.5kg(25.5Agilent1260FLD Agilent Agilent1260FLDAgilent1260FLD 小 “到货时缺损”问题193维护的零件”AgilentTechnologies表 CAN电 CD（发货物品的一部分-不特定于模块）（197标准附件工具箱”）

Agilent1260FLDAgilent1260FLDAgilent1260Infinity按下面配置安装Agilent1260InfinityLC系统的模块，就能使部件发挥最佳性能（53185419”）。该配置可以优181260Infinity（前视图䘹᥻⬉䘹᥻⬉CANᘏ1ࠄ2Ͼ䕧LANࠄLC࣪ᄺI԰(ԡ㕂图 1260Infinity建议的叠放配置（后视图（第55页的图20第56页的图21”）。㜅⇨ᴎ(ৃ䗝㞾ࡼ䖯图 LANLANCANᘏ㒓⬉㓚䘹᥻⬉CANᘏ图 1260Infinity建议的两个模块叠放（后视图 Agilent1260FLDAgilent1260FLDAgilent1200Infinity 警 有毒、易燃及有害溶剂、样品及试剂（例如，戴上护目镜、安全手套，穿上防护衣。6L)Agilent1200Infinity溶剂盒附带指南的印刷副本，电子副本可从Internet 注 Agilent1200Infinity图 (AB)页的图22”。 警 有毒、易燃及有害溶剂、样品及试剂图 Agilent1260FLDAgilent1260FLD 200电缆概述 安捷伦数据系统和/或手持控制器G4208A 警 只要未拔掉电源线，即使在切断电源时部件仍会部分带电。㓓C/咘C/㑶(ᏺ㓓图 CANAgilentChemStationLANLAN 注意 检测器(DAD/MWD/FLD/VWD/RID)是通过LAN（由于数据负载量较大）进行控制 AgilentAPG（可选）LEDLAN៪GPIB(ҙ䰤图 注意 当按下线路电源开关且绿色指示灯亮起时，检测器打开。当线路电源开关弹起且 注 注 随着1260Infinity模块的引入，已去掉了GPIB接口。 Agilent1260FLDAgilent1260FLD 扳手，1/45/16 LC系统中已安装检测器 警 有毒、易燃及有害溶剂、样品及试剂（例如，戴上护目镜、安全手套，穿上防护衣。 注意 流通池在运输时填充有异丙醇（建议在将仪器和/或流通池运输到其他场所时亦1按下释放按钮，卸下较低的前盖，以进入流23从附件工具箱中取出色谱柱检测器毛细管进4注意（最大为20bar）。压所造成的，也就是FLD看到的压力。5（上为678 注意 应该在不卸下前盖的情况下操作检测器，从而防止流通池区域受外界强劲气流影 Agilent1260FLDAgilent1260FLD20135，AgilentUHP-FF5↿㉇5↿㉇1/4㣅图 新生物惰性毛细管和UHP-FF接

图 注意 有关新UHP-FF接头（2013年5月引入）发货之前在模块中使用的毛细管和接头的处理说明，请参见“第249页的不锈钢包层PEEK毛细管的安装”。 注意 要处理2013年5月之前生产的生物惰性毛细管，您需要1/4inch扳手而不是5mm安装工具。安装UHP-FF 毛细管和接头5mm↯㒚↯㒚5↿㉇(5043-09155mm（ 小 毛细管可能损坏将UHP-FF接头用于生物惰性毛细管时，请不要尝试从这些毛细管中卸下接PEEKPEEKৢৢࠡ图 生物惰性零死体积(ZDV)ZDV（5067-4741）接头有两个不同的连接器，需要按正确的顺 小 生物惰性ZDV接头可能泄漏或损坏。ZDV112Agilent1260FLD 步骤1：检查LC系统中的杂 步骤2：优化检测限值和灵敏 步骤3：建立常规分析方 如何使用“峰中的全部光谱”和“仅顶点光谱”模式收集光 Agilent Agilent1260FLDAgilent1260FLD 警 有毒、易燃及有害溶剂、样品及试剂（例如，戴上护目镜、安全手套，穿上防护衣。6L)Agilent1200Infinity溶剂盒附带指南的印刷副本，电子副本可从Internet 注 Agilent1200Infinity57有关泄漏和废液处理的安装信息”。LC（信噪比较低）。15111优化检测器 注意 本章中介绍的某些功能（例如光谱采集、多波长检测）在G1321CFLD上不可 Agilent1260FLDAgilent1260FLDAgilentAgilent1260Infinity器进行校验。编号 LC Agilent0.5mL0.15wt0.15wt0.01wt0.03wto PEEK（2 ST0.17mmx150FLDLC5表 A=水=35B65 OSD-Hypersil色谱柱，内径125mmmm5µm 等度标样，用甲醇稀释为 1.5压缩因子A（水 压缩因子B（乙腈 冲程A和 4 5柱温箱温度 30FLD激发/发射波 EX=246nm、EM=317FLDPMT增 PMT=FLD响应时 47829FLD（B、图 FLD参Ex=246Ex=246Ex=250Ex=230㘨Ex=290图 250nm（λEX246nm，λEM317nm）250nmλEX图 Agilent1260FLDAgilent1260FLD（包括光谱采集）是获得完美结果的基础。本章介绍可以对Agilent第80页的表9表 12：优化检测限值3：建立常规分析 步骤1：检查LC痕量荧光检测的一项重要要求是，LC系统中必须无任何荧光污染物。大多数污使在开始进行分析之前也可以使用这一方法，通过在FLD的透明池中直接装入8132样品的荧光区域位于两个杂散光区域之间：一级、二级Raleigh杂散光和拉曼nm

ᴖ 1 2图 由于Raleigh示的是一级Raleigh杂散光。一级Raleigh杂散光下面是水的拉曼谱带。因为280nmRaleigh560nm步骤2：ᔦ—࣪⊶䭓440nmᔦ—࣪⊶䭓µg/ml5nm，PMT图 使用一台荧光光谱仪或是在LC停流下进行测量，对每一个化合物重复上述任（8132”）。因为这是一个繁琐的过程，所以Agilent1200InfinityLCI用，以手动方式在FLD透明池中进行此项试验为好。IIAgilent1260InfinityLCIIIAgilent1200InfintyFLD/DADDAD（相当于激发光谱），以FLD采集发射光谱，二者均单独方法ILCLC检测器和专用的荧光分光光度计在光学设计上有差别，或者检测器之间也不Agilent1260InfinityLC第84页的图34Agilent1260Infinity荧光检测器和手动透明池在单一脱激发波长为250nm、315nm或350nm时可能各不相同。从图上看到最大的发射波长是440nm。84(1µg/ml)5nm，PMT1241䰊

350nm 315nm 250nmEx Em图 IIFLDLC(PNA)，在许多标准方法中都有说明，包括EPADIN87表15PNA15表1003508.2420(g,h,i)19.0500用于并(1,2,3-c,d)第88页的图36”所示。当发射光谱和激发波长重叠时，杂散光将产生（红光）区域。这一现象可以通过自动适应波长范围来避免。260nm的激发波长适合于所有PNA。表11PNA Vydac，2.1x200mm，PNA，5 A=水；B=乙腈 3分钟1422 0.4 18 5FLD设 PMT45jᑊ(a)㪑jᑊ(b)㤻㪑jᑊ(k)㤻㪑jᑊ(a)㡬Ѡjᑊ(ah)jᑊ(g,h,i) ᑊ(1,2,3–cd)ᯊ䯈Emܝ№ᅮ15(5µg/ml)图 jᑊ(a)㪑jᑊ(b)㤻㪑jᑊ(k)㤻㪑jᑊ(a)㡬Ѡjᑊ(ah)jᑊ(g,h,i)㢱 ᑊ(1,2,3–cd)ᯊ䯈ܝ图 第88页的表12”中。表1215IIIDAD/FLD2,3DAP2-3AHP)杂质。DAP和AHP的参比样品用二极管阵列检测和荧光检89表DAPDAP第90页的表DAPAHP合物以供参比之用。为了能看到已知的DAP和AHP杂质，色谱柱被非荧光的氨（2MBC）过载。ᔦ—࣪DADܝ⊶䭓的，说明UV光265nmᔦ—࣪DADܝ⊶䭓图 2,3-二氨基吩嗪(DAP)的紫外光谱和荧光光ᯊ䯈图 ᯊ䯈表13DAPMBC ZorbaxSB，2x50mm，PNA，5 A=水；B=乙 0分钟10 0.4 35 5FLD设 PMT45265nm430540步骤3：准备要彻底去除干扰，或者LC方法必须可承受不利的样品。对难以处理的基FLD在光谱模式下，FLDPNA波长进行发射，可以监测所有15个PNA（第92页的表”）。表14PNA（请参见下图 Vydac，2.1x250mm，PNA，5 A=水；B=乙腈 3min，6014.5min，9022.5min，95 0.4 22 2FLD设 PMT4 ᑊ(1,2,3–cd)ᯊ䯈1▔থ⊶䭓Ў2601㧬8jᑊ(a)㪑4থᇘ⊶䭓Ў2㢞944045003㢈10jᑊ(b)㤻㪑4㧆11jᑊ(k)㤻㪑5㪑12jᑊ(a)㡬6㤻㪑13Ѡjᑊ(a,h)㪑7㡬14jᑊ(g,h,i)图 PNA分析之同步多波长检9315PNA配因子，说明所测峰的光谱与参比光谱之间的相似性程度。匹配因子为1,0009315PNA表15 Agilent1260FLDAgilent1260FLDPNA表16 A=水=50B50 Vydac-C18-PNA，内径250mmx2.1mm，带5µm的颗粒 PAH0.5 0.4压缩因子A（水 压缩因子B（乙腈 冲程A和 0min时%min14.5min22.5min 26 8 1柱温箱温度 30FLDPMT增 PMT=FLD响应时 4UV(230...260图 图 5.33307.23307.63108.636010.644511.23385第98页的图43”。图 图 色谱图-参比波长260/330nm下的激发扫图 等吸收图-激（9742”）和激发波长最大值的 5.3330220/2807.3330225/2857.73102658.536024510.744528011.3385270/330FLD 注 扩大设定范围就会延长扫描时间。默认扫描时间约为2分钟。PMT16约需要10分

图 FLD特殊设第102页的图47”。 注 低背景值有利于改善信噪比，另请参见“第127页的减少杂散光”。䗮ᐌЎ⏅㪱៾ℶⱘ2䰊图 Agilent1260FLDAgilent1260FLDAgilentChemStation(G1321A/B)FLD2THRS（阈值）PDPW（峰检测器峰宽）。此外，参数PKWD（检测器峰宽）仅影响色谱图的过滤。THRS、PDPWPKWDPDPWPKWD2第126页的峰宽设置”。在FLD的设置屏幕中，有2个字段用于输入PKWD“Peakwidth(Responsetime（（响应时间））”THRS“Threshold（阈值）”（选择“Multi-EX（EX）或“Multi-EM（EM）时可见）。缺省值为：PKWD=6(0.2min)THRS=5.000LU。所选值在运行过程中是固定的。只能使用时间表中的“Peakwidth（峰宽）”（“Multi-EX（EX）”或“Multi-EM（多个EM）时可见）更改PDPW。 注 （PKWD0.2min，PDPW0.05min）宽，则您可以在“Timetable（时间表）”PDPW大1步。THRSPDPWFLDTHRS“Timetable（时间表）中的“Peakwidth（峰宽）字段更改当峰减少为8–16个数据点时，峰检测算法的效果最好。FLD使用内部数74.08Hz13.50ms)（1）收集数据点。数据减少PDPWPDPWPDPW太大，则峰检测器假设峰是噪音。FLD Agilent1260FLDAgilent1260FLD0.4µmpH范围，如流通池和阀的材料。具体会在后续章节里面建议。AgilentHPLC仪器的经验而细心挑选的。这些材料在典型的HPLC条件下显示了极高的耐用Agilent。UHPLC（如金（通常为20–25°C，6877F）。如果出现腐蚀，通常在更高的温度下腐蚀会加快。如果有疑佳属性。因此，PEEK是适用于UHPLC和生化仪器的材料的最佳选择。pH硝酸>1010）（甲胺。DuPontVespel，安捷伦pH110（如硫酸）、冰醋酸、DMSOTHF（如基本状态下的铵盐）聚乙烯UHMW（超高分子量聚乙烯）-PE/PTFE（用于1290Infinity泵和1260Infinity泵中的正相应用）。对于大多数普通无机溶剂（包括pH范围在1到12.5之间的酸和酸碱烯有着良好的稳定性。它与许多在色谱系统中使用的有机溶剂（如甲醇、乙腈和异丙醇）相容。它与脂肪类、芳香类和卤化碳氢类、THF、苯酚及其衍生物、浓酸和浓酸碱有着有限的稳定性。对于正相应用，最大压力应限制为200bar。钽钽对于大多数的普通HPLC（除氟酸和带有自由三氧化硫的酸）（10）。不锈钢pH112.5状态。它可以被pH小于2.3的酸腐蚀。它也可以被以下溶剂腐蚀：2CHCl3+O2→2COCl2+2（乙酸、甲酸等）1如2THF类❹刚石HPLC熔融石英和石英1290Infinity（除氢氟酸和含氟化物的酸性溶剂）呈惰性。它会被强碱腐蚀，室温下不能用于pH值高于12的碱中。流通池窗口的腐蚀会对测量结果产生负面影响。对于pH值大于12的溶剂，建议使用带有蓝宝石窗口的流通HPLCpH氧化锆HPLC铂/铱HPLC(PTFE、PFA、FEP、（如PTFE（聚四氟乙烯）、PFA（四氟乙烯）和FEP（氟化乙烯丙（如卤代烃）中可能会膨胀。Agilent（G1322A）TFE/PDD（如氟利昂、全氟三丁胺或聚酰亚胺）相容。它们在六氟异丙醇(HFIP)中寿命HFIP勿在装置关闭后将HFIP留在腔内。蓝宝石、红宝石和基于Al2O3的陶瓷Al2O3惰性。对于HPLC应用，无已知的不相容性。Agilent1260FLD FLD缩放比例范围和操作条 Agilent

Agilent1260FLDAgilent1260FLD 注意 本章中介绍的某些功能（例如光谱采集、多波长检测）在G1321C 注 PMT增益测试PMTAgilentChemStationFLDAgilentOpenLABCDS和G4208A手持控制器中不可用。PMT增益测试已集成到AgilentLabAdvisorB.02.04[093]“仪>下找到PMT增益测试。PMT放大值”）。FLDA/DPMT应用是不必要的。例如高浓度样品峰被切掉时，可以减小PMT的设置。切记使用低的PMT设置会降低信噪比。PMTPMT 注意 如果更改了一个或多个参数，必须按“OK（确定）”把新的设置值写入FLD中。之后重新进入“FLD-Signals（FLD-信号）” 4（125选择最佳响230nm（115确定最佳波长”）。所以把激发波长设为230nm（多发射模（无光LC 注意 为了得到最高的重复性和线性，请将灯的设置更改为始终打开（缺省状态下只有 1 注意 当直接把荧光激发光谱和DAD光谱或文献上的吸收光谱进行比较时，您要考虑到所用的光学带宽(FLD=20nm)有很大的不同，根据评估中的化合物吸收 Agilent1260FLDAgilent1260FLD AgilentTechnologiesLCLC15因为大部分有机分子在紫外区的吸收最好，该模块的设计使之在210nm到360nm之间的光谱区具有最佳的信噪比。为了得到最高的灵敏度，样品分子的低波段，最长为250nm。激发光栅在300nm处激发效率最高。 Agilent1260FLDAgilent1260FLD尽管在文献中引用的激发波长为340nm（丙氨酸的衍生物，11648”）220nm240nm图 注意 当直接把荧光激发光谱和DAD光谱或文献上的吸收光谱进行比较时，您要考虑到所用的光学带宽(FLD=20nm)有很大的不同，根据评估中的化合物吸收光谱，PMTGAIN2（HP1046AFLD）第117页的图49”中，PMTGAIN逐渐从4增加到11（色谱峰是用AgilentTechnologies1000）PMTGAIN增加，信噪比上升到10。超过10之后，噪声随着信号的增加同比例增加，但图 寻找联苯的最佳PMT Agilent1260FLDAgilent1260FLDFLDFLDG1321FLD0100LU。G1321FLD么问题，但是在实验室中操作多个G1321FLD可能会不方便。118PMT优化PMT（使用的方法参数、EX/EM波长、溶剂、流速等）启动PMT增益测试。得到的PMT值将为您提供针对此方法和此特定仪器的最佳信噪比性FLDPMT（基于单独的PMT增益测试）。PMT图 PMT增益行220LUPMT（9）会导致信号（剪裁）和信噪比值下降。PMTPMTLU（例如通过剪裁），则您可以逐渐PMT1FLD度。请注意，采用该步骤时，您会在低信号级别(LOD)上损失灵敏度。LULUG1321FLD100LU（针对最高峰高），以获得最佳信噪比PMTLU100LU100LU/1VLU于50到80LU（等效于500mV到800mV的模拟输出）。PMTLU要超过大约100LUAgilentPRINTSENDMODULE$(LFLD,"DMUL手持控制器：ServiceMode（服务模式）FLDDMULx.xx并按“SEND（发送）”LAN/RS-232SendInstruction（发送指令）DMULAgilentLabAdvisorInstruction（指令）DMULADCG1321A/BA.06.11)ADCA.06.10（A.06.10），在某些方法条件下，“ADC中，“ADCADCADC新固件（A.06.11“ADCLU会显示在色谱图中。因此，“ADC（PMT增益或溶剂浓度）设置得较高。 注意 方法以1:1方式从一个FLD传输到另一个FLD可能会导致以上“ADC溢出”问题。有关详细信息，请参见“第118页的FLD缩放比例范围和操作条件”FLD Agilent1260FLDAgilent1260FLD表1963mJ(18.863mJ(4.7（180mJ(13.363mJ(4.7“noeconomy（非经济）123的图51”。;㛑=74图 “lamponduringrun（在运行过程中开灯）模式而不损失灵敏开关转向 Agilent1260FLDAgilent1260FLDRESPONSETIME第125页的图52”。4⾦1⾦图 LC24s4意，比较灵敏度时需使用相同的响应时间。4s（缺省值）相当于1.8sડᑨᯊ䯈2 ડᑨᯊ䯈8图 注 响应输入步进函数的输出信号的10%和90%之间的时间。表20 >（A.06.54<>>>>>>>> Agilent1260FLDAgilent1260FLD2长是激发波长的两倍时，2100280nm子造成的散射，导致有0.1%的光以与入射光成直角的方向通过窗口离开流通100090%10%280nm（1）560nm（2级）处扩散。为了除去这些杂散光，需要在280nm附近增加截止滤光片。295nm560nm（12854”）▔থѠܝ▔থѠܝⒸܝ⠛280⊶䭓Agilent1260FLD Agilent

Agilent1260FLDAgilent1260FLD（请参见故障信息一章）。（第169页的波长校正过程”）。㓓C/咘C/㑶(ᏺ㓓图 Agilent1260FLDAgilent1260FLD（如出现泄漏，内部元件不正如果在分析期间出现错误，错误将在LC系统内传送，即红色LED可能指示（第235页的特殊设置”）。然后尝试更新固件AgilentChemStation表21Lab Agilent1260FLD伦LC或实验室内网上配置的所有安捷伦GC和LC。Agilent1200InfinityLC期维护反馈(EMF)功能可帮助执行预防性维护。此外，用户还可为每个单独的LC仪器生成状态报告。安捷伦实验室监控与诊断软件提供的测试与诊断功能可Agilent1260FLD 失去CAN联 找不到FLF板ADC未校 A/D Agilent

Agilent1260FLDAgilent1260FLDLEDCANAP（APGAgilentHPLCErrorID0062

Agilent1260FLDAgilent1260FLDErrorID:4LOW CAN

服务手册》。ErrorID:

失去CANErrorID: CAN电缆已断开连接 •确保正确连接所有CAN电缆CANCAN电缆出现故障 更换CAN电缆 ErrorID: ErrorID: 请与Agilent服务代表联系 请与Agilent服务代表联系

AgilentErrorID: 请与Agilent服务代表联系ErrorID:(NTC 请与Agilent服务代表联系ErrorID:(NTC 请与Agilent服务代表联系ErrorID: 请与Agilent服务代表联系 请与Agilent服务代表联系 请与Agilent服务代表联系 Agilent1260FLDAgilent1260FLDErrorID:6622, 请与Agilent服务代表联系找不到FLFErrorID:6620,FLMFLFFLF（例如 FLF板未连接到FLM板 请与Agilent服务代表联系FLF板出现故障 请与Agilent服务代表联系FLM板出现故障 请与Agilent服务代表联系ADCErrorID:6621,FLF ADCFLF

Agilent发生A/DErrorID:6618,A.03.66A/D（样品信号）FLD1200FLD1A/D（RT0.32min）16:33:241200FLD1A/D（RT0.67min）16:33:46A.06.11，A/D第121ADC限值显示”。 PMT设置得较高 减少PMT增益 ErrorID: FLL

Agilent 请与Agilent服务代表联系ErrorID:A/B/C第152页的灯强度测试”）。如果为平顶峰，请采取以下步骤。D100 请与Agilent服务代表联系ErrorID: MultiModeOff（多模式关闭 请与Agilent服务代表联系 请与Agilent服务代表联系ErrorID:WavelengthCalibrationFailed（波长校正失败），并且仪器保持为“NotReady（未就绪）”状态。 请与Agilent服务代表联系

AgilentErrorID:（FLM）。在器保持为“NotReady（未就绪）”状态。 更换FLM板 ErrorID:6616,6702,“SHUTDOWN（关机）”。 注意 单色器马达错误可能在检测器的初始化过程或操作过程中出现。对于激发或发射 AgilentAgilent1260FLD 拉曼ASTM信噪比测 使用AgilentLab 使用AgilentLabAdvisor的过 使用AgilentLab 使用AgilentChemStation（手动 Agilent

Agilent1260FLDAgilent1260FLDAgilentLabAdvisorB.02.03。表22 AgilentInstrument

•强AgilentLab •强ASTMAgilent

LabAdvisorAgilent手持控制 •强15156䬰⌕䗮∴៪䆩䮾图 Agilent1260FLDAgilent1260FLD（2001200nm1nm）扫描强度光谱，并将结图 灯强度测试(AgilentLab 注意 此图随仪器的不同而有所改变。图形取决于灯的使用时间和流通池中的样品（用 UV250nm“LAMPONduringrun（在运行过程中开灯）“economymode（节能模式）”有助于大大提高灯的寿命。期码，四种不同波长的强度250nm、350nm、450和600nm）存储在缓冲器图58 灯强度历史记录（AgilentLabAdvisor“ModuleInfo（模块信息）”下）ASTM ASTMAgilent1260FLDAgilent1260FLDASTMG1321FLDASTM图59 拉曼ASTM信噪比测试(LabAdvisor)表23ASTMSNRSNRG1321CFLFG1321BFLFG1321AFLFG1321AFLFG1321AFLF 注 “Dark（暗值）”和“DualWL（双波长）”值只是附加规格。只有 注 （不用于标准校验）15526156表24 大约23分 LC级水，脱 0.25 >500（根据“第155页的表25” >3000（根据“第155页的表规格（双波长） >300（根据“第156页的表27”中表25（信号处表26（背景处表27（EMASTM（156SNR_Ramanmean_raman(ex350,em397)mean_background(ex350,emnoise_raman(ex350,emSNR_Darkmean_raman(ex350,em397)mean_background(ex350,emnoise_background(ex350,emASTMASTM(ᯊ䯈Ў5ࠄ20n䩳5410n䩳k䯈21422n䩳k䯈图 拉曼ASTM信噪比计使用AgilentLabHPLCLabAdvisorLabAdvisor图 拉曼ASTM信噪比测试(AgilentLab Agilent1260FLDAgilent1260FLDAgilentChemStation、LabAdvisor 注意 峰高总是一致的，但是峰面积和保留时间会根据设置的峰宽不同有所差异，请参 使用AgilentLabAdvisorAgilent1200Infinity（DAD、MWD、VWD、FLDRID）。图例来自于RID检测器。LCAgilentLabAdvisor（B.01.03SP4）并打开检测器的选项。图 配备AgilentLabAdvisor的测试色谱 注 Agilent1260FLDAgilent1260FLDASTMTestMethodE388-72-1993SpectralBandwidthandWavelengthAccuracyofFluorescenceSpectrometers（荧光光谱仪的谱线带宽和波长准确度）。把 注意 不总是需要完整的波长校正。大多数情况下，快速波长准确度验证已足够使用，请参见“第160页的表28”。 表28GLP(X(XX 注意 进行波长校正之前，应执行波长准确度验证，请参见“第163页的波长准确度测试”。如果偏差大于±3nm，则应按照“第169页的波长校正过程”中所 注意 波长校正的持续时间约为15分钟，再加上校正样品和系统的设置时间。根据 16229图 波长校正(AgilentLab表29 最长30 60 44 55s（可变 260s（可变 发射旋转扫描，完整周期（PMT1

61s（可变 9 9 9 9发射旋转扫描，高分辨率，第I部 44发射旋转扫描，高分辨率，第II部 44 50s（可变 250s（可变 注 第146页的波长校正失败”。 Agilent1260FLDAgilent1260FLD使用AgilentLabHPLCAgilentLabAdvisorFLDFLD（397nm）350nm±20nm350nm3nm16364FLD（350nm）397nm±20nm397nm3nm16364EMEM=397Ex=350Ex=350+/–3EM=397+/–3图 注意 如果图在EM=397nm和EX=350nm(±3nm)附近没有最大值，则测试失败，请参见下图。请参见“第165页的结果的解释”。 图 使用LabAdvisor进行波长准确度测如果测试失败，请在“Signals（信号）EXEM图 良好EX最大值示EX=397nmEX=350nm3nm第165页的结果的解释”。图 糟糕EX/EM最大值示例（未找到最大值使用AgilentChemStation（手动16630WLEMTESTWLEXTEST表30EM397nmEX350nm>0.2min（4s，标准>0.2min（4s，标准PMTEX350nm350nmEM397nm397nm图 图 EM/EX扫描的设载入方法“WLEXTEST”。FLD397nm20nm0.51ml/min 注 16364（左侧）载入方法“WLEMTEST”。FLD350nm20nm16364（右侧） Agilent1260FLDAgilent1260FLD 如果应用需要，请参见“第162页的表29”针式过滤头，0.45µm，100PEEK（210ml10mg（20%10mL5101.0ml图 0.5mlPEEK 注 0.2ml100.1mlFLD（17273”）AgilentLabAdvisor：“Calibrations（校正AgilentChemStation：“Diagnosis（诊断）Maintenance（维护）>FLDCalibration（FLD校正）”(G4208A)：“Maintenance（维护）FLD 注 如果波长校正过程失败，请参见“第146页的波长校正失败”。如果显示偏差，请按“Yes（是）”(LabAdvisor)以调整为新值或按图 波长校正(AgilentLab图72 校正历史记录（AgilentLabAdvisorModuleInfo（模块信图 波长校正(Agilent 注意 要查看历史记录表(ChemStation)，请启动波长校正后立即终止。此时未对校正 注意 以最小为1.5ml/min的流速用纯水清洗流通池，来清除流通池和毛细管中的糖 163波长准确度测试163波长准确度测试Agilent1260FLD Agilent

Agilent1260FLDAgilent1260FLD 注 警 有毒、易燃及有害溶剂、样品及试剂（例如，戴上护目镜、安全手套，穿上防护衣。 警 检测器光线对眼睛有害 警 电击 警 人身伤害或产品损坏 小 外部设备安全标准表31页的波长验证和校正”。 警 液体滴入模块的电子箱中可导致触电危险并损坏部件 Agilent1260FLDAgilent1260FLD 扳手，1/4inch 流通池，8µL，20bar(pH1流通池，4µL，20bar(pH1生物惰性流通池，8µL，20barpH1–12)，包括毛细管套件流通池BIO（部件号G5615-68755）FLD8µL,20 小 样品降解和仪器污染 注 注意 如果流通池在一段时间内未使用（存放），请用异丙醇冲洗流通池并通过堵头-螺钉-接头(0100-1259)关闭流通池。123 注 4把流通池插入室中，拧紧蝶形螺丝。重新把 注 （如LC-MSD），荧光检测器必须放到（20bar(2MPa)） 注 5 注 160波长验证和校正 Agilent1260FLDAgilent1260FLD（196透明池工具箱”）TakeFluorescenceScan”（进行荧光扫描）开始进行 编号说(65 警 硝酸的危险浓度 注意 流通池中的水性溶液会产生藻类。藻类会产生荧光。所以不能长时间把水性溶剂 65%)1 注 不能超过压力上限20bar(0.2MPa)。 扳手，1/4inch 图 （1.5⊘ⓣㅵ图 BCDG1369B或 G1369C或

1要更换接口板，请拧开两颗螺丝，取出接口板，滑入新的接口板，然后固定接图 LAN/RS-232 手持控制器 编号说 AgilentLAN/RS-232FW152灯强度测试160波长验证和校正Agilent1260FLD Agilent

维护的零件维护的零件Agilent1260FLDAgilent1260FLD流通池，8µL，20barpH1流通池，4µL，20barpH19.5)0.12mm（G1316-87318300mm）0.12mm（部件号G1316-68716）。生物惰性流通池，8µL，20bar(pH1–12)，包括毛细管套件流通池BIO（部件号G5615-68755）BIOPK0.18mm1.5m10PEEK（FLD8µL,20DAD/VWD/FLD1260/1290)波纹管，PP6.5mm5PTFE0.8mmx2m5CAN0.5CAN1G1369B或 安捷伦模块与通用端（模拟）连接 带外部接点和BCD输出的接口板197标准附件工具箱 维护的零件维护的零件Agilent1260FLDAgilent1260FLD FLD透明池工具箱，8µL，20bar包括： 管PTFE0.8mmx2m，再订购5m ST ST ST PEEK（2 (G1321-68755)PTFE0.8mmx2m5PEEK（2ST0.17mmx380mm（STST封垫圈和ST接头）STSTST图 Agilent1260FLD图 毛细管工具箱流通池BIOPK0.18mmx1.5m10PEEK（部件号5063-6591）G5615-68755)包括： PK0.18mmx1.5 PEEK10Agilent1260FLD BCDCAN/LAN与计算机相连的Agilent模 Agilent1200InfinityAgilent

识别电缆识别电缆Agilent1260FLDAgilent1260FLD 注意 为保证功能正常及符合安全规定或EMC规定，切勿使用不是由安捷伦科技提供 3394/6 Agilent35900AA/D 3396AI3396II/3395A第204页的遥控电缆” 3396III/3395B BCD 安捷伦模块与3396积分仪连接 CAN CAN0.5 CAN1LAN RS-232 RS-232电缆，2m RS-232电缆，2.5m仪器与计算机连接，9对9（母接头）。此电缆的1-1、2-3、3-2、4-6、5-5、6-4、7-8、8-79-9 RS-2328 识别电缆识别电缆Agilent1260FLDAgilent1260FLDBNC安捷伦模块与3394/6部件号35900- 针

模拟信号 模拟信号安捷伦模块与8120-01046- 识别电缆识别电缆Agilent1260FLDAgilentAgilent1260FLDAPG（分析仪器部）遥控接头，用于连接至安捷安捷伦模块与3396A部件号03394- 针

3396II/3395A3396AI03394-60600)一测切掉5START;notready”。3396III/3395B部件号03396- 针

Agilent35900A/D部件号5061- 针

12345678901046-识别电缆识别电缆BCD BCDAgilentAgilent1260FLDAgilent1260FLDBCD15BCDG1351-BCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDBCD+5安捷伦模块与339603396-BCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDBCD+5识别电缆识别电缆CAN/LAN Agilent1260FLDAgilent1260FLDCAN/LANCANLANCAN CAN0.5 CAN1LAN 15部件号G1103-61611

EXT EXT EXT EXT EXT EXT EXT EXT 红色/蓝 白色/绿 褐色/绿 白色/黄 识别电缆识别电缆Agilent AgilentAgilent1260FLDAgilent1260FLDAgilent RS-232电缆，2m RS-232电缆，2.5m仪器与计算机连接，9对9（母接头）。此电缆的1-1、2-3、3-2、4-6、5-5、6-4、7-8、8-79-9 RS-2328Agilent1260FLD 设置8位配置开关（不带板载 RS-232C的通信设 Agilent

硬件信息硬件信息Agilent1260FLDAgilent1260FLDAgilent1100/1200/1220/1260/1290（CAN、LANRS-（CAN、LANRS-USBB.01.03PPPPG1315A/BDADRG1315BAG1315CDADBVVV102XXX 注意 主系统的更新只能在驻留系统中进行。驻留系统的更新只能在主系统中进行。图 注意 某些模块由于主板版本或初始固件版本的原因而在降级方面受到限制。例如 （例如从G1314C到G1314B），从而可在特定的控制软（例如从G1314B到G1314C），原先的功硬件信息硬件信息 Agilent1260FLDAgilent1260FLDBCD/Agilent1200Infinity系列模块有一个可选的板插槽，可向模块添加接口板。224接口 带外部接点和BCD输出的接口板(BCD) 保险丝，用于BCD板，250mABCDAgilent1200BCD4外部接点。外部接点闭合接点是继电器接点。最大的设置是：30V(AC/DC)䆚䆚㒓偅250໪4RFI䖛RFI䖛RFI䖛໪BCD207BCD第210页的外接电缆”。BCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDBCDLANAgilent第224页的接口”。 G1369B或 G1369C或

(LAN) 注意 每个Agilent1260Infinity仪器都需要一个板。建议将LAN板添加到数据速 注 有关G1369LAN通讯接口卡的配置，请参阅其文档。Agilent1260Infinity 33LAN 接口板(LAN) Agilent G1369-60002)LANG1369C或G1369-60012)LAN(G1369A RJ-45(10Base-T)(10/100Base-TX)+1HewlettPackardJetDirectA.05.05LAN 硬件信息硬件信息 Agilent1260FLDAgilent1260FLDCANCAN接口板插槽用于外部接点、BCDLANRS-232CRS-232C100240VAC1060Hz。最大功耗因模块而异。因为电源供应系统有较大的适应力，在模块 注意 为保证功能正常及符合安全规定或EMC规定，请确保使用的是由安捷伦科技提图 检测器后视图-电路连接和标 注 随着1260Infinity模块的引入，已去掉了GPIB接口。1260Infinity DEJPCN A-Z（用于生产 0-9,A-Z，每个组合明确表示一个（同一模块可能有多个编码） 12001290Infinity DEJPCN 820能是1998或2008年的第20周 硬件信息硬件信息Agilent1260FLDAgilent1260FLDAgilent1200Infinity表34Agilent1200InfinityG1310BG1311BG1311CVLG1312BK1312BG1312CVL1376AG2226AG5611AG4220A/BCAN（G4204AG1361ACAN（G1329BG1330B/K1330BG2260A表34Agilent1200InfinityG1364BFC-G1364CFC-G1330B/K1330BG1364DFC-G1367ECAN（K1367EG1377AG2258ADLG5664AG5667AG4226AG1314BVLG1314CVLG1314E/FK1314FG4212A/BK4212B表34Agilent1200InfinityG1315CVLG1365CG1315DVLG1365DVLG1321BK1321BG1362AG4280AEXTG1170AG1316A/CK1316CG1322AK1322AG1379BG4225AK4225A表34Agilent1200Infinity

G4227AFlexCube CAN直流输出（G4240A芯片 CAN直流输出（于从属的CAN）G1330A/B1LAN（B.06.40C.06.40G4212AG4220A）或附加G1369CLAN卡的主机模块 注意 检测器(DAD/MWD/FLD/VWD/RID)是通过LAN CANLANRS-232CCANLAN（AgilentG1369B/CLAN），或具有板载LAN（G1315C/DDADG1365C/DMWD）。该接口允许通过安装LAN，也没有LAN（G1170AG4227AFlexCube）。这些均为受托管模块，需要配备固件版本B.06.40或更高版本的主机模块，或配备额外的G1369CLAN卡的主机模块。 注意 如果系统中有安捷伦检测器(DAD/MWD/FLD/VWD/RID)，则必须将LAN连接至 LANRS-232C（串行RS-232C连接器是计算机通过S-232C连接器并使用相应软件来控制泵。可通过 注 使用板载LAN无法对主板进行配置。这些主板预先配置为192008RS-232CDCE（数据通讯设备）9SUB-D表35RS-232C 䅵 ↡᥹༈图 RS-232电APGAgilentTechnologies的分析仪器结合使用。信号。信号等级定义如下：TTL（0V5.0V2.2kOhm（5.0 注意 所有通用TTL电路都在5V电源电压下工作。当电压介于0V与0.8V之间时，TTL信号定义为“低”或L，当电压介于2.0V与5.0V之间时，TTL信号定义为“高”或H（相对于接地端）硬件信息硬件信息表36 8（Agilent1260FLDAgilent1260FLD(L)（例如，校准、打开检测器(L)时(H)何(H)制(L)（例如，停止运行、(L)（例如，按下模块上的启动8（8LANLANCAN连接控制。图82 对于所有不带板载LAN的模块：DIP（最佳设置LANBootp192008/1RS-232DIP1DOWN，DIP2UPRS-232DIPS1+2UP（打开） 注 注 在Agilent1260Infinity中，已取消所有GPIB接口。首选通讯方式为LAN。硬件信息硬件信息8（ 8（Agilent1260FLDAgilent1260FLD 注 下表表示不带板载LAN模块的配置开关设置。表378（ 注 LAN设置是在LAN接口卡G1369B/C上完成的。请参见该卡附带