高考生物-生物技术与工程类题目（高考真题基础知识）

1、金黄色葡萄球菌（简称Sa）是人体重要致病细菌。Sa产生抗药性可遗传变异的来源有__基因突变、基因重组、表观遗传__（至少答出2点）。2、利用PCR技术获取目的基因，复性温度下发生的扩增过程是__两条引物分别于含有目的基因的两条模板链结合____。3、酿酒酵母在有氧和无氧的条件下都能生存，属于__异养兼性厌氧_微生物，在无氧条件下能进行__酒精___发酵，可用于制作果酒等。4、传统发酵中，新鲜水果不接种酿酒酵母也能制备果酒，原因是_新鲜水果表面附着酵母菌____。5、工业上常采用单一菌种发酵生产食品。目标菌株存在于环境中，实验室获得该单一菌种的分离方法有__稀释涂布平板法___和__平板划线法___。6、转化时，科研人员常用__氯化钙__处理大肠杆菌，使细胞处于感受态。7、目的基因启动子的基本组成单位是__脱氧核苷酸__。8、聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题：

(1)方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇酯（一种磷脂类物质）为唯一碳源制备__选择____培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有__水____、__无机盐____、___氮源___等营养物质。

(2)方法2采用__基因工程____技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因外，该技术还需要__限制酶__、__DNA连接酶__、__运载体___等“分子工具”。

(3)除了上述2种方法之外，还可以通过__诱变育种____技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物。9、在个体发育中，来源相同的细胞在形态、结构和功能上发生___稳定性差异__的过程称为细胞分化，分化是基因__选择性表达___的结果。10、灵敏的嗅觉对多数哺乳动物的生存非常重要，能识别多种气味分子的嗅觉神经元位于哺乳动物的鼻腔上皮。科学家以大鼠为材料，对气味分子的识别机制进行了研究。

(1)嗅觉神经元的树突末梢作为感受器，在气味分子的刺激下产生__兴奋___，经嗅觉神经元轴突末端与下一个神经元形成的___突触___将信息传递到嗅觉中枢，产生嗅觉。

(2)初步研究表明，气味受体基因属于一个大的基因家族。大鼠中该家族的各个基因含有一些共同序列（保守序列），也含有一些有差异的序列（非保守序列）。不同气味受体能特异识别相应气味分子的关键在于__非保守___序列所编码的蛋白区段。11、酵母菌是兼性厌氧微生物，在密闭发酵罐中会产生__酒精___和CO2。有氧培养时，酵母菌增殖速度明显快于无氧培养，原因是酵母菌进行有氧呼吸，产生大量___ATP___。12、体细胞杂交育种。进行不同种百合体细胞杂交前，先用__纤维素酶和果胶酶__去除细胞壁获得原生质体，使原生质体融合，得到杂种细胞后，继续培养，常用__生长素和细胞分裂素__（填植物激素名称）诱导愈伤组织形成和分化，获得完整的杂种植株。13、单倍体育种。常用__花药离体培养__的方法来获得单倍体植株，鉴定百合单倍体植株的方法是_利用显微镜观察根尖有丝分裂中期细胞中的染色体数目__。14、钾是植物生长发育的必需元素，主要生理功能包括参与酶活性调节、渗透调节以及促进光合产物的运输和转化等。(1)从物质和能量转化角度分析，叶绿体的光合作用即在光能驱动下，水分解产生_氧气和H+__；光能转化为电能，再转化为__ATP和NADPH__中储存的化学能，用于暗反应的过程。(2)长期缺钾导致该植物的叶绿素含量__减少__，从叶绿素的合成角度分析，原因是__缺钾会使叶绿素合成相关酶的活性降低；缺钾会影响细胞的渗透调节，进而影响细胞对Mg、N等的吸收，使叶绿素合成减少_____（答出两点即可）。15、PCR扩增不同目的基因片段需要的关键酶是__耐高温DNA聚合酶__。16、基因工程中大肠杆菌作为受体细胞的优点有__繁殖能力强、生理结构和遗传物质简单、对环境因素敏感、容易进行遗传操作等____。该过程用Ca2+处理细胞，使其处于一种__能吸收周围环境DNA分子____的生理状态。17、大肠杆菌在发酵罐内进行高密度发酵时，温度会升高，其原因是__大肠杆菌进行细胞呼吸时会释放大量热量__。发酵工业中通过菌种选育、扩大培养和发酵后，再经___提取、分离、纯化___，最终获得发酵产品。18、GtP为启动子，若使目的基因仅在水稻胚乳表达，GtP应为__水稻胚乳细胞__启动子。Nos为终止子，其作用为__终止转录___。19、利用水稻作为生物反应器生产疫苗的优点是___不受性别的限制、可大量种植、成本低、安全性高___。（答出两点即可）20、用PCR技术从大豆基因组DNA中扩增目标基因L时，所用的引物越短，引物特异性越__低__（填“高”或“低”）。21、利用PCR扩增目的基因。PCR的每次循环包括变性、复性、延伸3个阶段，其中DNA双链打开成为单链的阶段是_变性__，引物与模板DNA链碱基之间的化学键是__氢键__。22、采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品的细菌数量，发现测得的细菌数量前者大于后者，其原因是__前者微生物分散的活菌和死菌一起计数，后者存在多个活菌形成一个菌落的情况且只计数活菌__。23、菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布。灼烧的目的是__杀死涂布器上可能存在的微生物，防止涂布器上可能存在的微生物污染__，冷却的目的是__防止温度过高杀死菌种__。24、从苏云金杆菌提取DNA时，需加入蛋白酶，其作用是__水解蛋白质，使得DNA与蛋白质分离__。提取过程中加入体积分数为95%的预冷酒精，其目的是__溶解蛋白质等物质，析出不溶于酒精的DNA____。25、穿梭质粒中p35s为启动子，其作用是__RNA聚合酶识别并结合的部位___，驱动目的基因转录。26、限制酶切割的化学键是__磷酸二酯键___。27、与秸秆焚烧相比，利用高效降解纤维素的细菌处理秸秆的优点是__不污染环境、增加土壤养分__（答出2点即可）。28、根据序列信息设计引物进行PCR扩增，PCR每个循环第一步是进行热变性处理，该处理的效果类似于生物体内_解旋酶__的作用效果。PCR产物琼脂糖凝胶电泳时，DNA分子因为含_磷酸__而带负电荷，凝胶点样孔端应靠近电泳槽负极接口；当2个PCR产物分子量接近时，若延长电泳时间，凝胶中这2个条带之间的距离会_变大__。回收DNA片段，连接至克隆载体，转化大肠杆菌，测序验证。29、根据DNA和蛋白质在特定浓度乙醇溶液中的_溶解度__差异获得硅藻粗提DNA，PCR扩增得到目的基因。30、基因表达载体的基本组件包括复制原点、目的基因、标记基因、__启动子__和___终止子___等。31、从外植体转变成愈伤组织的过程属于__脱分化___；从愈伤组织到幼苗的培养过程需要的激素有生长素和__细胞分裂素___，该过程还需要光照，其作用是__诱导叶绿素的形成；满足叶绿体利用光能制造有机物的需要__。32、农杆菌侵染植物细胞时，可将外源基因递送到植物细胞中的原因是__Ti质粒中的T-DNA能将外源基因递送到植物细胞中，并与植物细胞的染色体DNA整合到一起___。33、用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为细菌提供__氮源、碳源__和维生素等。34、若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细菌，培养基的主要营养物质包括水和__无机盐、碳源___。35、与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞（含浆细胞）___不需要__（填“需要”或“不需要”）通过原代培养扩大细胞数量；添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞膜的作用是___使细胞接触处的磷脂分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合___。36、在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基（如HAT培养基），该培养基对__未融合的亲本细胞__和__融合的具有同种核的细胞__生长具有抑制作用。37、单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是___通过抗体检测呈阳性来筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞___。38、植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时，能抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖氨酸含量维持在一定浓度水平，这种调节方式属于__负反馈调节__。根据这种调节方式，在培养基中添加__过量赖氨酸类似物___，用于筛选经人工诱变的植物悬浮细胞，可得到抗赖氨酸类似物的细胞突变体，通过培养获得再生植株。39、随着转基因技术与动物细胞工程结合和发展，2011年我国首次利用转基因和体细胞核移植技术成功培育了高产赖氨酸转基因克隆奶牛。其基本流程为：

①构建乳腺专一表达载体。随着测序技术的发展，为获取富含赖氨酸的酪蛋白基因（目的基因），可通过检索__基因数据库___获取其编码序列，用化学合成法制备得到。再将获得的目的基因与含有乳腺特异性启动子的相应载体连接，构建出乳腺专一表达载体。

②表达载体转入牛胚胎成纤维细胞（BEF）。将表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体内，与BEF膜发生__融合__，表达载体最终进入细胞核，发生转化。

③核移植。将转基因的BEF作为核供体细胞，从牛卵巢获取卵母细胞，经体外培养及去核后作为__受体细胞__。将两种细胞进行电融合，电融合的作用除了促进细胞融合，同时起到了_激活__重组细胞发育的作用。

④重组细胞的体外培养及胚胎移植。重组细胞体外培养至__早期囊胚__，植入代孕母牛子宫角，直至小牛出生。

⑤检测。DNA水平检测：利用PCR技术，以非转基因牛耳组织细胞作为阴性对照，以__转基因牛胚胎成纤维细胞（BEF）___为阳性对照，检测到转基因牛耳组织细胞中存在目的基因。RNA水平检测：从非转基因牛乳汁中的脱落细胞、转基因牛乳汁中的脱落细胞和转基因牛耳组织细胞，提取总RNA，对总RNA进行___DNA酶___处理，以去除DNA污染，再经逆转录形成cDNA，并以此为_PCR模板__，利用特定引物扩增目的基因片段。40、采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要加入氮源等营养成分，氮源的主要作用是__为合成微生物的细胞结构提供原料（如核酸、蛋白质、磷脂）___（答出1点即可）。通常，可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在使用该方法时，为了达到良好的灭菌效果，需要注意的事项有___将原有冷空气彻底排除；压力100kPa，温度为121度维持15-30分钟；无菌包不宜过大，过紧；灭菌后，缓慢排气，排气时间不少于10-12分钟____（答出2点即可）。将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是___制造无氧环境___。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是___排出二氧化碳____。发酵液中的乙醇可用__酸性的重铬酸钾__溶液检测。41、花药培养能缩短育种年限，原因是__单倍体经秋水仙素处理后所得植株为纯合子，后代不会发生性状分离___。在步骤I的花药培养过程中，可产生单倍体愈伤组织，将其培养于含___秋水仙素___的培养基上，可促进产生二倍体愈伤组织。42、构建重组慢病毒质粒时，选用氨苄青霉素抗性基因作为标记基因，目的是___检测目的基因是否成功导入受体细胞___。43、___基因表达载体的构建__是实施基因工程的核心。利用农杆菌转化法时，必须将目的基因插入到质粒的__T-DNA__上，此方法的不足之处是___该方法不适用于单子叶植物____。为检测目的基因在受体细胞基因组中的整合及其转录和翻译，可采用的检测技术有__PCR技术、抗原抗体杂交技术__（写出两点即可）。44、枯草芽孢杆菌为好氧微生物，液体培养时应采用__摇床震荡___（填“静置”或“摇床震荡”）培养。培养过程中抽样检测活菌数量时，应采用__稀释涂布平板法___（填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”），其原因是___稀释涂布平板法在培养基上看到的每一个菌落都来自于一个活细胞，而显微镜直接计数法会将死细胞也计算在内____。45、将表达载体导入斑马鱼受精卵的最佳方式是__显微注射法____。46、引起群体感应的信号分子A是一种脂质小分子，通常以__自由扩散__的方式进出细胞。47、为了获得单细胞悬液，鸡胚组织剪碎后需用__胰蛋白酶或胶原蛋白酶__处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加__血清___等天然成分，以满足细胞对某些细胞因子的需求。培养箱中CO2浓度为5%，其主要作用是__维持培养液的PH__。48、为构建重组载体，需先设计引物，通过PCR特异性扩增P基因。用于扩增P基因的引物需满足的条件是__能与P基因母链的一段碱基序列互补配对__、为使PCR产物能被限制酶切割，需在引物上添加相应的限制酶识别序列，该限制酶识别序列应添加在引物的__5'端__（填“3'端”或“5'端”）。49、蛋白质工程是基因工程的延伸，基因工程中获取目的基因的常用方法有__从基因文库中获取目的基因__和利用

PCR

技术扩增。PCR

技术遵循的基本原理是__DNA双链复制___。50、以尿素为唯一氮源的培养基中加入__酚红__指示剂，根据颜色变化，可以初步鉴定分解尿素的细菌。51、研究者针对每个需要扩增的目的基因设计一对____特异性引物____，利用PCR技术，在优化反应条件后扩增得到目标基因。52、研究者构建了一种表达载体，包括了启动子、终止子及抗生素抗性基因等，其中抗生素抗性基因的作用是___作为标记基因，筛选含有基因表达载体的受体细胞____，终止子的作用是___终止转录，使转录在需要的地方停下来___。53、通常在实验室培养微生物时，需要对所需的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有___干热灭菌法、湿热灭菌法_____（答出2点即可）。54、为了实现体外受精需要采集良种公羊的精液，精液保存的方法是__冷冻保存____。在体外受精前要对精子进行获能处理，其原因是__刚排出的精子必须在雌性生殖道内发生相应生理变化后才能获得受精能力___；精子体外获能可采用化学诱导法，诱导精子获能的药物是__肝素或钙离子载体A23187__（答出1点即可）。利用该公羊的精子进行体外受精需要发育到一定时期的卵母细胞，因为卵母细胞达到___减数第二次分裂中期___时才具备与精子受精的能力。55、转化前需用CaCl2处理大肠杆菌细胞，使其处于__一种能吸收周围环境中DNA分子___的生理状态，以提高转化效率。56、在构建重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是__限制酶___，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的__磷酸二酯键___断开。57、在无菌、无毒等适宜环境中进行动物成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是__清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对自身造成伤害，同时给细胞提供足够的营养___。58、配制的培养基必须进行___高压蒸汽（湿热灭菌）___灭菌处理，目的是___杀死培养基中所有微生物（包括芽孢、孢子）___。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是___空白培养（将灭菌的空白固体培养基放置在适宜的温度下，培养一段时间，观察是否长出菌落。）____。59、将DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时，所需要的两种酶是__限制酶、DNA连接酶___。构建的重组基因表达载体中必须含有标记基因，其作用是__便于目的基因的筛选和鉴定____。60、DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是__磷酸二酯键___。61、DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征，如质粒D