肾病综合征病理诊断的质量控制要点

202X演讲人2026-01-12肾病综合征病理诊断的质量控制要点01肾病综合征病理诊断的质量控制要点02标本接收与初步处理的质量控制：源头把控是基础03切片制备与染色质量控制：精准显像是关键04病理阅片与诊断质量控制：精准判断是核心05诊断报告与审核质量控制：规范输出是保障06病理诊断质控体系建设：持续改进是目标07总结与展望：质量控制是病理诊断的生命线目录01PARTONE肾病综合征病理诊断的质量控制要点肾病综合征病理诊断的质量控制要点肾病综合征（NephroticSyndrome,NS）是以大量蛋白尿（＞3.5g/d）、低蛋白血症（血浆白蛋白＜30g/L）、水肿、高脂血症为主要临床表现的一组临床症候群，其病理类型复杂多样，包括微小病变肾病（MCD）、局灶节段性肾小球硬化（FSGS）、膜性肾病（MN）、IgA肾病（IgAN）、系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）等，不同病理类型的治疗方案及预后差异显著。因此，肾穿刺活检病理诊断是NS诊疗的“金标准”，其质量直接关系到临床决策的精准性和患者预后。作为病理诊断从业者，我深刻体会到，病理诊断的质量控制（QC）是一个系统性工程，涉及标本采集、固定、处理、切片、染色、阅片、报告等全流程，任何环节的疏漏都可能导致误诊、漏诊。本文将从病理诊断的关键环节出发，结合临床实践与行业规范，系统阐述NS病理诊断的质量控制要点，以期为同行提供参考，共同提升NS病理诊断的准确性与可靠性。02PARTONE标本接收与初步处理的质量控制：源头把控是基础标本接收与初步处理的质量控制：源头把控是基础肾穿刺活检标本是病理诊断的“原材料”，其质量直接影响后续制片与诊断的准确性。标本接收与初步处理是质量控制的第一道关口，需严格遵循标准化流程，确保标本信息完整、处理规范。标本接收与信息核对标本完整性核查接收标本时，需首先确认标本是否符合肾穿刺活检的基本要求：标本应包含皮质肾组织，长度通常≥1.5cm（或包含≥10个肾小球），光镜（LM）、免疫荧光（IF）和透射电镜（EM）三联检查所需的标本量需合理分配（通常LM占1/2-2/3，IF占1/3，EM占1/3）。若标本破碎、肾小球数量不足（＜10个）或皮质组织过少，应及时与临床沟通，必要时建议重复穿刺，避免因标本质量问题导致诊断困难。标本接收与信息核对信息登记与核对需详细登记患者基本信息（姓名、性别、年龄、住院号）、临床资料（主诉、病程、实验室检查如24h尿蛋白定量、血清白蛋白、血肌酐、血脂等）、穿刺操作信息（操作者、穿刺次数、标本颜色及长度）。登记后需双人核对，确保信息与申请单一致，避免“张冠李戴”。我曾遇过一例因信息登记错误，将患者A的病理报告误发至患者B，虽及时发现纠正，但险些造成医疗纠纷，这让我深刻意识到信息核对的重要性。标本固定规范化固定是病理标本处理的核心环节，目的是防止组织自溶、腐败，保持组织细胞形态结构完整，并最大限度保存抗原活性（尤其对IF检测至关重要）。NS病理标本的固定需遵循“及时、足量、规范”原则。标本固定规范化固定液选择与配制-光镜标本：首选10%中性缓冲福尔马林（NBF），其pH为7.2-7.4，对组织穿透力适中，能较好保存细胞形态，且适用于后续HE、Masson、PAS、PASM等多种染色。固定液需现用现配，避免因甲醛挥发导致浓度下降。-免疫荧光标本：首选专用固定液（如Michel's液或Zeus液），或用生理盐水湿润的纱布包裹后立即送检（部分实验室采用“湿固定”法，即标本置于生理盐水中，4℃保存，6小时内完成包埋）。切忌使用福尔马林固定IF标本，甲醛会封闭抗原决定簇，导致假阴性。我曾遇到一例临床高度怀疑MN的患者，因IF标本误用福尔马林固定，导致IgG、C3等关键抗原无法检测，不得不重复穿刺，增加了患者痛苦。-电镜标本：需用2.5%-3%戊二醛固定（4℃），以保存超微结构如足突、基底膜、电子致密物等。固定后需用0.1M磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗，去除残留固定液。标本固定规范化固定时间与比例控制-光镜标本：固定液体积应为标本体积的10-15倍，固定时间6-24小时。过短（＜4小时）固定不充分，组织自溶影响观察；过长（＞48小时）会导致组织过度硬化，切片困难，且抗原可能破坏。-IF标本：固定时间1-3小时（Michel's液）或立即送检（湿固定），时间过长会导致抗原降解。-EM标本：固定时间2-4小时（4℃），时间过长会导致戊二醛交联过度，影响超微结构观察。标本分送与标记三联检查（LM、IF、EM）需将标本合理分送，并确保标记清晰、无误。-光镜标本：固定6-24小时后，常规脱水（梯度乙醇）、透明（二甲苯）、浸蜡（60℃石蜡）、包埋，制备石蜡块。包埋时需注意肾皮质朝向，确保切片时能切到肾小球（肾小球位于皮质，呈圆形细胞团）。-免疫荧光标本：固定后立即送检，实验室需在1小时内完成冰冻切片（厚度3-5μm），或用OCT包埋后-80℃保存。冰冻切片需避免反复冻融，以免抗原丢失。-电镜标本：固定后送电镜室，经锇酸后固定、脱水、环氧树脂包埋，制备超薄切片（厚度70-90nm）。分送过程中需严格区分不同标本的标记（如LM-1、IF-1、EM-1），避免混淆。我曾在工作中发现，某实验室因未区分LM与IF标本标记，导致将LM石蜡块误用于IF检测，造成标本浪费，这提醒我们：标记环节的“小疏忽”可能引发“大问题”。03PARTONE切片制备与染色质量控制：精准显像是关键切片制备与染色质量控制：精准显像是关键切片是病理诊断的“载体”，高质量的切片需具备：厚度均匀（2-3μm）、无皱褶、无刀痕、染色对比度清晰、结构完整。NS病理涉及多种染色方法，需根据不同病理类型选择合适的染色方案，以凸显病变特征。石蜡切片制备质量控制切片厚度控制肾小球直径约100-200μm，切片厚度需控制在2-3μm。过厚（＞4μm）会导致细胞重叠，结构模糊；过薄（＜2μm）易破损，且染色过浅。切片机需定期校准，刀片需锋利（一次性刀片建议切50-100张后更换），避免产生“颤刀”现象（切片表面出现波浪状纹路）。石蜡切片制备质量控制展片与捞片规范切片后需用45℃温水展片（利用水的表面张力使切片平整），避免水温过高导致组织收缩。捞片时需用防脱片处理的载玻片（如多聚赖氨酸或APES处理的载玻片），防止染色过程中切片脱落。石蜡切片制备质量控制烤片与脱蜡烤片温度60℃1-2小时，使切片与载玻片牢固结合，避免后续染色时掉片。脱蜡需彻底：二甲苯Ⅰ5分钟→二甲苯Ⅱ5分钟→100%乙醇Ⅰ2分钟→100%乙醇Ⅱ2分钟→95%乙醇1分钟→蒸馏水冲洗，若脱蜡不彻底，会导致染色背景过深。染色方法选择与质控NS病理染色需兼顾“形态观察”与“病变特征凸显”，常用染色方法包括：染色方法选择与质控HE染色（苏木精-伊红染色）-质量控制要点：苏木精染细胞核（呈蓝色），伊红染细胞质和间质（呈红色）。需控制染色时间：苏木素染色5-10分钟（过短核着色浅，过长核过蓝且易沉淀），盐酸乙醇分色（数秒至数十秒，使细胞核层次清晰），伊红染色1-3分钟（过浅胞质着色不足，过深掩盖核结构）。-NS病变观察重点：肾小球数量（有无减少）、系膜细胞增生（系膜区增宽）、基底膜增厚（双轨征）、新月体形成（细胞性/纤维性）、球囊粘连、小管间质病变（间质炎细胞浸润、小管萎缩、纤维化）。例如，MCD的HE染色常无明显异常或仅轻度系膜增生，而FSGS可见局灶节段性的肾小球硬化（系膜基质增多、毛细血管塌陷）。染色方法选择与质控特殊染色-PAS染色（过碘酸雪夫反应）：显示糖原、基底膜、系膜基质等。NS中PAS染色可清晰显示基底膜是否增厚（如MN的基底膜弥漫增厚，呈“钉突”样改变）、系膜基质是否增生（如MsPGN的系膜区PAS阳性物质沉积）。需控制过碘酸氧化时间（5-10分钟），Schiff液染色15-30分钟，避免过度氧化导致染色减弱。-PASM染色（六胺银-Masson三色染色）：显示基底膜、系膜基质、纤维化等。对NS诊断至关重要，可观察到基底膜“双轨征”（如膜增生性肾小球肾炎，MPGN）、足突融合（如MCD）、电子致密物沉积（如IgA肾病的系膜区电子致密物）。染色时需注意银染时间（控制在镜下基底膜呈黑色，背景为淡灰色），避免过度银染导致背景过深。染色方法选择与质控特殊染色-Masson三色染色：显示胶原纤维（蓝色）、细胞核（黑色）、细胞质（红色）。主要用于观察肾小球硬化（蓝色胶原纤维沉积）、小管间质纤维化（间质蓝色胶原纤维增生）等。需控制酸性品红染色时间（5-10分钟），磷钼酸分化（数秒至数十秒），亮绿复染（1-2分钟）。染色方法选择与质控免疫荧光染色质量控制-切片要求：冰冻切片厚度3-5μm，-20℃保存（避免反复冻融）。-抗体选择与稀释：需根据临床suspicion选择抗体组合，NS常规检测IgG、IgA、IgM、C3、C1q、κ轻链、λ轻链等。抗体稀释需优化（通过预实验确定最佳稀释度，如IgG稀释度1:100-1:200），避免过高导致背景过深，过低导致假阴性。-荧光强度判断：采用半定量评分（0-3+）：0（无荧光）、1+（弱荧光，需仔细观察）、2+（明确荧光）、3+（强荧光）。例如，MN可见IgG和C3沿毛细血管壁（GBM）呈颗粒状沉积（3+），而MsPGN可见IgA和C3沿系膜区呈颗粒状沉积（2+-3+）。-对照设置：需设置阳性对照（已知阳性的肾组织切片）和阴性对照（以PBS代替一抗），确保染色结果可靠。染色方法选择与质控电超微结构观察质量控制-切片制备：超薄切片厚度70-90nm，用铜网承载，铀铅双染色（醋酸铀染色10-15分钟，柠檬酸铅染色5-10分钟）。-观察重点：足突（是否融合、增宽）、基底膜（是否增厚、有无电子致密物沉积）、系膜区（有无电子致密物、系膜细胞增生）、足细胞（有无变性、脱落）、内皮细胞（有无增生、损伤）。例如，MCD的典型电镜改变为足突广泛融合（＞90%肾小球），呈“扁平足”样；MN可见GBM上皮下电子致密物沉积，伴足突融合；FSGS可见足细胞从GBM剥离、脱落，伴系膜区电子致密物沉积。-图像采集：需采集肾小球毛细血管袢、系膜区、足细胞等关键区域的图像，放大倍数通常为5000-20000倍，确保能清晰显示超微结构细节。04PARTONE病理阅片与诊断质量控制：精准判断是核心病理阅片与诊断质量控制：精准判断是核心阅片是病理诊断的“灵魂”，需结合LM、IF、EM三联检查结果，综合分析，做出精准诊断。NS病理类型复杂，部分疾病（如早期FSGS、MN继发因素）存在形态重叠，需密切结合临床资料，避免主观臆断。光镜阅片质量控制肾小球数量与分布需计数至少10个肾小球（若标本量充足，建议计数20个以上），观察肾小球分布是否均匀（皮质vs髓质），有无废弃肾小球（硬化、Bowman's囊增厚）。肾小球数量不足是诊断局限性的常见原因，需在报告中注明“肾小球数量XX个，诊断仅供参考”。光镜阅片质量控制肾小球病变观察-系膜病变：系膜细胞增生（每个系膜区细胞数＞3个为增生）、系膜基质增多（PAS染色阳性物质沉积）、系膜区增宽（PASM染色可见系膜区宽度＞毛细血管腔直径）。-基底膜病变：基底膜增厚（PASM染色可见GBM宽度＞430nm，正常成人GBM厚度约320±50nm）、双轨征（MPGN的特征性改变，GBM增厚呈“车轨”样）、钉突样改变（MN的特征性改变，GBM上皮侧呈“spikes”样突起）。-球囊病变：球囊粘连（Bowman's囊与肾小球毛细血管袢粘连）、新月体形成（细胞性新月体：壁层上皮细胞增生，含炎细胞；纤维性新月体：纤维组织增生，无细胞）、球囊壁增厚。-硬化病变：节段性硬化（部分毛细血管袢闭塞，系膜基质增生）vs弥漫性硬化（大部分毛细血管袢闭塞）。光镜阅片质量控制小管间质病变观察-小管病变：小管上皮细胞变性（颗粒变性、空泡变性）、小管萎缩（小管管腔变小，基底膜增厚）、小管内蛋白管型（透明管型、颗粒管型）。-间质病变：间质炎细胞浸润（以淋巴细胞、单核细胞为主，偶见嗜酸性粒细胞）、间质纤维化（Masson染色呈蓝色胶原纤维沉积）、血管病变（血管壁增厚、玻璃样变）。典型案例：我曾遇一例青年男性，临床表现为大量蛋白尿、镜下血尿，光镜下可见系膜细胞轻度增生（系膜区细胞数2-3个/系膜区），PAS染色系膜区轻度阳性，初步考虑MsPGN。但结合免疫荧光显示IgA为主（3+）沿系膜区沉积，电镜可见系膜区电子致密物沉积，最终修正诊断为IgA肾病（Lee分级Ⅱ级）。这让我深刻认识到：光镜阅片需结合IF、EM结果，避免“一叶障目”。免疫荧光阅片质量控制沉积部位判断-毛细血管壁（GBM）：如MN（IgG、C3沿GBM颗粒状沉积）、狼疮性肾炎（LN）Ⅴ型（IgG、C3沿GBM线样沉积）。-系膜区：如IgA肾病（IgA、C3沿系膜区颗粒状沉积）、MsPGN（IgG、C3沿系膜区颗粒状沉积）。-混合沉积：如LNⅣ型（IgG、C3沿GBM和系膜区沉积）、MPGN（IgG、C3沿GBM和系膜区沉积）。免疫荧光阅片质量控制荧光强度与形态-强度：0-3+半定量，需结合背景判断（如2+在正常肾组织为阴性，在NS中可为阳性）。-形态：颗粒状（免疫复合物沉积，如IgA肾病）、线样（非免疫复合物沉积，如抗GBM病）、块状（大量免疫复合物沉积，如重症LN）。免疫荧光阅片质量控制轻链限制性若κ/λ轻链比例明显失衡（如κ:λ＞4:1或＜1:4），提示轻链限制性沉积，需考虑轻链沉积病（LCDD）或轻链相关淀粉样变（AL型）。例如，一例老年患者表现为NS，IF显示κ轻链（3+）沿GBM和系膜区沉积，λ轻链（-），电镜可见纤维丝样结构（直径7-12nm），最终诊断为AL型淀粉样变。电镜阅片质量控制超微结构细节观察-足细胞：足突融合（MCD的特征性改变，融合宽度＞0.9μm）、足细胞从GBM剥离（FSGS的早期改变）、足细胞内空泡变性（蛋白负荷过重）、足细胞增生（可见足细胞突起延伸至系膜区）。-基底膜：GBM增厚（MN、MPGN）、GBM电子致密物沉积（MN：上皮下；MPGN：内皮下、系膜区；IgA肾病：系膜区）、GBM撕裂（如Goodpasture综合征）。-系膜区：系膜细胞增生（MsPGN）、系膜区电子致密物沉积（IgA肾病、MPGN）、系膜基质增多（FSGS）。电镜阅片质量控制电子致密物定位与性质-定位：上皮下（MN）、内皮下（MPGNⅠ型、LN）、系膜区（IgA肾病、MPGNⅢ型）、上皮内（罕见，如脂蛋白肾病）。-性质：电子致密物形态多样，如“指纹样”（AL型淀粉样变），“纤维丝样”（LCDD、纤维样肾小球病），“颗粒样”（免疫复合物沉积）。典型误区：我曾初诊一例“MCD”患者，光镜无异常，IF阴性，电镜显示足突融合，但临床激素治疗无效。后复阅电镜发现，系膜区有少量电子致密物沉积（直径10-20nm），结合临床患者有上呼吸道感染病史，修正诊断为MsPGN（IgA阴性），加用免疫抑制剂后蛋白尿缓解。这提示我们：电镜阅片需“细致入微”，即使少量电子致密物也可能提示继发因素。多模态整合与临床结合NS病理诊断需遵循“LM-IF-EM”三联诊断原则，避免单一模态的局限性。同时，需密切结合临床资料，包括：-年龄：儿童NS以MCD常见（占70%-80%），成人以MN、FSGS常见。-病史：有无糖尿病、系统性红斑狼疮、乙肝、肿瘤等继发因素；有无使用NSAIDs、金制剂、青霉胺等药物史。-实验室检查：血清IgA升高（提示IgA肾病）、ANA/抗dsDNA阳性（提示LN）、乙型肝炎标志物阳性（提示乙肝病毒相关性肾炎）、血清M蛋白阳性（提示浆细胞疾病）。多模态整合与临床结合典型案例：一例老年女性，临床表现为NS，光镜可见GBM增厚，IF显示IgG、C3沿GBM线样沉积，电镜未见电子致密物，初诊MN。但结合患者血清ANA（+）、抗Sm抗体（+），且有关节痛、皮疹病史，最终修正诊断为LNⅤ型。这告诉我们：病理诊断需“跳出显微镜”，结合临床综合判断。05PARTONE诊断报告与审核质量控制：规范输出是保障诊断报告与审核质量控制：规范输出是保障诊断报告是病理诊断的“最终产品”，需规范、准确、完整，为临床提供可靠的治疗依据。报告审核是质量控制的重要环节，需建立“三级审核”制度，避免漏诊、误诊。诊断报告规范化报告内容要求-基本信息：患者姓名、性别、年龄、住院号、标本类型（肾穿刺活检）、标本接收日期、诊断报告日期。-大体描述：肾穿刺组织长度、颜色、肾小球数量（光镜、IF、EM）。-光镜描述：肾小球病变（如“肾小球20个，2个球性硬化，3个细胞性新月体，系膜细胞轻度增生，系膜区轻度增宽”）、小管间质病变（如“小管上皮细胞颗粒变性，偶见蛋白管型，间质少量淋巴细胞浸润，间质纤维化（＜10%）”）、血管病变（如“动脉壁轻度增厚，玻璃样变”）。-免疫荧光描述：沉积部位、荧光强度、形态（如“IgG（3+）、C3（2+）沿毛细血管壁颗粒状沉积，IgA（-）、IgM（-）、C1q（-），κ（1+）、λ（1+））。诊断报告规范化报告内容要求-电镜描述：超微结构改变（如“足突广泛融合（＞90%肾小球），系膜区电子致密物沉积，GBM厚度约380nm”）。-病理诊断：需明确病理类型（如“微小病变肾病（MCD）”、“局灶节段性肾小球硬化（FSGS，塌陷型）”、“膜性肾病（MN，Ⅰ期）”），如有继发因素需注明（如“膜性肾病，继发于系统性红斑狼疮”）。-临床建议：结合临床提出治疗建议（如“建议激素治疗，定期复查24h尿蛋白定量、肾功能”）。诊断报告规范化诊断术语标准化需采用世界卫生组织（WHO）或国际肾脏病学会（ISN）推荐的病理分类标准，如：-MCD：光镜无明显异常或轻度系膜增生，IF阴性，电镜足突广泛融合。-FSGS：光镜局灶（＜50%肾小球）、节段性（部分毛细血管袢）硬化，伴足细胞病变。-MN：光镜GBM增厚，IFIgG和C3沿GBM颗粒状沉积，电镜GBM上皮下电子致密物沉积。常见问题：部分报告存在“诊断模糊”（如“肾小球病变，考虑NS”）、“描述不完整”（如未注明肾小球数量）等问题，需避免。规范的诊断报告应让临床医生“看得懂、用得上”。三级审核制度一级审核（主检医师初诊）主检医师需独立阅片，结合LM、IF、EM结果，初步做出病理诊断，并撰写报告初稿。需仔细核对标本信息、染色质量、诊断依据，确保无遗漏。三级审核制度二级审核（上级医师复核）上级医师（主治医师及以上）需对报告初稿进行复核，重点检查：诊断是否准确（有无漏诊、误诊）、描述是否完整、术语是否规范、临床建议是否合理。对疑难病例，需组织科内讨论，必要时邀请临床医师会诊。三级审核制度三级审核（科主任签发）科主任需对最终诊断报告签发，确保报告符合质量控制要求。对罕见病例、疑难病例或与临床诊断不符的病例，需组织全科室讨论，必要时请外院专家会诊，确保诊断的准确性。典型案例：我曾遇一例“FSGS”患者，主检医师诊断为“FSGS，塌陷型”，上级医师复核时发现，患者临床表现为快速进展性肾衰竭，光镜可见大量肾小球体积增大，足细胞增生，IF阴性，电镜足突融合伴足细胞从GBM剥离，结合临床，修正为“Collapsing型FSGS（继发于HIV感染）”，建议患者检测HIV抗体，结果阳性。这提示我们：三级审核制度能有效发现诊断中的“偏差”，避免误诊。疑难病例讨论与随访疑难病例讨论对诊断困难、临床表现复杂或治疗无效的病例，需定期组织疑难病例讨论会（如每周1次），邀请病理医师、临床医师（肾内科、风湿免疫科）共同参与，结合临床资料、病理结果、治疗反应，综合分析，明确诊断。例如，一例表现为NS的中年女性，光镜可见系膜细胞增生，IF显示IgA（2+）、C3（1+）沿系膜区沉积，电镜可见系膜区电子致密物，临床怀疑IgA肾病，但患者有血清补体C3降低、ANA（+），经多学科讨论，诊断为“LN合并IgA肾病”。疑难病例讨论与随访诊断结果随访建立病理诊断随访制度，定期追踪患者的临床转归（如蛋白尿变化、肾功能进展、治疗反应），验证病理诊断的准确性。对诊断与临床转归不符的病例，需分析原因（如标本质量问题、阅片疏漏），及时总结经验，持续改进质量控制流程。例如，一例初诊为“MCD”的患者，激素治疗无效，6个月后重复穿刺显示“MN”，分析原因为首次穿刺标本肾小球数量不足（仅8个），导致漏诊MN。06PARTONE病理诊断质控体系建设：持续改进是目标病理诊断质控体系建设：持续改进是目标NS病理诊断的质量控制并非“一劳永逸”，需建立完善的质控体系，通过标准化流程、人员培训、室内质控、室间质评等手段，持续改进诊断质量。标准化操作流程（SOP）制定与执行SOP内容需制定肾穿刺活检标本接收、固定、处理、制片、染色、阅片、报告审核等全流程的SOP，明确每个环节的操作步骤、质控标准、责任人。例如，《肾穿刺活检标本固定SOP》需规定固定液种类、浓度、固定时间、标本体积与固定液比例；《免疫荧光染色SOP》需规定抗体稀释度、染色时间、对照设置等。标准化操作流程（SOP）制定与执行SOP培训与考核需定期组织SOP培训（如每月1次），确保所有人员熟悉并掌握SOP内容。培训后需进行考核（如理论考试、操作考核），考核合格后方可上岗。对新增人员（如进修医师、新入职技师），需进行“一对一”带教，直至其独立完成操作。人员培训与能力提升病理医师培训No.3-基础培训：系统学习肾脏病理学理论知识（如NS的病理分类、病变特征），掌握LM、IF、EM阅片技巧。-进阶培训：参加国家级/省级肾脏病理培训班（如中华医学会肾脏病学分会举办的“肾脏病理诊断培训班”），学习疑难病例诊断、最新病理分类标准（如2021年IgA肾病新分类）。-经验积累：通过复诊外院切片、参与多中心研究（如“中国肾脏病理数据库”项目），积累经验，提升诊断水平。No.2No.1人员培训与能力提升技术人员培训-制片技术：学习石蜡切片、冰冻切片、超薄切片的制备技术，掌握染色方法（HE、PAS、PASM、IF）的优化步骤。-设备操作：熟练操作切片机、染色机、电镜等设备，定期进行设备维护与校准（如切片机刀片更换、电镜真空泵检查）。室内质量控制（IQC）常规质控项目1-切片质量：每日随机抽取5%的切片，检查厚度（2-3μm）、染色（对比度清晰、无背景过深）、结构完整性（肾小球结构清晰，无皱褶、刀痕）。2-染色质量：每日染色HE、PAS、PASM切片各1张，观察染色效果（如HE染色核浆对比清晰，PAS染色基底膜、系膜区着色明显）。3-免疫荧光质控：每周检测1次阳性对照（已知阳性的肾组织），确保抗体活性正常；每月检测1次阴性对照（PBS代替一抗），确保无非特异性染色。4-电镜质控：每月检查1次超薄切片质量（如切片厚度、铀铅染色效果），确保超微结构清晰可见。室内质量控制（IQC）失控处理与记录若质控项目出现异常（如切片过厚、染色过浅），需及时查找原因（如切片机未校准、染色液浓度下降），并采取纠正措施（如校准切片机、配制新鲜染色液）。所有质控结果需记录在案，形成“质控档案”，定期分析，持续改进。室间质量评价（EQA）参与国家/省级EQA项目需定期参加国家病理质控中心（NPQC）或省级病理质控