肿瘤微环境重塑：CAR-T细胞增效策略

肿瘤微环境重塑：CAR-T细胞增效策略演讲人01肿瘤微环境的特征及其对CAR-T细胞的抑制机制02CAR-T细胞增效策略——基于肿瘤微环境重塑的多维度干预03挑战与未来展望04总结目录肿瘤微环境重塑：CAR-T细胞增效策略作为一名长期从事肿瘤免疫治疗研究的临床转化科学家，我亲身经历了CAR-T细胞疗法从血液肿瘤到实体瘤的艰难跨越。尽管CD19CAR-T在B细胞白血病中取得了突破性疗效，但实体瘤微环境的复杂抑制网络，始终是限制其疗效的“拦路虎”。肿瘤微环境（TumorMicroenvironment,TME）并非被动“舞台”，而是主动参与肿瘤进展、免疫逃逸和治疗抵抗的“动态生态系统”。如何通过重塑TME打破CAR-T细胞的“枷锁”，成为当前免疫治疗领域亟待解决的核心命题。本文将从TME的抑制特征出发，系统梳理基于TME重塑的CAR-T细胞增效策略，并探讨其临床转化挑战与未来方向。01肿瘤微环境的特征及其对CAR-T细胞的抑制机制肿瘤微环境的特征及其对CAR-T细胞的抑制机制肿瘤微环境是肿瘤细胞与免疫细胞、基质细胞、细胞因子、代谢产物等相互作用形成的复杂网络。其免疫抑制特征是导致CAR-T细胞功能耗竭、迁移受阻、杀伤能力下降的关键原因。深入解析TME的抑制性组分与机制，是设计增效策略的前提。免疫抑制性细胞群的“围剿”TME中存在多种免疫抑制性细胞，它们通过直接接触、分泌抑制性因子等方式，抑制CAR-T细胞的活化与功能。免疫抑制性细胞群的“围剿”髓系来源抑制性细胞（MDSCs）MDSCs是TME中主要的免疫抑制细胞群，根据形态和分化阶段分为单核型（M-MDSCs）和粒细胞型（G-MDSCs）。在肿瘤患者外周血和肿瘤组织中，MDSCs比例显著升高，其通过以下机制抑制CAR-T细胞：-精氨酸酶1（ARG1）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）介导的代谢抑制：ARG1分解精氨酸，精氨酸是T细胞活化必需的氨基酸，缺乏精氨酸会导致T细胞受体（TCR）信号受阻、细胞周期停滞；iNOS催化L-精氨酸生成一氧化氮（NO），NO通过抑制线粒体呼吸链和DNA合成，诱导CAR-T细胞凋亡。-reactiveoxygenspecies（ROS）和过氧化亚硝酸盐（ONOO⁻）的氧化损伤：MDSCs高表达NADPH氧化酶，产生大量ROS，导致CAR-T细胞内关键信号分子（如ZAP70、PLCγ1）的巯基基团氧化失活，破坏T细胞活化信号通路；ONOO⁻则通过硝化酪氨酸残基，抑制CAR-T细胞的细胞毒功能。免疫抑制性细胞群的“围剿”髓系来源抑制性细胞（MDSCs）-免疫调节细胞因子的分泌：MDSCs分泌IL-10、TGF-β等抑制性细胞因子，抑制CAR-T细胞的IFN-γ分泌和增殖能力。免疫抑制性细胞群的“围剿”肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）TAMs是TME中丰度最高的免疫细胞之一，根据极化状态分为M1型（抗肿瘤）和M2型（促肿瘤）。在TME中，巨噬细胞主要向M2型极化，通过以下机制抑制CAR-T细胞：-PD-L1/PD-1通路介导的耗竭：M2型TAMs高表达PD-L1，与CAR-T细胞表面的PD-1结合，传递抑制性信号，导致CAR-T细胞耗竭（表现为CD62L、CD27等记忆相关分子丢失，IFN-γ、TNF-α等细胞因子分泌减少）。-IL-10和TGF-β的免疫抑制：M2型TAMs分泌IL-10，抑制CAR-T细胞的IL-2受体表达和增殖；TGF-β则诱导CAR-T细胞分化为调节性T细胞（Tregs），进一步放大免疫抑制。-吞噬功能抑制：M2型TAMs通过表达“别吃我”信号分子（如CD47），结合CAR-T细胞表面的SIRPα，抑制其对肿瘤细胞的吞噬作用。免疫抑制性细胞群的“围剿”调节性T细胞（Tregs）Tregs是CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺T细胞亚群，通过以下机制维持TME的免疫抑制状态：-细胞接触依赖的抑制：Tregs通过细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4（CTLA-4）与抗原提呈细胞（APCs）的B7分子结合，竞争性抑制CAR-T细胞的共刺激信号；同时，Tregs分泌颗粒酶和穿孔蛋白，直接杀伤CAR-T细胞。-抑制性细胞因子的分泌：Tregs高分泌TGF-β和IL-10，抑制CAR-T细胞的活化、增殖和细胞毒功能。-代谢竞争：Tregs高表达CD25（IL-2受体α链），高亲和力结合IL-2，剥夺CAR-T细胞的IL-2供应，导致其增殖受阻。免疫抑制性分子的“枷锁”TME中存在多种可溶性免疫抑制分子，它们通过直接或间接作用，抑制CAR-T细胞的抗肿瘤活性。免疫抑制性分子的“枷锁”转化生长因子-β（TGF-β）TGF-β是TME中最强效的免疫抑制因子之一，由肿瘤细胞、TAMs、CAFs等分泌，通过以下机制抑制CAR-T细胞：-抑制CAR-T细胞的增殖与活化：TGF-β通过Smad信号通路，下调CAR-T细胞中IL-2、IFN-γ等促炎细胞因子的表达，抑制细胞周期蛋白（如CyclinD2、CDK4）的表达，阻滞CAR-T细胞于G1期。-诱导CAR-T细胞耗竭与分化：TGF-β诱导CAR-T细胞表达PD-1、TIM-3、LAG-3等抑制性受体，促进其向耗竭状态分化；同时，TGF-β抑制CAR-T细胞的干细胞记忆（Tscm）表型形成，影响其长期抗肿瘤能力。-促进上皮间质转化（EMT）：TGF-β诱导肿瘤细胞发生EMT，上调间质标志物（如Vimentin、N-cadherin），下调上皮标志物（如E-cadherin），增强肿瘤细胞的迁移和侵袭能力，同时增加肿瘤细胞对CAR-T细胞的抵抗。免疫抑制性分子的“枷锁”前列腺素E2（PGE2）PGE2由肿瘤细胞、TAMs、CAFs等通过环氧合酶-2（COX-2）催化花生四烯酸生成，通过以下机制抑制CAR-T细胞：-抑制CAR-T细胞的细胞毒功能：PGE2通过EP2/EP4受体，激活腺苷酸环化酶（AC），增加细胞内cAMP水平，抑制CAR-T细胞的颗粒酶B和穿孔素的表达，降低其对肿瘤细胞的杀伤能力。-促进MDSCs和Tregs的扩增：PGE2诱导骨髓前体细胞分化为MDSCs，促进Tregs的扩增和活化，进一步放大免疫抑制。123免疫抑制性分子的“枷锁”腺苷（Adenosine）腺苷由TME中的CD39（外切酶，分解ATP为AMP）和CD73（5'-核苷酸酶，分解AMP为腺苷）催化生成，通过以下机制抑制CAR-T细胞：01-抑制CAR-T细胞的活化与增殖：腺苷通过A2A受体（A2AR）增加细胞内cAMP水平，抑制PKA信号通路，降低CAR-T细胞的IL-2受体表达和增殖能力。02-诱导CAR-T细胞凋亡：腺苷通过A2AR激活caspase-3通路，诱导CAR-T细胞凋亡。03代谢紊乱的“饥饿战”TME的代谢异常是导致CAR-T细胞功能衰竭的重要原因。肿瘤细胞的高代谢需求与免疫细胞对代谢底物的竞争，形成“代谢沙漠”，抑制CAR-T细胞的生存与功能。代谢紊乱的“饥饿战”缺氧（Hypoxia）实体瘤血管结构异常、功能紊乱，导致TME严重缺氧（氧分压<1%）。缺氧通过以下机制抑制CAR-T细胞：-HIF-1α信号通路的激活：缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）是缺氧反应的关键转录因子，其在CAR-T细胞中高表达时，通过下调糖酵解关键酶（如HK2、PKM2）的表达，抑制糖酵解过程，减少ATP生成；同时，HIF-1α诱导CAR-T细胞表达PD-L1、LAG-3等抑制性受体，促进其耗竭。-肿瘤细胞的代谢重编程：缺氧诱导肿瘤细胞通过Warburg效应（有氧糖酵解）产生大量乳酸，乳酸通过MCT1转运体进入CAR-T细胞，抑制组蛋白去乙酰化酶（HDAC）活性，导致组蛋白乙酰化异常，抑制CAR-T细胞的基因转录和功能。代谢紊乱的“饥饿战”营养物质耗竭-葡萄糖缺乏：肿瘤细胞高表达葡萄糖转运体（GLUT1），竞争性摄取葡萄糖，导致TME中葡萄糖浓度显著降低。葡萄糖是CAR-T细胞糖酵解和氧化磷酸化（OXPHOS）的主要底物，缺乏葡萄糖会导致CAR-T细胞ATP生成不足，增殖和杀伤能力下降。-必需氨基酸缺乏：肿瘤细胞和MDSCs高表达精氨酸酶1（ARG1），分解精氨酸；高表达吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO），分解色氨酸。精氨酸是T细胞活化必需的氨基酸，缺乏精氨酸会导致CAR-T细胞TCR信号受阻；色氨酸缺乏通过激活GCN2激酶，抑制CAR-T细胞的蛋白质翻译和增殖。-脂质代谢紊乱：TME中高浓度的游离脂肪酸（FFAs）和胆固醇，通过激活PPARγ和LXR信号通路，诱导CAR-T细胞向脂质储存方向分化（形成脂滴积累的“脂质诱导的耗竭”表型），抑制其氧化磷酸化和细胞毒功能。010302基质屏障的“物理阻隔”肿瘤基质细胞（如CAFs）和细胞外基质（ECM）形成的物理屏障，阻碍CAR-T细胞向肿瘤核心区域的浸润，是实体瘤CAR-T疗效不佳的重要原因。基质屏障的“物理阻隔”癌症相关成纤维细胞（CAFs）CAFs是TME中最主要的基质细胞，通过以下机制抑制CAR-T细胞：-分泌ECM蛋白：CAFs高表达α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA），分泌大量的I型胶原、III型胶原、纤维连接蛋白等ECM蛋白，形成致密的基质网络，物理阻隔CAR-T细胞与肿瘤细胞的接触。-分泌生长因子和细胞因子：CAFs分泌肝细胞生长因子（HGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、TGF-β等，通过旁分泌信号抑制CAR-T细胞的浸润和功能。例如，HGF结合CAR-T细胞表面的c-Met受体，抑制其迁移能力；TGF-β诱导CAR-T细胞表达Snail、Slug等转录因子，促进其向间质表型分化（增强迁移能力但降低杀伤能力）。基质屏障的“物理阻隔”细胞外基质（ECM）的异常沉积ECM不仅形成物理屏障，还通过以下机制抑制CAR-T细胞：-整合素信号通路异常：CAR-T细胞通过表面整合素（如LFA-1、VLA-4）结合ECM中的配体（如ICAM-1、纤连蛋白），活化FAK/Src信号通路，促进其迁移和存活。然而，在TME中，异常沉积的ECM（如交联的胶原蛋白）导致整合素信号失调，反而抑制CAR-T细胞的浸润。-ECM降解酶的抑制：CAFs高表达金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs），抑制基质金属蛋白酶（MMPs）的活性。MMPs是降解ECM的关键酶，其活性降低导致ECM过度沉积，进一步阻碍CAR-T细胞的浸润。02CAR-T细胞增效策略——基于肿瘤微环境重塑的多维度干预CAR-T细胞增效策略——基于肿瘤微环境重塑的多维度干预针对TME的抑制特征，我们需要从“清除抑制性细胞、阻断抑制性信号、纠正代谢紊乱、破解基质屏障”四个维度，设计多靶点、联合的TME重塑策略，打破CAR-T细胞的“枷锁”。免疫抑制性细胞群的清除与重编程清除TME中的免疫抑制性细胞，或将其重编程为抗表型，是增强CAR-T细胞浸润和功能的关键策略。免疫抑制性细胞群的清除与重编程MDSCs的靶向清除与抑制-CSF-1R抑制剂：集落刺激因子-1受体（CSF-1R）是MDSCs存活和扩增的关键信号分子。临床前研究表明，CSF-1R抑制剂（如PLX3397、BLZ945）可显著减少肿瘤组织中MDSCs的浸润，恢复CAR-T细胞的增殖和杀伤功能。例如，在一项黑色素瘤小鼠模型中，联合CSF-1R抑制剂和GD2CAR-T，可使肿瘤完全消退率从20%提高到80%。-CXCR2抑制剂：CXCR2是MDSCs向肿瘤组织迁移的关键趋化因子受体。CXCR2抑制剂（如SX-682）可阻断MDSCs的招募，联合CAR-T治疗可显著改善胰腺癌模型的生存期。-ARG1和iNOS抑制剂：针对MDSCs的代谢抑制机制，开发ARG1抑制剂（如CB-1158）和iNOS抑制剂（如1400W），可恢复精氨酸和NO的平衡，逆转CAR-T细胞的抑制状态。免疫抑制性细胞群的清除与重编程TAMs的极化重编程-CSF-1R抑制剂联合CD47抗体：CSF-1R抑制剂可减少M2型TAMs的浸润，CD47抗体（如Magrolimab）可阻断“别吃我”信号，促进巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬。联合CAR-T治疗可增强巨噬细胞的抗原提呈功能，激活CAR-T细胞的记忆形成。-TLR激动剂：Toll样受体（TLR）激动剂（如TLR4激动剂LPS、TLR9激动剂CpG）可诱导TAMs向M1型极化，增加IL-12、TNF-α等促炎细胞因子的分泌，增强CAR-T细胞的抗肿瘤活性。例如，TLR9激动剂与HER2CAR-T联合治疗，可显著改善胃癌小鼠模型的生存期。-PI3Kγ抑制剂：磷脂酰肌醇3-激酶γ（PI3Kγ）是TAMs极化为M2型的关键信号分子。PI3Kγ抑制剂（如IPI-549）可抑制M2型TAMs的极化，联合CAR-T治疗可增加肿瘤组织中CD8⁺T细胞的浸润。010302免疫抑制性细胞群的清除与重编程Tregs的depletion与功能抑制-CCR4抗体：CCR4是Tregs向肿瘤组织迁移的关键趋化因子受体。CCR4抗体（如Mogamulizumab）可选择性清除Tregs，联合CAR-T治疗可显著增强其抗肿瘤效果。在一项临床试验中，CCR4抗体联合CD19CAR-T治疗复发/难治性B细胞淋巴瘤，客观缓解率（ORR）达到60%，显著高于单药CAR-T的30%。-CTLA-4抗体：CTLA-4是Tregs抑制T细胞活化的关键分子。CTLA-4抗体（如Ipilimumab）可阻断CTLA-4与B7分子的结合，抑制Tregs的抑制功能，增强CAR-T细胞的增殖和杀伤能力。-GITR抗体：糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白（GITR）是Tregs的激活受体。GITR抗体（如TRX518）可抑制Tregs的抑制功能，同时激活CD8⁺T细胞的抗肿瘤活性，联合CAR-T治疗可显著改善实体瘤模型的生存期。免疫抑制性分子的阻断与中和阻断TME中的免疫抑制性分子，解除对CAR-T细胞的“枷锁”，是增强其功能的重要手段。免疫抑制性分子的阻断与中和TGF-β信号通路阻断-TGF-β中和抗体：TGF-β中和抗体（如Fresolimumab）可结合TGF-β，阻断其与受体的结合，恢复CAR-T细胞的增殖和杀伤功能。临床前研究表明，TGF-β中和抗体联合GPC3CAR-T治疗肝癌，可显著抑制肿瘤生长，延长生存期。-TGF-β受体I（TβRI）激酶抑制剂：TβRI激酶抑制剂（如Galunisertib）可阻断TGF-β的下游信号通路，抑制CAR-T细胞的耗竭和EMT。在一项胰腺癌小鼠模型中，Galunisertib联合CAR-T治疗，可显著增加肿瘤组织中CD8⁺T细胞的浸润，抑制肿瘤进展。免疫抑制性分子的阻断与中和TGF-β信号通路阻断-CAR-T细胞改造：通过CRISPR/Cas9基因编辑技术，敲除CAR-T细胞中的TGF-β受体II（TβRII），使其对TGF-β不敏感。例如，敲除TβRII的间皮素（Mesothelin）CAR-T在胰腺癌模型中，显示出更强的增殖和杀伤能力，肿瘤完全消退率达到70%，显著高于野生型CAR-T的30%。免疫抑制性分子的阻断与中和PD-1/PD-L1通路阻断-CAR-T细胞共表达PD-1dominantnegative受体（PD-1DNR）：PD-1DNR是PD-1的突变体，可结合PD-L1但不传递抑制性信号，从而阻断PD-1/PD-L1通路对CAR-T细胞的抑制。临床前研究表明，PD-1DNRCAR-T在实体瘤模型中，显示出更强的持久性和杀伤能力。-局部递送可溶性PD-L1抗体：通过纳米颗粒或肿瘤局部注射，将可溶性PD-L1抗体递送至TME，避免全身给药的副作用。例如，负载抗PD-L1抗体的脂质纳米颗粒（LNPs）联合CAR-T治疗，可显著提高肿瘤组织中抗体浓度，增强CAR-T细胞的抗肿瘤活性。免疫抑制性分子的阻断与中和PD-1/PD-L1通路阻断-CAR-T细胞高表达PD-L1抗体：通过基因工程改造，使CAR-T细胞高表达抗PD-L1单链抗体（scFv），在TME中局部中和PD-L1，避免全身免疫激活。例如，抗PD-L1scFv修饰的HER2CAR-T在胃癌模型中，显示出更强的浸润和杀伤能力，肿瘤完全消退率达到60%。免疫抑制性分子的阻断与中和腺苷通路阻断-CD39抑制剂：CD39是分解ATP为AMP的关键酶，抑制CD39可减少腺苷的生成。CD39抑制剂（如ABI-009）联合CAR-T治疗，可显著改善黑色素瘤模型的生存期。01-CD73抑制剂：CD73是分解AMP为腺苷的关键酶，抑制CD73可减少腺苷的生成。CD73抑制剂（如Etrumadenant）联合CAR-T治疗，可显著增强CAR-T细胞的增殖和杀伤功能。02-A2AR拮抗剂：A2AR是腺苷的受体，拮抗A2AR可阻断腺苷的抑制作用。A2AR拮抗剂（如Caffeine、Stradomycin）联合CAR-T治疗，可显著改善实体瘤模型的生存期。03代谢微环境的重编程纠正TME的代谢紊乱，为CAR-T细胞提供充足的能量底物，是增强其功能的关键策略。代谢微环境的重编程改善缺氧状态-抗血管生成药物：血管内皮生长因子（VEGF）是肿瘤血管生成的主要调控因子，抗VEGF药物（如Bevacizumab）可normalize肿瘤血管结构，改善TME的氧合状态。临床前研究表明，Bevacizumab联合CAR-T治疗，可显著增加肿瘤组织中CAR-T细胞的浸润，抑制肿瘤生长。-高压氧治疗（HBOT）：高压氧可提高血液中的氧分压，改善TME的缺氧状态。临床前研究表明，HBOT联合CAR-T治疗，可显著增强CAR-T细胞的增殖和杀伤功能，延长实体瘤模型的生存期。-HIF-1α抑制剂：HIF-1α是缺氧反应的关键转录因子，抑制HIF-1α可逆转缺氧对CAR-T细胞的抑制。HIF-1α抑制剂（如PX-478）联合CAR-T治疗，可显著改善胰腺癌模型的生存期。代谢微环境的重编程补充代谢底物-精氨酸补充：针对精氨酸缺乏，通过局部注射或纳米颗粒递送L-精氨酸，可恢复CAR-T细胞的TCR信号和增殖能力。例如，精氨酸修饰的纳米颗粒联合CAR-T治疗，可显著提高肿瘤组织中精氨酸浓度，增强CAR-T细胞的杀伤功能。-色氨酸补充：针对色氨酸缺乏，通过局部注射L-色氨酸，可抑制GCN2激酶的激活，恢复CAR-T细胞的蛋白质翻译和增殖能力。-脂质代谢重编程：通过基因工程改造，使CAR-T细胞高表达脂质氧化关键酶（如CPT1a），增强其对脂质的利用能力，提高在低营养环境中的生存能力。例如，CPT1a过表达的CAR-T在胰腺癌模型中，显示出更强的增殖和杀伤能力，肿瘤完全消退率达到50%，显著高于野生型CAR-T的20%。代谢微环境的重编程增强糖酵解能力-CAR-T细胞高表达糖酵解关键酶：通过基因工程改造，使CAR-T细胞高表达己糖激酶2（HK2）、磷酸果糖激酶1（PFK1）等糖酵解关键酶，增强其糖酵解能力，提高ATP生成效率。例如，HK2过表达的CAR-T在实体瘤模型中，显示出更强的增殖和杀伤能力。-PI3K/Akt/mTOR通路激活：PI3K/Akt/mTOR通路是糖酵解的关键调控通路，通过CAR-T细胞高表达组成性激活的Akt（myr-Akt），可增强其糖酵解能力，提高在低葡萄糖环境中的生存能力。基质屏障的破解与ECM降解破解TME的物理屏障，促进CAR-T细胞向肿瘤核心区域浸润，是提高实体瘤CAR-T疗效的关键策略。基质屏障的破解与ECM降解CAFs的靶向抑制-TGF-β抑制剂：TGF-β是CAFs活化的关键因子，TGF-β抑制剂（如Galunisertib）可抑制CAFs的活化，减少ECM蛋白的分泌。临床前研究表明，Galunisertib联合CAR-T治疗，可显著减少胰腺癌中ECM的沉积，增加CAR-T细胞的浸润。-FGFR抑制剂：成纤维细胞生长因子受体（FGFR）是CAFs存活的关键信号分子，FGFR抑制剂（如Erdafitinib）可抑制CAFs的活化，减少ECM蛋白的分泌。-α-SMA靶向CAR-T细胞：通过基因工程改造，使CAR-T细胞靶向CAFs的表面标志物（如α-SMA、FAP），可选择性清除CAFs，减少ECM的沉积。例如，FAPCAR-T联合PD-1CAR-T治疗，可显著改善实体瘤模型的生存期。基质屏障的破解与ECM降解ECM的降解与重塑-透明质酸酶（Hyaluronidase）：透明质酸是ECM的主要成分之一，透明质酸酶（如PEGPH20）可降解透明质酸，降低ECM的黏稠度，促进CAR-T细胞的浸润。临床前研究表明，PEGPH20联合CAR-T治疗，可显著增加胰腺癌中CAR-T细胞的浸润，抑制肿瘤生长。-基质金属蛋白酶（MMPs）：MMPs是降解ECM的关键酶，通过CAR-T细胞高表达MMPs（如MMP2、MMP9），可促进ECM的降解，增强其浸润能力。例如，MMP9过表达的CAR-T在胶质母细胞瘤模型中，显示出更强的浸润和杀伤能力，肿瘤完全消退率达到40%，显著高于野生型CAR-T的10%。基质屏障的破解与ECM降解ECM的降解与重塑-胶原酶（Collagenase）：胶原是ECM的主要成分之一，胶原酶（如CollagenaseIV）可降解胶原，降低ECM的密度，促进CAR-T细胞的浸润。例如，胶原酶修饰的纳米颗粒联合CAR-T治疗，可显著增加肝癌中CAR-T细胞的浸润，抑制肿瘤生长。03挑战与未来展望挑战与未来展望尽管基于TME重塑的CAR-T细胞增效策略在临床前研究中展现出巨大潜力，但将其转化为临床应用仍面临多重挑战。TME的异质性与动态性TME的异质性和动态性是制约CAR-T疗效的重要因素。不同肿瘤、不同患者甚至同一肿瘤的不同区域，TME的组分和功能特征均存在显著差异。例如，胰腺癌的TME以致密的基质屏障和免疫抑制性细胞浸润为特征，而肝癌的TME则以缺氧和代谢紊乱为主。此外，肿瘤在治疗过程中会动态调整TME，例如CAR-T细胞的浸润可诱导肿瘤细胞分泌更多的免疫抑制性分子（如PD-L1、TGF-β），形成“治疗抵抗”。因此，需要开发个体化的TME重塑策略，通过单细胞测序、空间转录组等技术，解析患者TME的特征，指导治疗选择。靶向治疗的脱毒与安全性TME重塑策略的靶向性是提高疗效、降低副作用的关键。例如，CAFs是TME的重要组成部分，但部分CAFs具有正常的生理功能（如组织修复），过度清除可能导致正常组织损伤。因此，需要开发肿瘤特异性靶点，如CAFs的肿瘤特异性标志物（如FAP、α-SMA的高表达亚群），避免脱毒效应。此外，联合治疗的毒性管理也是重要挑战，例如CSF-1R抑制剂联合CAR-T治疗可能导致巨噬细胞减少，增加感染风险，需要优化剂量和给药方案。递送效率与局部浓度TME重塑药物（如抑制剂、抗体）的递送效率是影响疗效的关键因素。全身给药可导致药物在血液中被快速清除，肿瘤局部浓度低，且易引起全身副作用。因此，需要开发局部递送系统，如肿瘤内注射、植入型缓释装置、纳米颗粒等，提高药物在TME中的局部浓度，减少全身暴露。例如，负载CSF-1R抑制剂的脂质纳米颗粒联合CAR-T治疗，可显著提高肿瘤中抑制剂的浓度，增强疗效，同时降低