2026届新高考生物三轮冲刺复习动物细胞工程

2026届新高考生物三轮冲刺复习动物细胞工程考点一动物细胞培养考点二动物细胞融合技术与单克隆抗体考点三

动物体细胞核移植技术和克隆动物动物细胞培养动物细胞工程概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这

些细胞生长和增殖的技术培养条件动物体细胞核移植技术概念：将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚

胎，进而发育成动物个体的技术动物细胞融合概念：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技诱导融合的常用方法①物理法：电融合法等。②化

学法：PEG融合法等。③生物法：灭活病毒意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能单克隆抗体：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合经两次筛选后得杂交瘤细胞，将杂交瘤细胞在培养基中培

养，从培养基中分离抗体。优点：特异性强、灵敏度高、可以大量制备培养基：液体培养基，除加碳源、氮源、水和无机盐外，还要加动物血清血浆无菌、无毒的环境；动物细胞培养所需气体主要有02和CO2适宜的温度：哺乳动物多以(36.5±0.5)℃为宜；适宜的pH:多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。原理：动物细胞核的全能性思维导图

考点一动物细胞培养1.概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。动物体组织单个细胞细胞生长和增殖取出分散适宜条件原理地位对象目的细胞有丝分裂动物细胞工程的基础胚胎或幼龄动物的细胞获得细胞或者细胞产物不能得到完整的个体！！一、动物细胞培养——动物细胞工程的基础未体现动物细胞的全能性动物细胞培养所需的基本条件营养物质其他条件<<糖类氨基酸无机盐维生素无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质，满足细胞对未知营养成分的需求。培养基的构成：合成培养基+血清等天然成分一般使用液体培养基，也称为培养液。（1）营养(条件)：2.培养条件

：(2)无菌、无毒的环境：无菌①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理②在无菌环境下进行操作无毒定期更换培养液定期更换培养液的目的是什么？以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害如何防止培养过程中的微生物污染？在细胞培养液中添加一定量的抗生素哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜；(3)温度、PH、渗透压：多数动物细胞生存的适宜pH为________①适宜的温度：36.5±0.5℃7.2-7.4维持细胞正常的形态和功能维持适宜渗透压的目的______________________②适宜的pH：③适宜的渗透压：(4)气体环境：①气体组成:95%空气+5%CO2细胞代谢所必需维持培养液pH②培养装置:培养皿

或

松盖培养瓶置于CO2培养箱取动物组织用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理分散成单个细胞解决悬浮生长贴壁生长(大多数）细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等接触抑制传代培养细胞悬液原代培养分瓶培养加培养液在培养皿或培养瓶内细胞分裂受阻悬浮培养的细胞:直接用离心法收集贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集②加培养液制成细胞悬液，分瓶培养①收集细胞细胞悬液细胞贴壁、接触抑制3.培养过程：能否用胃蛋白酶？适宜条件分瓶培养动物组织块分散成单个细胞加培养液细胞悬液原代培养放入培养瓶在适宜条件传代培养1.什么样的动物材料更容易成功呢？因为该细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养。动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，动物细胞培养过程中需注意的问题2.用什么方法可以将动物组织块分散成单个细胞？机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理3.常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？说明细胞间的物质主要是蛋白质。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就失去活性，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性4.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗，为什么？细胞膜的成分中含有蛋白质，而胰蛋白酶能够水解蛋白质，因此，胰蛋白酶会把细胞消化掉。因此，胰蛋白酶处理的时间不能太长。适宜条件分瓶培养动物组织块分散成单个细胞加培养液细胞悬液原代培养放入培养瓶在适宜条件传代培养5.体外培养动物细胞分为哪两类？①悬浮生长细胞：细胞能够悬浮在培养液中生长増殖②贴壁生长细胞：细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖（主要类型）6.为什么要将动物组织块分散成单个细胞，制成细胞悬液？（1）从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖；（2）能使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。保证细胞所需的营养物质的供应及有害产物的及时排出。保持细胞正常的二倍体核型(遗传物质不改变)；部分细胞的细胞核型可能会发生变化，增殖缓慢，甚至完全停止大部分细胞衰老死亡遗传物质改变8.正常细胞能否一直传代培养下去？50代细胞：无限传代：细胞系10~50代：细胞株＜10代：少数细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这些细胞已经发生了突变，正朝癌细胞发展7.如何区分原代培养和传代培养？关键是看用胰蛋白酶处理的对象和是否分瓶①分瓶前，第一次用胰蛋白酶对动物组织进行处理后的培养是原代培养。②第二次用胰蛋白酶处理，使细胞从瓶壁上脱离下来，分瓶后的细胞培养为传代培养。原代培养不仅仅包括第一代细胞，还包括了后续几代（通常至第十代）的细胞。比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养过程培养结果培养目的相同点获得细胞或细胞产物常用固体培养基完整植株动物血清常用液体培养基细胞增殖（有丝分裂）植物细胞的全能性获得大量细胞快速繁殖等植物激素①培养过程中细胞都进行有丝分裂，不涉及减数分裂；②均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件。原代培养、传代培养脱分化、再分化植物组织培养和动物细胞培养的比较（2）分布：(3)分类：动物和人体内仍保留的少数具有分裂和分化能力的细胞。在一定条件下，干细胞可以分化成其他类型的细胞。（1）概念：干细胞存在于

、

和

等多种组织和器官中。早期胚胎骨髓脐带血胚胎干细胞成体干细胞按来源全能干细胞多能干细胞按分化潜能专能干细胞受精卵原始胚胎干细胞囊胚胎儿成人胚胎干细胞成体干细胞二、干细胞的培养及应用1.干细胞的概念及分布（1）成体干细胞细①分布：③特点：②常见类型存在于

组织或器官内的干细胞造血干细胞神经干细胞精原干细胞具有

性，只能分化成

细胞或组织，

发育成完整个体的能力。成体（骨髓、外周血和脐带血中）（神经系统中）（睾丸中）组织特异特定的不具有④作用：有着自我更新能力

及分化潜能的干细胞，与组织、器官的

、

和

等密切相关。发育再生修复治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病（如帕金森病、阿尔茨海默病等）治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病。造血干细胞→神经干细胞→造血干细胞：发现最早、研究最多、应用最成熟治疗细胞损伤造成的疾病2.干细胞的类型和特点（2）胚胎干细胞(简称ES细胞)①分布：②特点：③应用实例：④局限性：存在于

中具有分化为成年动物体内的

类型的细胞，并进一步形成机体的

甚至________

的潜能。目前科学家已分离出了小鼠、兔、牛、猴和人等的ES细胞，在体外培养可分化成心肌细胞、神经元细胞和造血干细胞等细胞。必须从胚胎中获取，涉及

；因而限制了在医学上的应用。早期胚胎任何一种个体所有组织和器官伦理问题通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞，简称iPS细胞。①概念：（3）诱导多能干细胞(iPS细胞)②诱导方法：a.借助载体将

或

导入细胞（成纤维细胞以及已分化

的

均可）；b.用

诱导形成。特定基因特定蛋白T细胞、B细胞小分子化合物③优点：a.诱导过程无须破坏胚胎，不涉及伦理问题；④风险：存在着导致肿瘤发生的风险。b.iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应。⑤应用：①治疗小鼠的镰状细胞贫血；②用iPS细胞治疗阿尔茨海默病、心血管疾病等领域的研究也取得了新进展。1.下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（）A.步骤①的操作不需要在无菌环境中进行B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理D.步骤④培养过程中不会发生细胞转化C课堂随练2.大量悬浮培养产流感病毒的单克隆细胞，可用于流感疫苗的生产。下列叙述错误的是（

）A．悬浮培养单克隆细胞可有效避免接触抑制B．用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清C．当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖D．培养基pH不会影响单克隆细胞的病毒产量D课堂随练3.下列有关胚胎干细胞的叙述，正确的是(

)A．胚胎干细胞具有发育的全能性，体外培养可发育成新个体B．胚胎干细胞虽然可以在体外被诱导分化成不同类型的组织细胞，但是无法为细胞分化和细胞凋亡的机理研究提供有效手段C．胚胎干细胞可以在饲养层细胞上维持不分化的状态D．通过胚胎干细胞核移植，可以培育出与细胞核供体完全相同的复制品C4.实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是(

)A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒B.乙过程需要用胰蛋白酶等处理皮肤组织，使细胞分散开C.丙过程表示原代培养，该过程中会出现接触抑制现象D.丁过程表示传代培养，此过程中的细胞分瓶后能无限增殖D课堂随练

考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体1.概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。2.原理：细胞膜具有一定的流动性3.结果：形成杂交细胞4.诱导方法：与植物原生质体融合的方法相同物理法电融合法等化学法聚乙二醇（PEG）融合法生物法灭活病毒诱导法动物细胞融合特有细胞核的融合→具有原来两个或多个细胞的遗传信息。6.

意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。至今，种间、属间、科间、甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得了成功。5.融合实质及完成的标志：一、动物细胞融合技术植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞融合成功的标志意义主要用途细胞膜具有一定的流动性植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性用果胶酶和纤维素酶去壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞电融合法、高Ca2+-高pH融合法；离心法、聚乙二醇（PEG）融合法聚乙二醇（PEG）融合法、电融合法、灭活病毒诱导法再生出细胞壁细胞核的融合打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能获得完整的杂种植株主要用于制造单克隆抗体植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较抗体―→血清（2）缺点：产量低、

低、

差。纯度特异性（1）方法如何解决这个问题呢？免疫抗原传统抗血清二、单克隆抗体及其应用1.传统抗体的获得一种B淋巴细胞（只产生一种特定抗体）能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞融合杂交瘤细胞产生足够数量的特定抗体大量增殖单克隆抗体既能迅速大量增殖，又能产生抗体由单个B淋巴细胞经过克隆（无限增殖），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体。2.单克隆抗体(1)概念用特定抗原免疫小鼠骨髓瘤细胞的培养经过免疫的B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合多种细胞B-B

、B-瘤、瘤-瘤（B、瘤）小鼠的脾脏中获取阶段一：动物细胞融合(2)制备单克隆抗体的过程骨髓瘤细胞合成DNA的途径被氨基喋呤阻断，骨髓瘤细胞死亡B淋巴细胞培养几天后死亡（正常细胞不能无限增殖）杂交瘤细胞（既能大量增殖，又能产生抗体）置于选择培养基上培养B-B

、B-瘤、瘤-瘤（B、瘤）阶段二：筛选杂交瘤细胞（第一次筛选）小资料：细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。②鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，可是能无限增殖。①人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能无限增殖。HAT培养基：在培养液中加入氨基嘌呤，阻断D途径B淋巴细胞及同型融合细胞不能无限增殖，死亡骨髓瘤细胞及同型融合细胞不能合成DNA，死亡杂交瘤细胞能无限增殖，生长HAT培养基阶段三：筛选分泌专一抗体的杂交瘤细胞（第二次筛选）方法：用培养液

稀释培养杂交瘤细胞(多种)每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞克隆化培养、抗体检测抗原—抗体特异性结合原理：抗体检测呈

阳性的杂交瘤细胞

多孔细胞培养板阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。阳性孔单克隆抗体制备过程中两次筛选的比较项目第一次筛选第二次筛选筛选原因目的

筛选方法

筛选出杂交瘤细胞筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞用特定的选择培养基（HAT培养基）筛选：未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。克隆培养、抗体检测：用多孔细胞培养板培养，在每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞的情况下进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。诱导融合后得到的细胞中，除杂交瘤细胞之外，还有未融合的亲本细胞，也有融合的具有同种核的细胞阶段四：动物细胞培养抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞体外培养体内培养(注射到小鼠腹腔内)单克隆抗体从细胞培养液中提取从小鼠腹水中提取优点：可大规模培养，大量生产缺点：需要人为控制培养条件，成本相对较高优点：易于控制培养条件，成本较低缺点：规模小，产量少——获得大量单克隆抗体单克隆抗体第二次筛选杂交细胞杂交瘤细胞体外或体内培养第一次筛选骨髓瘤细胞

诱导融合分泌特异抗体的杂交瘤细胞杂交瘤细胞群提取已免疫的B淋巴细胞动物细胞融合技术动物细胞培养技术既能大量繁殖又能产生抗体注射抗原单克隆抗体制备的过程中，应用到的技术手段细胞膜的流动性细胞增殖小结：单克隆抗体的制备（1）该过程中应用到的技术_______________________________________（2）原理_______________________________________（3）注射特定抗原的目的______________________________________________（4）诱导融合的方法______________________________________动物细胞特有的诱导融合方法为_______________________动物细胞融合、动物细胞培养细胞膜具有一定的流动性、细胞增殖用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法灭活病毒诱导法（5）第一次筛选的目的______________________

第一次如何筛选___________________________

筛选原理_________________________________________________________________________________筛选获得杂交瘤细胞用特定的选择培养基进行筛选在选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长课堂随练（6）杂交瘤细胞的特点__________________________________（7）第二次筛选的目的________________________________________________如何筛选___________________________________________________选择抗体检测呈___性的杂交瘤细胞，即_____________

_____________（8）抗体检测原理_______________________________________获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测（进行多次筛选）分泌的抗体能与特定的抗原结合抗原和抗体能够特异性结合(分子水平的鉴定）既能迅速大量增殖，又能产生抗体（9）如何获取大量所需杂交瘤细胞__________________________________________（10）如何获取单克隆抗体①体外培养___________________________②小鼠腹腔内培养_________________________（11）单克隆抗体的优点______________________________________________________________________________在体外条件下大规模培养（接种于培养液中）或注射到小鼠腹腔内增殖从细胞培养液中获取从小鼠腹水中获取能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备阳课堂随练优点灵敏度高、特异性强、可大量制备准确地识别抗原的细微差异与特定抗原发生特异性结合应用（3）单克隆抗体及其应用①作为诊断试剂——最广泛的应用抗人绒毛促性腺激素单克隆抗体比原来诊断方法提前了10d左右，准确率在90﹪以上。诊断优点：具有准确、高效、简易、快速特点②用于治疗疾病和运载药物(主要用于癌症治疗)如：单克隆抗体+药物=“生物导弹”优点：位置准确、疗效高、副作用小ADC抗体药物接头ADC被细胞吞噬②①⑤细胞凋亡单克隆抗体+接头+药物（如细胞毒素）=ADC瞄准装置爆炸装置发挥靶向运输作用发挥治疗效应。如杀伤靶细胞。其作用机理是通过单克隆抗体的靶向作用特异性地识别肿瘤细胞表面抗原，然后利用细胞本身具备的内吞作用使化学药物进入肿瘤细胞体内发生药力，从而达到杀死肿瘤细胞的目的。实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。1．单克隆抗体在疾病诊断治疗和病原体鉴定中发挥重要作用。下列叙述正确的是(

)A．将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后就获得了产生单克隆抗体的杂交瘤细胞系B．单克隆抗体是由杂交瘤细胞系所产生的不同于天然抗体的人工合成生物分子C．将细胞毒素与单克隆抗体结合可以实现特异性识别肿瘤抗原并杀伤肿瘤细胞D．将一种灭活病原体作为疫苗接种人体后会产生针对抗原的特异性单克隆抗体C课堂随练2．科研人员通过动物细胞融合技术，将杂交瘤细胞A和B再次融合形成双杂交瘤细胞AB。该双杂交瘤细胞可产生识别两种抗原的双特异性抗体。据图分析，下列叙述正确的是（

）

A．制备杂交瘤细胞A需经过两次筛选，第一次筛选后，两两融合的细胞均可增殖B．获得的双杂交瘤细胞需α、β抗原刺激后才能产生双特异性抗体C．双杂交瘤细胞在进行传代培养前通常需使用胃蛋白酶使之分散D．若双特异性抗体用于肿瘤治疗，则α、β抗原中至少一种为癌细胞表面抗原D课堂随练

考点三动物体细胞核移植技术和克隆动物将动物的一个细胞的细胞核，移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。供体受体克隆动物1.概念：2.原理：动物细胞核的全能性3.生殖方式：无性生殖→保持优良性状4.类型：胚胎细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，表现全能性容易细胞分化程度高，表现全能性十分困难动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植一、动物体细胞核移植技术采集卵母细胞，在体外培养到MⅡ期高产奶牛(供体)去核：显微操作取体细胞去核的卵母细胞供体细胞为何选用MⅡ卵母细胞?①其细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质；②卵母细胞体积大，易操作；③卵母细胞营养物质丰富。卵母细胞为什么要“去核”？保证核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自供体细胞。以克隆高产奶牛为例5.过程：去核的卵母细胞供体细胞将供体细胞注入去核的卵母细胞的透明带①对卵母细胞损伤较小；②保证供体细胞的细胞核不被破坏，操作方便。电融合法激活方法：①物理方法；②化学方法重构胚将整个供体细胞注入卵母细胞中有何优点？激活重构胚目的是？用物理或化学方法(如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚胎，使其完成细胞分裂和发育进程。早期胚胎(代孕)母牛体内生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛克隆动物早期胚胎动物体细胞核移植技术证明了？（原理）已分化的动物体细胞的细胞核具有全能性。体细胞核移植方法生产的克隆动物，并不是对体细胞供体动物进行了100%的复制，为什么？不是对核供体动物进行100%的复制。克隆动物遗传物质细胞核的DNA来自于供体动物的细胞核线粒体中的DNA供体细胞和受体卵母细胞生活环境：动物的发育及一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系，克隆动物所生活的环境与核供体动物生活的环境不会完全相同。采集卵母细胞，在体外培养到MⅡ期从供体高产奶牛身上取体细胞显微操作去核对体细胞进行培养去核的卵母细胞供体细胞电融合法将供体细胞注入去核的卵母细胞重构胚

用物理或化学方法激活早期胚胎将胚胎移入受体（代孕）母牛体内生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛早期胚胎培养动物细胞培养胚胎移植动物细胞融合动物细胞核移植技术小结：体细胞核移植的过程体细胞核移植的过程以克隆高产奶牛为例1.采集的卵母细胞应培养至_____________________2.选择MⅡ期卵母细胞的原因①____________________________________②_________________________

③_________________________3.卵母细胞去核的方法_________________4.“去核”去的是什么？________________________5.去核的原因________________________________________________________MⅡ期（减数分裂Ⅱ中期）含有促进细胞核表现全能性的物质细胞体积大，易于操作显微操作（去核）法纺锤体-染色体复合物卵母细胞内卵黄多，营养物质丰富使核移植得到的胚胎或动物核内遗传物质全部来自有重要利用价值的动物课堂随练6.供体细胞注入卵母细胞的优点_____________________________7.诱导融合的方法____________________8.融合的结果______________________________9.重构胚概念_________________________________________对卵母细胞损伤较小注意：实质是直接将供体细胞注入去核卵母细胞的透明带内电融合法供体核进入卵母细胞，形成重构胚人工重新构建的胚胎，具有发育成完整个体的能力10.激活重构胚的方法①物理方法_________②化学方法__________________________11.以上方法处理重构胚的目的________________________________12.实验结论________________________________________电刺激Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程证明了动物已分化的体细胞的细胞核具有全能性（1）在畜牧生产中：加速家畜遗传改良进程、促进优良畜群繁育2018年，中国西北农林科技大学成功克隆荷斯坦奶牛“妞妞”，其核供体为年产奶量超10吨的精英母牛。后续批量克隆的奶牛群体乳蛋白含量提升12%，繁殖效率提高30%。二、动物体细胞核移植技术的应用前景转基因体细胞（2）在医药卫生领域：①通过建立转基因体细胞系，再利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产许多珍贵的医用蛋白；乳腺生物反应器②在治疗人类疾病时，转基因克隆动物的细胞、组织或器官可以用于异种移植。病人取核去核卵母细胞重构胚胎各种细胞组织或器官诱导取出体细胞核移植移植胚胎干细胞取出治疗性克隆③以患者作为供体培育的人核移植胚胎干细胞，经过诱导分化能形成相应的细胞、组织或器官，将它们移植给患者时可以避免发生免疫排斥反应。许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。易出现早衰（多利羊猜想）。胚胎移植—动物幼体产出概率＜10％(1)成功率低(2)克隆动物存在健康问题(3)克隆动物食品的安全性问题存在争议三、动物体细胞核移植技术的存在问题1.“中中”和“华华”是两只在我国出生的克隆猕猴，它们也是国际上首例利用体细胞克隆技术获得的非人灵长类动物。如图表示培育“中中”和“华华”的流程。下列相关叙述正确的是()A.图示过程中利用的技术有核移植和干细胞移植技术等B.这两只克隆猕猴是由同一受精卵发育而成的双胞胎C.融合细胞的培养过程需要无菌、无毒的环境和营养等条件D.利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猕猴的难度要更大C课堂随练2.我国科学家利用人的体细胞制备多能干细胞，再用小分子TH34成功诱导衍生成胰岛B细胞。下列相关叙述错误的是（

）A．基因选择性表达被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞B．在小分子TH34诱导下，多能干细胞发生基因突变，获得胰岛素基因C．衍生的胰岛B细胞在葡萄糖的诱导下能表达胰岛素，才可用于移植治疗糖尿病D．若衍生的胰岛B细胞中凋亡基因能正常表达，细胞会发生程序性死亡B课堂随练3.大量悬浮培养产流感病毒的单克隆细胞，可用于流感疫苗的生产。下列叙述错误的是（

）A．悬浮培养单克隆细胞可有效避免接触抑制B．用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清C．当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖D．培养基pH不会影响单克隆细胞的病毒产量D课堂随练

真题感知·命题洞见1．（2025·广东·高考真题）将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（

）A．制备细胞悬液B．置于5%CO2等适宜条件下培养C．离心收集细胞D．用胰蛋白酶消化支架后分离片层D真题跟练2.（2025·贵州·高考真题）下图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述正确的是（）A．应使用总蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间B．W细胞是先提取B淋巴细胞再用PML蛋白免疫而获得C．步骤2的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞