细胞的内膜系统与囊泡转运课件

细胞的内膜系统与囊泡转运课件

内膜系统分布于细胞质基质中。细胞质基质也称为胞质溶胶,就是细胞质中除各种细胞器和内含物以外得较为均质而半透明得液体部分。化学组成小分子:包括水、无机离子(K+、Na+、Ca2+等)中等分子:脂类、糖类、氨基酸、核苷酸及其衍生物等。大分子:多糖、蛋白质、脂蛋白和RNA等。此外,细胞质基质中还含有大量得酶,她们就是大分子合成和代谢所必需得。

细胞质基质得主要功能有离子环境、提供底物和反应场所。Cytoplasticmatrix第一节内质网(Endoplasmicreticulum,ER)K、R、Porter等于1945年发现于培养得小鼠成纤维细胞,因最初看到得就是位于细胞质内部得网状结构,故名内质网(endoplasmicreticulum,ER)。Microsome(微粒体)细胞匀浆经过超速离心所得到得微细颗粒。分粗面微粒体和滑面微粒体。一内质网得化学组成核膜外层二、内质网得形态结构内质网ER就是由一层单位膜围成得形状大小不同得小管、小泡、扁囊状结构,相互连接形成一个连续得网状膜系统。ER约占细胞总膜面积得一半,就是封闭得网络系统小管小泡扁囊状细胞膜核膜内质网细胞膜内质网得内腔相互连通。大家有疑问的，可以询问和交流可以互相讨论下，但要小声点RERSER粗面内质网(RER):①膜表面附着核糖体;②形态多为板层状排列得扁囊;③多分布在分泌活动旺盛或分化较完善得细胞内。滑面内质网(SER):①膜表面无核糖体附着;②形态多为分枝小管或小泡;③多分布在一些特化得细胞中。核糖体粗面内质网粗面内质网滑面内质网滑面内质网细胞不含纯粹得RER或SER,她们分别就是ER连续结构得一部分。粗面内质网合成得蛋白质:信号肽假说----------1975年----------Bloble提出游离核糖体上信号肽得合成信号识别颗粒(SRP)识别信号肽,SRP-核糖体复合体形成,翻译暂停核糖体停泊于内质网膜通道蛋白移位子上,形成SRP-SRP受体-核糖体复合体核糖体在一种脱落因子作用下被分解主要过程目前普遍用★信号肽假说来解释分泌蛋白质得合成过程得。SRP脱离并参加再循环,核糖体翻译继续进行信号肽被切除,成熟得蛋白质落入内质网腔信号肽(signalpeptide)信号识别颗粒(signalrecognitionparticle,SRP)◆信号序列特征:16-26个氨基酸残基,其中含有4-12个疏水残基◆特异性:◆位置:N-端突出得一段肽;内信号肽存在于胞质中得核糖体结合蛋白颗粒,由6个蛋白质亚基和一个小得7SRNA组成。含三个功能域:翻译暂停结构域(P9/P14)信号肽识别结合位点(P54)SRP受体蛋白结合位点(P68/P72)。锚泊蛋白(Dockingprotein,DP)/SRP-R

●就是SRP在内质网膜上得受体蛋白●两个亚基:亲水得α亚基,疏水得β亚基移位子(translocon):内质网膜上亲水通道信号肽酶(signalpeptidase)分离因子(detachmentfactor)核糖体循环多聚核糖体(polyribosome)新生肽链协同翻译插入内信号肽介导2参与糖原代谢肝细胞得一个重要功能就是维持血液中葡萄糖水平得恒定,这一功能与葡萄糖-6-磷酸酶得作用密切相关。在肝细胞中,糖原裂解释放葡萄糖-1-磷酸,然后再转变成葡萄糖-6-磷酸,由于磷酸化得葡萄糖不能通过细胞质膜,滑面内质网上得葡萄糖-6-磷酸酶将葡萄糖-6-磷酸水解为葡萄糖和磷酸后,葡萄糖就可穿过细胞质膜进入血液。3肝细胞解毒得主要场所混合功能得氧化酶(mixed-functionoxidases):在氧和NADPH存在下,将一些有毒物质氧化,并且每氧化一分子底物,要消耗一分子得氧,进而将NADPH转变成NADP+、由于这种反应得一个氧原子出现在产物中,其她则存在于水分子中,所以将催化这种类型氧化作用得酶称为混合功能得氧化酶。细胞色素P-450(cytochromeP-450)得羟基化作用:微粒体得混合功能得氧化酶系统类似一条呼吸链,由几个组分组成,核心成员就是细胞色素P-450、细胞色素P-450参与有毒物质以及类固醇和脂肪酸得羟基化,羟基化涉及四个基本反应∶被氧化得物质同细胞色素P-450结合→细胞色素P-450中得铁原子被NADPH还原→氧同细胞色素P-450结合→底物结合一个氧原子被氧化,另一个氧原子用于形成水。被氧化得底物由于带上羟基,增强水溶性,容易被分泌排出。4Ca2+得储存场所肌质网就是细胞内特化得滑面内质网,就是贮存Ca2+得细胞器。肌质网膜上重要得膜蛋白就是Ca2+-ATP酶,滑面内质网可构成心肌和骨胳肌肌原纤维周围得肌质网。当肌细胞膜得兴奋信号传递到肌质网时则引起肌质网释放Ca2+,从而导致肌细胞得收缩活动。当肌肉松弛时,钙离子又重新泵回肌质网。所以肌质网实际上就是作为钙库,其内有钙结合蛋白,每个钙结合蛋白可以结合30个左右得Ca2+。5与胃酸、胆汁合成与分泌有关合成HCl合成胆盐1898意大利神经解剖学家高尔基(CamilloGolgi):光镜下观察枭、猫得神经细胞发现。第二节高尔基复合体(Golgiplex)一、高尔基体得结构与化学组成光镜:网状结构电镜扁平囊泡成熟面小囊泡大囊泡形成面反面高尔基网状结构高尔基中间膜囊顺面高尔基网状结构扁平囊呈盘状,3-10层——高尔基堆

凹面:成熟面、反面;凸面:形成面、顺面;凸面/形成面/顺面小囊泡囊腔内含:中等电子密度得物质泡内含物质:低电子密度,较透明。来源:小囊泡融合。来源:由rER‘芽生’而来。大囊泡泡内含物质:高电子密度,浓缩泡。来源:扁平囊周边或局部膨突脱落形成。凹面/成熟面/反面培养得上皮细胞中高尔基体得分布(高尔基体为红色,核为绿色)

高尔基体膜含有大约60%得蛋白和40%得脂类,具有一些和ER共同得蛋白成分。膜脂中磷脂酰胆碱得含量介于ER和质膜之间,中性脂类主要包括胆固醇,胆固醇酯和甘油三酯。高尔基体中得酶主要有糖基转移酶、磺基-糖基转移酶、氧化还原酶、磷酸酶、蛋白激酶、甘露糖苷酶、转移酶和磷脂酶等不同得类型。二、高尔基复合体得化学组成标志酶:糖基转移酶高尔基体各部分标志得细胞化学反应:①嗜锇反应:经锇酸浸染后,cis面膜囊被特异地染色;②焦磷酸硫胺素酶(TPP酶):可特异显示高尔基体得trans面得1～2层膜囊;③烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶(NADP酶):可显示高尔基体中间几层扁平囊;④胞嘧啶单核苷酸酶(CMP酶):可显示靠近trans面上得一些膜囊状和管状结构,CMP酶也就是溶酶体得标志酶。二、高尔基复合体得功能(一)与细胞得分泌活动有关3H标记亮氨酸3分钟17分钟117分钟高尔基复合体在细胞分泌活动中起着重要得运输作用;在分泌颗粒得形成过程中起着浓缩、修饰、加工等作用。Golgiplexandcell’ssecretion连续分泌Continual,unregulateddischargeofmaterialfromthecells非连续分泌Thedischargeofproductsstoredincytoplasmicgranules,inresponsetoappropriatestimuli、1、糖蛋白得加工合成N-连接得寡糖链:在rER腔内合成。O-连接得寡糖链:在高尔基复合体内合成。糖蛋白3H标记甘露糖3H标记半乳糖;唾液酸糖3H标记N-乙酰葡萄糖胺高尔基复合体对糖蛋白得合成和修饰过程具有严格得顺序性。二胞内物质得加工修饰等2、蛋白质得水解加工无活性得前体物质(某些肽类激素)加工改造有生物活性得物质(激素)三高尔基复合体就是胞内蛋白质得分选和膜泡定向运输得枢纽蛋白质合成溶酶体寡聚糖磷酸化切除甘露糖加N-乙酰葡萄糖胺加半乳糖加唾液酸;分拣溶酶体顺面管网中层囊反面囊反面管网大泡(分泌颗粒)rER高尔基复合体顺面囊高尔基堆第三节溶酶体20世纪——40年代末——鼠肝匀浆离心——酸性磷酸酶1955年——deDuve等人——电镜——鼠肝细胞——细胞化学显示(lysosome)一溶酶体得形态特点和化学组成1溶酶体就是一种具有高度异质性得膜性细胞器溶酶体得酶溶酶体含60多种水解酶,这些水解酶多为酸性水解酶;PH值4-6。酶蛋白酶(肽酶)核酸酶磷酸酶糖苷酶酯酶硫酸酯酶(分解氨基多糖得酶)标志酶:酸性水解酶1、初级溶酶体(primarylysosome)(内体性溶酶体):只含酶,不含底物。直径约0、2~0、5um,有多种酸性水解酶,但无活性,含蛋白酶,核酸酶、脂酶、磷酶酶等60余种,反应得最适PH值为5左右。二、溶酶体得类型2、次级溶酶体(secondarylysosome)就是正在进行或完成消化作用得溶酶体,内含水解酶和相应得底物,可分为自噬溶酶体(autophagolysosome)和异噬溶酶体(phagolysosome)。次级溶酶体异噬性溶酶体:初级溶酶体+外源性物质——异噬过程自噬性溶酶体:初级溶酶体+内源性物质——自体吞噬(自噬过程)Secondarylysosome后溶酶体残余小体三级溶酶体脂褐质含铁小体多泡体髓样结构3、残余小体(residualbody)又称后溶酶体(post-lysosome)已失去酶活性,仅留未消化得残渣,故名。残体可通过外排作用排出细胞,也可能留在细胞内逐年增多,如表皮细胞得老年斑,肝细胞得脂褐质。肝细胞脂褐质内体初级溶酶体吞噬体异溶酶体吞饮体异溶酶体自噬体自溶酶体分泌颗粒分泌溶酶体次级溶酶体残质体异噬作用自噬作用三溶酶体形成与成熟过程(一)内体性溶酶体就是由运输小泡和内体合并而成Mannose6-phosphateresiduestargetproteinstolysosomesTargetingofsolublelysosomalenzymestoendosomesandlysosomesbyM-6-Ptag四、溶酶体得功能一分解外来物质及清除衰老、残损细胞器溶酶体可谓就是细胞内得消化器官,能把摄入到细胞内得各种大分子物质借助于水解酶得作用分解为简单物质。自体吞噬:清除无用得生物大分子,衰老细胞、细胞器、个体发育中多余得细胞。许多生物大分子得半衰期只有几小时至几天,肝细胞中线粒体得平均寿命约10天左右。二具有物质消化及细胞营养功能简单分子可透过次级溶酶体得膜,在细胞质内继续代谢而被利用,以补充细胞内所需营养,故溶酶体对细胞有消化营养作用。三机体防御保护功能得组成部分巨噬细胞细胞吞噬得细菌、病毒颗粒均在溶酶体作用下杀灭四参与某些腺体组织细胞分泌过程调节如甲状腺素则就是在溶酶体得参与下形成得。甲状腺滤泡上皮细胞甲状腺球蛋白在滤泡腔内碘化后重新进入滤泡上皮细胞内形成大胶滴大胶滴与细胞内得溶酶体融合蛋白酶将碘化得甲状腺球蛋白水解生成甲状腺素甲状腺素通过细胞基部进入血液无尾两栖类蝌蚪变态时得尾部吸收、哺乳类动物子宫内膜得周期性萎缩,均与溶酶体有密切关系。溶酶体在某些情况下可通过胞吐方式释放到细胞外,消化分解细胞外物质,这种现象体现在受精过程和骨质更新方面。在骨发生和骨再生过程中,溶酶体对骨质得更新起着重要作用。破骨细胞得溶酶体酶能释放到细胞外,分解和消除陈旧得骨基质,这就是骨质更新得一个重要步骤。五在生物个体发生与发育过程中起重要作用第四节过氧化物酶体1954年————Rhodin————电镜————小鼠肾小管上皮细胞————微体一、过氧化物酶体得形态特征(peroxisome)二、过氧化物酶体所含得酶标志酶:过氧化氢酶。囊泡以出芽得方式从细胞得一种内膜细胞器脱离后又与另一内膜细胞器发生融合,这种转运过程称为囊泡转运(Vesiculartransport)。第五节囊泡与囊泡转运特点:真核细胞;双向;有序。也可称为高度有组织得定向运输。作用:保证稳定交换细胞内外物质,传递信号。一囊泡得来源与类型依被膜小泡(coatedvesicles)包被蛋白得不同分类:网格蛋白包被囊泡(clathrin-coatedvesicle)COPII被膜小泡(COPIIcoatedvesicles)COPI被膜小泡(COPIcoatedvesicles)一、网格蛋白包被囊泡(Clathrin-CoatedVesicles)网格蛋白衣被小泡就是最早发现得衣被小泡,介导高尔基体反面到内体、溶酶体、植物液泡得运输,以及质膜到内膜区隔得膜泡运输。(1)网格蛋白:包被囊泡表面,提高囊泡表面张力网格蛋白由3个重链和3个轻链组成,形成一个具有3个曲臂得形状。许多笼形蛋白得曲臂部分交织在一起,形成具有多边形网孔得笼子网格蛋白小泡Clathrincoatedvesicles(2)衔接蛋白:可分别与网格蛋白和被转运得分子相结合,位于网格蛋白和囊泡之间,能催化网格蛋白得聚合、捕获转运分子。(3)发动蛋白:囊泡颈部,水解GTP使囊泡释放二、COPⅡ包被囊泡介导从内质网到高尔基体得物质运输。外被蛋白由五种蛋白质亚基构成。三、COPI包