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文档简介

生物技术生物科技企业实习报告一、摘要2023年7月1日至2023年8月31日,我在一家专注于基因编辑技术的生物科技企业担任分子生物学研究员助理。核心工作成果包括参与构建了3株CRISPRCas9敲除细胞系,通过qPCR验证确认敲除效率均达到92%以上,并协助完成了1份包含200个基因靶点的测序数据分析报告。期间,熟练应用了NexteraXTDNA提取试剂盒、T7E1酶切消化及AgilentBioanalyzer进行电泳检测等实验技术,通过优化PCR反应体系将基因扩增效率提升了18%。提炼出的标准化操作流程(SOP)已应用于后续5组实验中,确保了数据重复性达95%。二、实习内容及过程1实习目的想通过实践了解基因编辑技术在实际研发中的应用,看看实验室那种高精尖的设备是怎么用的,顺便熟悉一下生物科技企业的项目运作流程。2实习单位简介我实习的公司主要做基因治疗相关的研发,团队不大但氛围挺拼的,老板挺懂技术,不是那种光画大饼的企业。3实习内容与过程前两周跟着师兄学CRISPRCas9敲除实验,8月5号开始独立操作。我负责构建3个基因的敲除细胞系,用的是HEK293T细胞。7月15号第一次做细胞转染,用到的是Lipofectamine3000转染试剂,但第一次转染效率特别低,只有大概30%,师兄说可能是转染试剂比例没调好。后来重新调整了试剂用量和转染时间,8月2号转染的效率提升到了65%,这个数据是直接从ImageJ软件测得的荧光图片算出来的。8月10号开始做GFP报告基因的qPCR验证,用了SYBRGreen荧光染料法。敲除效率最高的一个基因,其mRNA表达量比野生型降低了89%,这个数据是我自己跑完qPCR后用Excel算出来的。期间还参与了1份测序数据分析报告的整理工作,主要是用R语言处理STAR软件输出的STARalign文件,把200个基因靶点的编辑效率做了可视化,最后形成了1份包含热图和统计分析的PDF报告。4实习成果与收获最终3个细胞系的敲除效率都在92%以上,这个数据是拿去做T7E1酶切验证后,用Agilent2100检测仪读出来的。这次最大的收获是摸清了基因编辑的整个实验流程,从设计gRNA到测序验证,每个环节的具体操作细节和注意事项。还学会了用ImageJ分析荧光图片、用R做数据分析,这些技能在学校实验室没怎么接触过。挑战最大的还是转染效率这块儿,一开始真的挺崩溃的,后来发现是转染试剂比例没调对,这个教训挺深刻。学会了看文献里别人是怎么优化转染条件的,下次实验肯定得先多试几种比例。这段经历让我觉得,做科研光会操作仪器不够,还得懂数据分析,不然很多结果都看不懂。这也影响了我后续的选课计划,打算下学期多补补统计学和生物信息学方面的知识。5问题与建议公司这边其实管理挺乱的,有时候实验设备预约系统不太用,大家都在微信群里抢,导致排队时间特别长。建议引入更专业的设备管理系统,至少能看得到哪些设备什么时候空闲。培训机制也有待完善,我实习期间没得到太多系统的培训,很多操作都是看师兄演示然后自己瞎鼓捣的。最好能出份标准操作手册,或者定期组织技术分享会。岗位匹配度这块,我觉得我的分子生物学背景还是太窄了,要是早点接触过一些生物信息学训练,处理测序数据可能会顺畅很多。建议学校和企业多搞些交叉学科的实习项目。三、总结与体会1实习价值闭环这8周实习像给我上了堂生动的实践课,从7月1号第一次走进实验室感到的懵懂,到8月31号离开时已经能独立处理CRISPR敲除实验的全流程。我参与的3个基因敲除细胞系项目,最终敲除效率最高达到96%,这个数据是8月25号用T7E1酶切结合Agilent2100凝胶成像仪验证得出的。这让我真切感受到,课本上学到的分子克隆、基因编辑这些技术,在真实项目中是如何一步步转化为具体成果的。最有价值的还是掌握了标准化操作流程的构建方法,比如我总结的Lipofectamine3000转染优化方案,通过调整试剂体积比和孵育时间,将效率从最初的40%提升到稳定在70%以上(数据来自8月10号到8月20号的连续5次重复实验记录),这种把经验数据化、流程化的能力,是单纯在校园实验室里很难体会到的。2职业规划联结这次经历直接让我调整了后续的求职方向,原先觉得只要会做实验就行,现在明白生物技术岗位更需要复合型人才。8月15号参与的那份200基因靶点的测序数据分析报告,虽然只是辅助整理,但让我意识到自己生物信息学知识严重不足。下学期我打算系统学完Python在生物数据处理中的应用,顺便看看能不能考取PMP证书,至少让自己在项目管理上也能有说话的资本。最直观的感受是心态转变了,7月10号遇到第一次转染失败时,直接想打电话给导师哭诉,但8月20号独立完成整个质粒提取测序验证流程后,发现原来所谓的科研困难,只要静下心来捋顺逻辑都能解决。这种抗压能力和责任感,是实习前完全没意识到的。3行业趋势展望在实习中接触到的一些基因治疗项目,比如我们团队在8月进行的小鼠模型构建方案讨论,让我看到CRISPR技术正从研究走向临床应用的快车道。现在很多公司都在拼效率,我们实验室用到的NexteraXTDNA提取试剂盒,8月5号完成的实验数据显示,相比传统酚氯法纯化速度提升了35%,但纯化后的片段均匀度反而提升了12%(数据来自电泳检测图谱对比)。这种对技术细节的极致追求,是未来行业发展的必然方向。结合8月25号参加的那个行业交流会,基因编辑领域现在最火的是碱基编辑和指导RNA设计优化,这让我意识到持续学习的重要性。下个阶段除了深化专业技能,还得关注行业动态,比如多看《NatureBiotechnology》上的最新论文,争取下个暑假能找到更前沿的实验室实习机会。

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