（正式版）DB21∕T 2288-2014 《养殖水体中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱串联质谱法》

养殖水体中孔雀石绿残留量的测定液相色谱串联质谱法2014-04-19发布辽宁省质量技术监督局发布IDB21/T2288—2014本标准是按照GB/T1.1—2009给出的规定起草的。本标准由大连市水产技术推广总站提出。本标准由大连市质量技术监督局归口。本标准起草单位：大连市水产技术推广总站。本标准主要起草人：张秀妍、李勃、丁勇、马琳、郝佳、王骏。DB21/T2288—20141凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。4.5甲酸溶液[1+1000]:准确吸取1.00mL甲酸溶于1000mL水中，经0.22μm混合纤维素滤膜过滤。4.6乙酸铵缓冲溶液[5mmol/L]:称取0.385g无水乙酸铵溶解于1000mL水中，冰乙酸调pH到4.5。4.7乙腈-乙酸铵混合溶液(1+1):500mL乙腈与500mL乙酸铵溶液(4.6)超声混合5min。4.9盐酸羟胺溶液[0.25g/mL]:称取25g盐酸羟胺溶于100mL水中。4.11对-甲苯磺酸溶液[1.0mol/L]:称取17.2g对-甲苯磺酸，用水溶解，并定容至100m24.13.1孔雀石绿标准储备溶液[1.0mg/mL]:准确称取10.00mg的孔雀石绿标准品，用乙腈配制成1.0mg/mL的标准储备溶液，-18℃避光保存，保存期3个月。4.13.2氘代孔雀石绿标准储备溶液[1.0mg/mL]:准确称取10.00mg的氘代孔雀石绿标准品，用乙腈配制成1.0mg/mL的标准储备溶液，-18℃避光保存，保存期3个月。4.14孔雀石绿标准工作溶液[100ng/mL、10.0ng/mL]:准确吸取孔雀石绿标准储备溶液(4.13.1),用乙腈逐级稀释配成100ng/mL和10.0ng/mL的工作溶液，-18℃避光保存，保存期7天。4.15氘代孔雀石绿标准工作溶液[100ng/mL]:准确吸取氘代孔雀石绿标准储备溶液(4.13.2),用乙腈逐级稀释配成100ng/mL的工作溶液，-18℃避光保存，保存期7天。5.2电子天平：感量0.01mg。溶液(4.15)、1.5mL盐酸羟胺溶液(4.9)、2.5mL对-甲苯磺酸溶液(4.11),振摇混匀。6.1.3继续向分液漏斗中加入10.0mL乙腈、25.0mL二氯甲烷，剧烈振摇3min,静置分层10min,合6.1.4向鸡心瓶中加入1.00mL乙腈-乙酸铵混合溶液(4.7),涡旋振荡1min、超声振荡1min,样液6.3测定36.3.1.1色谱柱：Ci8柱，100mm×3.0mm(内径),粒度1.8μm。6.3.1.2流动相：乙腈+甲酸水溶液(0.1%)=60+40(V/V)。6.3.2.1离子源：电喷雾ESI源，正6.3.2.7监测离子对：孔雀石绿m/z329/313、329/208;氘代孔雀石绿m/z334/318。按6.3的仪器条件测定，孔雀石绿以氘代孔雀石绿为内标物，通过仪器工作液中孔雀石绿、氘代孔雀石绿的参考保留时间分别为2.203min、2.184min,标准溶液的色谱图及质谱图参见附录A。47.2样品中孔雀石绿的含量按式(1)计算。计算结果需扣除空白值。于10%,批间相对标准偏差小于15%。5(资料性附录)孔雀石绿和氘代孔雀石绿标准溶液的色谱图和质谱图图A.1孔雀石绿和氘代