生物技术生物制药公司生物技术研究员实习报告

生物技术生物制药公司生物技术研究员实习报告一、摘要

2023年6月5日至8月22日，我在一家生物技术生物制药公司担任生物技术研究员实习生，参与重组蛋白药物表达体系优化项目。通过建立并验证新型工程菌株，将目标蛋白产量从5.2mg/L提升至18.7mg/L，效率提升264%。核心工作包括：1）利用CRISPRCas9对表达菌株进行基因编辑，敲除内源蛋白干扰基因3个；2）优化培养基配方，添加0.5mMFeSO4和0.2%L阿拉伯糖，发酵周期缩短至48小时。期间应用分子克隆、蛋白质电泳、HPLC等技能，掌握标准化菌株构建流程和动力学模型分析。可复用方法论包括：基于qPCR动态监测的基因表达调控策略，及通过响应面法优化发酵参数的系统化方案。

二、实习内容及过程

实习目的主要是把学校学的书本知识跟实际工作对接上，了解生物制药公司里一个研究员是咋样工作的，特别是重组蛋白这块儿。

实习单位是个做单克隆抗体的公司，规模不大但氛围挺钻研，主要搞细胞培养和蛋白纯化。我被分到研发部门，跟着一个师兄做新药表达工艺开发。

实习内容就是跟着做整个表达菌株的构建到发酵优化的流程。刚开始是学习怎么搞基因编辑，6月10号左右，我负责把一段增强型荧光素酶报告基因插进表达载体里，用作筛选标记。接着就是转染CHO细胞，6月18号完成第一次转染，第二天就开始看平板挑单克隆。

有个挑战是第一次做发酵优化，7月5号开始试培养基，光是调整碳源比例就试了6种组合，结果表达量提升最明显的只有一种，用了葡萄糖加0.2%阿拉伯糖的组合，目标蛋白浓度从最初的4.5mg/L提到了7.8mg/L。但上规模的发酵一直不太理想，7月20号左右第一次发酵结束取样，纯化后蛋白纯度只有65%，收率低得可怜。导师让我分析原因，我查文献发现可能是补料策略没调好，培养基里某些离子浓度波动大。后面我就跟着学怎么用在线监测系统，比如pH和溶氧，7月30号开始用分批补料法，第二次发酵蛋白浓度到了9.2mg/L，纯度也提到了80%。

技能方面，我熟练掌握了限制性内切酶识别图谱设计、TA克隆操作、琼脂糖凝胶电泳分析，还有蛋白质浓度测定和SDSPAGE纯度鉴定。导师还教了我怎么用MATLAB做动力学拟合，分析发酵过程数据。

实习成果就是参与完成了一个表达菌株的初步优化，蛋白产量提升了超过一倍。最大的收获是学会了怎么从实验数据里发现问题，比如看到OD值突然掉下去，能联想到是不是补料出问题了。

遇到的困难主要是发酵过程控制，特别是初期对培养基成分影响蛋白表达的理解太浅。我是通过大量查阅文献和请教师兄，才慢慢摸清门道。

对职业规划有启发，感觉做研发不光要懂技术，还得会分析数据，还得能扛得住实验失败。虽然这次成果还行，但离真正工业化生产还差得远，感觉要学的东西太多了。

实习单位培训机制其实一般，刚来的时候没给啥系统培训，很多东西都是看师兄做然后自己摸索。建议可以搞个新员工培训计划，至少把实验室安全规范、常用设备操作讲清楚。还有我觉得岗位匹配度上，可以给我接触更多下游纯化工艺的机会，我对蛋白纯化也挺感兴趣的。

三、总结与体会

这8周实习，感觉就像把过去两年半学的知识掰开了揉碎了，真真切切用在了实处。从6月5号进公司那天起，我就想着别白来，得把理论联系上实践。跟着师兄做CHO细胞表达体系优化，光实验记录就写了厚厚一本，涉及到的分子克隆、蛋白纯化流程，每一个细节都抠得很细。最让我印象深的是7月15号那段时间，为了提高重组蛋白产量，我们连续一周在实验室待到晚上十点，试了不下十种培养基配方和发酵条件，最后通过响应面分析法找到最优组合，蛋白浓度从最初的5.2mg/L提升到最终的18.7mg/L，这个数据到现在我还记得，感觉特别有成就感。这让我明白，做研发不是光靠想法就行，得有数据支撑，还得能扛得住失败，实验失败了再调整，这个过程挺磨人的，但也挺锻炼人。

这次经历对我职业规划影响挺大的。以前可能觉得当个研究员就是做点实验就行，现在明白要做一个合格的研究员，得懂工艺开发全流程，从菌株构建、发酵优化到下游纯化，还得会数据分析，甚至要了解一些设备原理。比如我之前对过程控制理解不深，通过这次实际操作，才真正体会到补料策略、pH溶氧控制对表达效率的影响有多大。这让我下定决心，接下来要更系统地学习蛋白纯化技术，可能考虑报个相关的线上课程，或者考个PMP证书，提升项目管理和流程控制能力。感觉从学生到职场人，心态真的不一样了，以前做实验可能马虎点也无所谓，现在得时刻想着成本、效率，责任感明显增强了。

看着自己参与优化的菌株产量大幅提升，再结合现在行业发展趋势，感觉生物制药领域机会挺多的，尤其是抗体药物和细胞治疗，对高产量、高纯度表达的需求特别大。现在很多公司都在搞智能化发酵、连续流技术，对研究人员的技能要求也越来越高。这次实习让我真切感受到了行业的脉搏，也看到了自己的不足，比如对自动化设备操作不熟，对法规要求了解太少。未来无论是继续深造还是直接工作，都得往这个方向努力，多学点新技术，比如细胞工程、生物信息学，争取以后能更好地适应行业变化。总而言之，这次实习收获巨大，不光是技能层面，更重要的是让我明确了努力方向，感觉未来可期。

致谢

感谢这次在生物技术生物制药公司的实习机会，让我学到了很多书本上没有的东西。特别感谢我的导师，在实习期