2026年微生物学基因工程考试试卷及答案

2026年微生物学基因工程考试试卷及答案考试时长：120分钟满分：100分班级：__________姓名：__________学号：__________得分：__________一、单选题（总共10题，每题2分，总分20分）1.下列哪种酶在基因工程中主要用于切割DNA并产生粘性末端？A.DNA聚合酶B.DNA连接酶C.限制性内切酶D.RNA聚合酶2.基因工程中，用于将外源DNA导入宿主细胞的常用方法是？A.电穿孔B.基因枪C.热激法D.以上都是3.下列哪种载体常用于原核生物中的基因克隆？A.质粒B.病毒载体C.噬菌体D.YAC载体4.PCR技术中，引物退火温度通常取决于？A.引物长度B.引物GC含量C.DNA模板浓度D.以上都是5.基因编辑技术CRISPR-Cas9的核心组件是？A.Cas9蛋白B.gRNAC.两者皆是D.两者皆非6.下列哪种分子标记技术常用于基因分型？A.RFLPB.RAPDC.AFLPD.以上都是7.基因工程中，用于检测目的基因是否表达的常用方法是？A.PCRB.WesternblotC.SouthernblotD.ELISA8.下列哪种生物是大肠杆菌常用的基因工程宿主？A.E.coliB.B.subtilisC.S.cerevisiaeD.H.pylori9.基因重组过程中，用于连接目的基因和载体的酶是？A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.转录酶D.多聚酶链反应酶10.基因工程中，用于筛选成功转化的细胞的常用方法是？A.抗生素抗性B.显微镜观察C.基因表达检测D.以上都是二、填空题（总共10题，每题2分，总分20分）1.限制性内切酶识别并切割DNA的特定序列称为__________。2.PCR技术的全称是__________。3.基因载体是指能够携带外源DNA进入宿主细胞的__________。4.CRISPR-Cas9系统中的gRNA负责识别靶向DNA序列的__________。5.基因克隆的目的是将外源DNA在宿主细胞中__________。6.基因编辑技术可以精确修改DNA序列，其基本原理是__________。7.基因分型技术常用于__________等研究。8.基因表达载体的核心组成包括启动子、__________和终止子。9.基因工程中，用于检测DNA片段大小的技术是__________。10.基因治疗是指通过__________等手段纠正或治疗遗传疾病。三、判断题（总共10题，每题2分，总分20分）1.限制性内切酶只能识别并切割DNA序列。（×）2.PCR技术需要依赖限制性内切酶。（×）3.质粒是原核生物中最常用的基因载体。（√）4.CRISPR-Cas9系统可以用于基因敲除和敲入。（√）5.基因分型技术只能用于人类基因组研究。（×）6.基因表达载体的构建需要考虑宿主细胞的转录翻译系统。（√）7.基因克隆和基因编辑是同一概念。（×）8.基因治疗目前仍处于临床研究阶段。（√）9.基因工程中，DNA连接酶的作用是切割DNA。（×）10.基因表达检测只能通过蛋白质水平进行。（×）四、简答题（总共3题，每题4分，总分12分）1.简述基因工程的基本步骤及其意义。2.比较PCR技术与传统分子杂交技术的区别。3.解释什么是基因编辑，并列举其两种主要应用场景。五、应用题（总共2题，每题9分，总分18分）1.某研究团队计划构建一个表达绿色荧光蛋白（GFP）的重组质粒，质粒载体为pUC18，宿主细胞为大肠杆菌。请简述实验步骤，并说明如何筛选成功转化的细胞。2.假设你正在设计一个基于CRISPR-Cas9的基因敲除实验，靶向基因序列为“ACGTACGT”，请设计gRNA序列，并说明如何验证基因敲除成功。【标准答案及解析】一、单选题答案1.C限制性内切酶2.D以上都是3.A质粒4.D以上都是5.C两者皆是6.D以上都是7.BWesternblot8.AE.coli9.BDNA连接酶10.D以上都是二、填空题答案1.识别序列2.聚合酶链式反应3.分子工具4.靶向识别5.复制和扩增6.修复和替换7.遗传多样性8.编码区9.电泳10.基因转移三、判断题答案1.×限制性内切酶也能切割RNA2.×PCR依赖DNA聚合酶3.√质粒在原核生物中广泛使用4.√CRISPR-Cas9可用于基因修饰5.×基因分型也用于动植物等6.√需考虑宿主转录系统7.×基因克隆是插入DNA，基因编辑是修改DNA8.√基因治疗仍需完善9.×DNA连接酶是连接DNA10.×可通过RNA或DNA水平检测四、简答题解析1.基因工程基本步骤：（1）获取目的基因：通过PCR、限制性内切酶等方法获取目标基因。（2）构建基因载体：将目的基因插入质粒等载体中。（3）转化宿主细胞：将载体导入大肠杆菌等宿主细胞。（4）筛选和鉴定：通过抗生素抗性、PCR等方法筛选成功转化细胞。意义：实现基因的定向改造和功能研究。2.PCR与传统分子杂交技术比较：PCR：体外扩增特定DNA片段，灵敏度高，需特异性引物。分子杂交：检测DNA/RNA杂交，需探针，灵敏度较低。3.基因编辑定义及应用：定义：通过CRISPR-Cas9等工具精确修改DNA序列。应用：基因治疗、疾病模型构建。五、应用题解析1.实验步骤：（1）PCR扩增GFP基因，加入限制性内切酶切割载体和目的基因。（2）连接GFP基因与载体，转化大肠杆菌。（3）涂布含氨苄青霉素的平板筛选阳性克隆。筛选方法：氨