细胞培养基成分分析技师（初级）考试试卷及答案

细胞培养基成分分析技师（初级）考试试卷及答案细胞培养基成分分析技师（初级）考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.细胞培养基最常用的碳源是______。2.哺乳动物细胞培养基常添加的血清是______血清。3.高压蒸汽灭菌的温度是______℃（15-30分钟）。4.细胞培养基pH通常维持在______左右（7.0-7.4）。5.细胞培养用水需经______处理（如超纯水）。6.谷氨酰胺在培养基中主要提供______。7.无血清培养基不含______。8.过滤除菌常用滤膜孔径是______μm。9.培养基常用缓冲体系是______（如HEPES）。10.植物细胞培养基凝固剂是______。答案：1.葡萄糖；2.胎牛；3.121；4.7.2；5.去离子/纯化；6.氮源；7.血清；8.0.22；9.碳酸氢钠-二氧化碳；10.琼脂二、单项选择题（每题2分，共20分）1.以下不是培养基基本成分的是？A.碳源B.氮源C.抗生素D.血清2.高压蒸汽灭菌不能去除的是？A.细菌B.芽孢C.内毒素D.真菌3.谷氨酰胺的主要作用是？A.调节pHB.供能C.合成蛋白质D.抗氧化4.属于合成培养基的是？A.MEMB.血清培养基C.组织提取液D.天然培养基5.过滤除菌滤膜孔径选？A.0.1μmB.0.22μmC.0.45μmD.1.0μm6.培养基pH下降的主要原因是？A.细胞产乳酸B.CO₂逸出C.水分蒸发D.血清分解7.无血清培养基的缺点是？A.成分明确B.避免污染C.价格高D.便于标准化8.必需生长因子是？A.胰岛素B.葡萄糖C.氯化钠D.水9.培养基灭菌后浑浊的原因是？A.灭菌不彻底B.滤膜破损C.水不纯D.成分沉淀10.蔗糖在植物培养基中不具有的作用是？A.碳源B.渗透压调节C.促进分化D.抗氧化答案：1.D；2.C；3.C；4.A；5.B；6.A；7.C；8.A；9.A；10.D三、多项选择题（每题2分，共20分）1.培养基基本营养成分包括？A.碳源B.氮源C.维生素D.无机盐2.培养基灭菌方法有？A.高压蒸汽灭菌B.过滤除菌C.干热灭菌D.紫外线照射3.血清的作用包括？A.提供生长因子B.调节渗透压C.结合毒素D.促进贴壁4.无血清培养基添加物有？A.生长因子B.激素C.载体蛋白D.抗生素5.影响培养基pH的因素有？A.细胞代谢B.CO₂浓度C.温度D.培养基成分6.合成培养基包括？A.RPMI1640B.DMEMC.MEMD.天然培养基7.添加抗生素的目的是？A.预防细菌污染B.预防真菌污染C.杀灭细菌D.杀灭真菌8.常用缓冲体系有？A.碳酸氢钠-CO₂B.HEPESC.TrisD.磷酸缓冲液9.植物培养基成分包括？A.大量元素B.微量元素C.植物激素D.碳源10.培养基质量控制指标有？A.无菌性B.pH值C.渗透压D.细胞生长率答案：1.ABCD；2.AB；3.ACD；4.ABCD；5.ABCD；6.ABC；7.ABCD；8.AB；9.ABCD；10.ABCD四、判断题（每题2分，共20分）1.所有培养基必须加血清。（×）2.灭菌温度越高效果越好。（×）3.谷氨酰胺需新鲜添加。（√）4.0.22μm滤膜可去除所有细菌真菌。（√）5.培养基渗透压应与细胞内液相近。（√）6.无血清培养基成分更明确。（√）7.灭菌后培养基需立即使用。（×）8.维生素是非必需成分。（×）9.植物培养基用琼脂凝固。（√）10.抗生素可完全避免污染。（×）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述培养基中碳源的作用及常用碳源。答案：碳源是细胞能量主要来源，参与合成碳水化合物、脂肪、蛋白质等。常用碳源：哺乳动物细胞用葡萄糖（代谢产乳酸）；植物细胞用蔗糖（供能+调节渗透压）；部分细胞可利用半乳糖、果糖。需控制浓度避免pH波动。2.血清在培养基中的主要作用？答案：提供生长因子（胰岛素、EGF等）、激素、载体蛋白（结合维生素/微量元素）；促进细胞贴壁（黏附因子）；结合代谢毒素减轻毒性；调节渗透压/pH。但成分复杂易污染，无血清培养基可替代。3.培养基过滤除菌的操作要点？答案：①选0.22μm滤膜；②滤器高压灭菌；③超净台无菌操作；④控制压力避免滤膜破损；⑤过滤后取样培养验证无菌；⑥避免反复过滤减少成分损失。4.无血清培养基的优缺点？答案：优点：成分明确，无血清污染（病毒/支原体），实验重复性好，可针对性加生长因子。缺点：成本高，部分细胞需优化配方，贴壁性下降需加黏附因子。六、讨论题（每题5分，共10分）1.如何判断培养基污染？预防措施有哪些？答案：判断：①肉眼：浑浊、菌膜/沉淀；②镜检：细菌（黑点）、真菌（丝状/酵母）、支原体（需染色）；③细胞形态：变形、脱落、死亡。预防：①彻底灭菌（高压/过滤）；②超净台无菌操作；③加抗生素（青霉素+链霉素）；④定期检测环境；⑤用无菌耗材避免交叉污染。2.培养基pH异常的原因及解决方法？答案：原因：①过低