实验室生物安全考试卷附答案

实验室生物安全考试卷附答案一、单项选择题（每题2分，共30分）1.在BSL-2实验室中，下列哪项操作必须在生物安全柜（BSC）内完成？A.离心含菌液的EP管B.对培养皿进行火焰灭菌C.打开含活菌的试管盖进行涂布D.用移液器将菌液加入96孔板答案：C解析：打开含活菌试管盖时易产生气溶胶，BSL-2要求此类操作在BSC内完成。A项若使用密封转子可不在BSC内；B项火焰灭菌在开放台面即可；D项若菌液量<1mL且动作轻柔可不在BSC内。2.实验室常用消毒剂中，对芽孢作用最强的是A.70%乙醇B.5%次氯酸钠C.0.1%新洁尔灭D.3%过氧化氢答案：B解析：5%次氯酸钠（含有效氯约5000ppm）可杀灭芽孢，其余选项对芽孢几乎无效。3.关于HEPA过滤器，下列说法正确的是A.对0.3μm颗粒的过滤效率≥99.97%B.可重复清洗后再次使用C.压力降低时过滤效率升高D.主要用于过滤CO₂答案：A解析：HEPA对最易穿透粒径（MPPS，0.1–0.3μm）的效率≥99.97%，不可清洗，压降升高效率下降，与CO₂无关。4.实验室发生少量感染性液体溅洒，第一步应A.立即用纸巾覆盖并喷洒消毒剂B.报告安全员C.撤离现场D.用镊子夹起碎玻璃答案：A解析：立即覆盖可防止气溶胶扩散，随后再报告、处置。5.下列哪项不是BSL-3实验室的必备设施？A.双门互锁入口B.定向气流C.室内负压≥-12.5PaD.紫外灯照明答案：D解析：紫外灯为可选，非强制。6.实验人员被锐器刺伤，最优先的处置是A.挤出伤口血液并用流水冲洗B.立即填写事故报告C.口服抗生素D.包扎伤口答案：A解析：立即挤血+冲洗可降低感染概率，其余为后续步骤。7.关于生物安全柜分类，错误的是A.ⅡA2型柜内70%空气循环B.Ⅲ型柜为全密闭、手套操作C.Ⅰ型柜保护样品不保护操作者D.ⅡB2型柜内无循环，全排答案：C解析：Ⅰ型柜保护操作者但不保护样品。8.高压灭菌常用“121℃，15min”参数，其杀灭指标是A.枯草芽孢杆菌芽孢降低10⁶倍B.大肠杆菌降低10³倍C.金黄色葡萄球菌降低10²倍D.嗜热脂肪土芽孢杆菌芽孢降低10⁶倍答案：D解析：嗜热脂肪土芽孢杆菌（Geobacillusstearothermophilus）为生物指示剂。9.实验室冰箱内发现未标记的菌株，应A.立即高压灭菌丢弃B.拍照后上传社交媒体C.暂存-80℃等待责任人认领D.按“未知风险”处置并上报答案：D解析：未知样本需按最高潜在风险处理并记录。10.关于实验室门禁系统，正确的是A.门禁卡可转借给合作学生B.门禁日志保存至少3年C.停电时自动锁死D.无需与消防联动答案：B解析：法规要求日志保存3年，其余均错误。11.实验动物中心屏障环境要求换气次数为A.5–8次/hB.10–12次/hC.15–20次/hD.25–30次/h答案：C解析：国标GB14925规定屏障系统15–20次/h。12.下列哪项属于“生物安全二级”管理范畴？A.转基因水稻B.乙肝病毒培养C.大肠杆菌K12D.枯草芽孢杆菌野生株答案：B解析：乙肝病毒为二类病原，需BSL-2。13.实验室废弃物标签应包含A.产生科室、日期、类别、责任人B.仅写“生物危害”C.用铅笔书写便于修改D.无需英文标注答案：A解析：标签四要素为科室、日期、类别、责任人。14.关于“气溶胶”，错误的是A.粒径<100μm可悬浮B.离心是产生气溶胶的常见操作C.口罩可100%拦截D.湿度升高可降低稳定性答案：C解析：口罩过滤效率非100%，N95约95%。15.实验人员离开BSL-3前，应A.先脱内层手套再淋浴B.先淋浴再脱防护服C.同时脱鞋和口罩D.在缓冲间喝口水答案：A解析：标准流程：脱外层手套→脱防护服→脱内层手套→淋浴→换洁净衣。二、多项选择题（每题3分，共30分，每题至少2个正确答案，多选少选均不得分）16.以下哪些属于“实验室获得性感染”常见途径？A.口吸移液B.锐器伤C.气溶胶吸入D.食入污染食物E.蚊虫叮咬答案：ABCD解析：蚊虫叮咬在实验室内极少见。17.关于生物安全柜使用，正确的是A.操作前紫外灯照射30minB.双臂垂直快速伸入C.柜内物品摆放呈“清洁→污染”流向D.操作后风机继续运行5minE.使用含氯消毒剂擦拭后无需中和答案：CD解析：紫外照射仅需15min；双臂应缓慢；含氯需中和以防腐蚀。18.高压灭菌失败的可能原因A.装载过满B.冷空气未排尽C.使用塑料离心管未开盖D.生物指示剂放置位置错误E.灭菌包太大答案：ABDE解析：塑料管未开盖不影响灭菌效果，但影响干燥。19.实验室应急物资应包含A.急救箱B.消毒剂C.吸附棉D.手电筒E.巧克力答案：ABCD解析：巧克力非必备。20.关于“化学品与生物因子协同危害”，正确的是A.戊二醛可增强核酸病毒稳定性B.甲醛与病毒蛋白交联降低感染性C.乙醇与次氯酸钠混用产生氯仿D.紫外线照射后需防臭氧E.叠氮钠可抑制细菌但易爆答案：BDE解析：戊二醛灭活病毒；乙醇+次氯酸钠不产生氯仿。21.实验动物伦理审查需包含A.动物种类与数量B.麻醉镇痛方案C.替代方案说明D.实验结束后安乐死方法E.动物购买发票答案：ABCD解析：发票无需在伦理报告内。22.以下哪些操作需在BSL-3实验室进行？A.培养SARS-CoV-2B.分离结核分枝杆菌C.稀释鼠疫耶尔森菌D.灭活HIV制备抗原E.质粒转化大肠杆菌答案：ABC解析：灭活后操作可降级；大肠杆菌转化在BSL-1。23.实验室生物安全培训应涵盖A.病原微生物分类B.个人防护装备穿脱C.意外事故报告流程D.消防逃生E.仪器校准答案：ABCD解析：仪器校准属技术非安全培训。24.关于“实验室分级”，正确的是A.ABSL-2对应动物BSL-2B.BSL-2可处理三类病原C.BSL-1无需门禁D.BSL-4需生命支持系统E.BSL-3必须双扉高压锅答案：ACDE解析：BSL-2处理二类病原，三类可降级。25.实验人员健康体检应包含A.结核菌素试验B.乙肝抗体滴度C.血压D.孕检（自愿）E.HIV抗体（强制）答案：ABD解析：血压非强制；HIV抗体自愿。三、判断题（每题1分，共10分，正确打“√”，错误打“×”）26.75%乙醇对诺如病毒灭活效果差。√27.实验室可用漂白粉直接处理含汞废液。×28.Ⅱ级生物安全柜可用于放射性核素操作。×29.实验动物安乐死优先采用CO₂窒息法。√30.实验室门禁卡丢失应立即挂失。√31.高压灭菌物品可叠压至柜顶。×32.实验人员可穿短裤进入BSL-2实验室。×33.实验室应每年至少进行一次泄漏演练。√34.紫外线灯可替代HEPA过滤器。×35.实验记录本可带出手套区。√四、填空题（每空2分，共20分）36.世界卫生组织将实验室生物安全分为____级，最高级为____级。答案：四；四37.高压灭菌的F₀值公式为F₀=∫10^(T-121.1)/zdt，其中z通常取____℃。答案：1038.生物安全柜ⅡA2型排风____%循环，____%外排。答案：70；3039.实验室常用“含氯消毒剂”有效氯浓度为____mg/L时，10min可灭活乙肝病毒。答案：100040.实验动物中心屏障环境压差应≥____Pa。答案：1041.我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》自____年施行。答案：200442.实验室锐器盒装载不得超过____。答案：3/443.生物安全柜高效过滤器对0.3μm颗粒的穿透率≤____%。答案：0.0344.实验室事故报告时限为____小时。答案：245.实验人员乙肝疫苗接种后抗体滴度<____mIU/mL需补种。答案：10五、简答题（每题10分，共30分）46.简述BSL-2实验室进入流程及注意事项。答案：1)培训合格并授权；2)更换个人衣物，穿防护服，戴一次性帽子、口罩、双层手套；3)检查生物安全柜状态（风速、紫外记录）；4)物品经表面消毒后传入；5)操作前开启风机5min；6)操作遵循“清洁→污染”流向；7)退出时在缓冲间脱外层手套、防护服并高压灭菌，脱内层手套，洗手；8)记录离开时间。注意事项：禁止口吸移液；锐器盒就近使用；发生溅洒立即消毒并报告；每周检查负压及灭菌器。47.实验室发生200mL含HBV血液溅洒，请写出完整处置流程。答案：1)立即疏散无关人员，关闭空调；2)穿戴双层手套、防护服、护目镜；3)用吸附棉覆盖溅洒区，喷洒1%含氯消毒剂，作用30min；4)从外向内将污染物收集于生物危害袋；5)再次用5000ppm含氯消毒擦拭2次；6)锐器单独收集；7)所有废物高压灭菌121℃30min；8)填写事故报告，2h内上报；9)暴露人员立即挤血、冲洗、消毒，评估抗体状态，必要时注射HBIG+疫苗；10)48h后采样环境，验证消毒效果。48.解释“气溶胶”在实验室感染中的意义，并给出三种降低气溶胶产生的技术措施。答案：气溶胶指悬浮于气体中粒径<100μm的固体或液体颗粒，可含活菌/病毒，吸入后导致感染。降低措施：1)离心使用密封转子或安全杯；2)涡旋震荡时使用紧闭锁盖并在安全柜内操作；3)移液改用带滤芯吸头，禁止快速吹打；4)超声波破碎时加密封罩；5)真空管路上装HEPA与液体收集瓶。六、计算题（每题10分，共20分）49.某BSL-3实验室尺寸为6m×4m×3m，要求负压-25Pa，漏风量测试采用示踪气体法，测得SF₆浓度衰减方程为C(t)=C₀e^(-0.23t)（t单位：min）。求换气次数ACH，并判断是否满足≥12次/h标准。答案：由衰减方程λ=0.23min⁻¹=13.8h⁻¹，ACH=λ×60/60=13.8次/h>12次/h，满足要求。50.高压灭菌验证中，将10⁶CFU/片的嗜热脂肪土芽孢杆菌生物指示剂置于最大装载中心，灭菌后培养0/10片阳性。若要求达到12-log杀灭，问理论上是否合格？给出计算过程。答案：初始菌量N₀=10⁶CFU/片，杀灭K=log₁₀(N₀/N)=6-log，12-log需N≤10⁻⁶CFU/片。实验0/10阳性即未检出，检出限<1CFU/片，故K>6-log，但未验证12-log。需增加生物指示剂数量至10⁷CFU/片或采用更耐热菌株重新验证。当前结果仅证明≥6-log，不足以直接推断12-log，需补充实验。七、案例分析题（每题20分，共20分）51.某高校研究生在BSL-2实验室进行沙门氏菌培养，因离心机转子密封圈老化，离心过程中管破裂，未察觉。实验结束后发现离心机内壁有菌液痕迹，该生仅用75%乙醇擦拭后离开。当晚出现发热、腹泻，入院确诊为伤寒。请分析该事件暴露出的生物安全管理缺陷，并提出整改措施。答案：暴露缺陷：1)设备维护缺失，未定期检查密封圈；2)离心操作未使用安全杯；3)未在生物安全柜内打开离心机盖；4)消毒措施不当，乙醇对沙门氏菌效果差且无法杀灭可能形成的芽孢；5)未立即报告并处置；6)人员未接种伤寒疫苗；7)培训不到位，缺乏“离心管破裂”应急预案。整改：a)建立月度设备巡检制度，更换密封圈；b)离心含菌液必须使用密封转子或安全杯；c)离心后静置5min，在BSC内开盖；d)采用5000ppm含氯消毒30min再擦拭；e)立即报告并填写事故记录；f)对高风险人员评估疫苗接种；g)每半年进行一次“离心管破裂”演练；h)将事件通报全校，纳入年度考核。答案与解析（合并附后，无单独标题）1C2B3A4A5D6A7C8D9D10B11C12B