DB45∕T 1651-2017 珠母贝人工繁殖技术规范

DB45/T1651—2017珠母贝人工繁殖技术规范TechnnicalspecificationsforartificialpropagationofPinctada广西壮族自治区质量技术监督局发布I II 12规范性引用文件 13术语和定义 14繁殖场海区环境 1 16催产与人工授精 27幼虫筛选与孵化 2 幼虫培育 前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由北海市质量技术监督局提出。本标准由广西珍珠及珍珠制品标准化技术委员会技术归口。本标准起草单位：国家珍珠及珍珠制品质量监督检验中心、广东海洋大学。本标准主要起草人：廖斌、童银洪、关安春、阮然、刘永、苏珠芳、陈虹才、邓晶晶、梁耀娟、沈子洋。1珠母贝人工繁殖技术规范本标准规定了珠母贝（Pinctadamargaritifera（Linne人工繁殖的环境条件、亲贝选择、催产与人工授精、幼虫筛选与孵化、幼虫培育、采苗与收苗技术。本标准适用于广西境内珠母贝的人工繁殖。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1在珠母贝胚胎发育的沉降期内，去掉上层海水以降低劣质胚体比例和减少水体中多余精子、亲贝排泄物等杂质，达到净化水质、保留优质胚体的过程。3.2幼虫筛选embryoselection在珠母贝胚胎发育至担轮幼虫期，收集和利用上浮的优质幼虫，淘汰中下层劣质幼虫，以降低劣质幼虫比例的过程。4繁殖场海区环境应选择在潮流畅通、底质为沙或沙泥、没有污染的海区；盐度25‰～35‰；pH值8.0～8.5亲贝选择亲贝选择如下：——珠母贝亲体为3龄～5龄天然贝；2——贝壳外观完整，边缘生长线明显，体色黑褐色，外缘鳞片粗壮、完整；——贝壳内侧边缘珍珠质呈深黑色或孔雀绿色；——软体部饱满、富有弹性。6催产与人工授精6.1催产6.1.1温度刺激法min，然后移入23℃~26℃海水中。按4：1～5：1的雌雄比将亲贝移入产卵池或孵化池中待排放精卵。6.1.2温度结合化学药物刺激法然后移入23℃~26℃的砂滤海水。按4：1～5：1的雌雄比将亲贝移入产卵池或孵化池中待排放精卵。6.1.3阴干结合藻液、温度刺激法把亲贝阴干1h～2h，再置于阳光下暴晒20min，然后置于10万cell～20万cell的扁藻或金藻液中滤食20min～30min，按4：1～5：1的雌雄比将亲贝移入产卵池或孵化池中待排放精卵。6.2人工授精6.2.1受精环境6.2.2精卵成熟度检查去除亲贝右壳、外套膜和鳃使生殖腺裸露，用消毒脱脂棉擦去体液和海水。用吸管刺入生殖腺吸取精卵，置于3×10-5～5×10-5的氨海水中，在显微镜下观察：精子活动活泼则为成熟精子；成熟的卵子呈淡黄色，圆形或卵圆形，卵膜光滑，卵核大而明显，位于细胞中央，卵黄颗粒分布均匀，色素较浓，卵径50μ6.2.3授精在100mL～200mL烧杯中装好砂滤海水，用吸管分别吸取雌、雄亲贝的卵子、精子于烧杯中。在受精缸或水族箱中配好6×10-5～8×10-5的氨海水。精、卵用筛绢过滤，先倒入卵子，过5min～10子，并充分搅拌混合。光学显微镜下观察卵子受精情况，受精率在90%以上则用于人工繁殖，受精率在90%以下则弃之不用。7幼虫筛选与孵化7.1洗卵7.2幼虫筛选3胚胎发育5h后进入担轮幼虫期，每隔1小时收集一次上浮的优质幼虫并入孵化池，共收集3次。7.3孵化孵化池中担轮幼虫密度控制在50个/mL～100个/mL之间。暂养12h后，胚体发育至面盘幼虫。8幼虫培育8.1幼虫投放将幼虫移入加有1米左右水深砂滤海水的育苗池，使幼虫密度为2个/mL～3个/mL。育苗池水温23℃~26℃,盐度25‰～33‰。8.2水质管理育苗池幼虫下池后的3d～4d内，每天添加一部分新鲜砂滤海水，第三天或第四天加满，然后开始换水。换水量从初期的1/5到后期的1/3～1/2，换水时温差不能超过1℃。前期换水用孔径64μm的尼龙筛绢再过滤。8.3投饵8.3.1饵料种类面盘幼虫期饵料种类：光合细菌、干酵母、湛江等鞭金藻、球等鞭金藻、绿色巴夫藻、亚心形扁藻。壳顶期幼虫、眼点期幼虫饵料种类：在面盘幼虫期饵料种类中增加角毛藻。附着幼苗饵料种类：光合细菌、干酵母、湛江等鞭金藻、球等鞭金藻、绿色巴夫藻、亚心形扁藻、角毛藻。8.3.2投饵量不同发育阶段的投饵量见表1。表1珠母贝幼体不同发育阶段的饵料量参考表8.4充气用空气压缩机或鱼泵连续充气，溶解氧保持4.30mg/L以上。49采苗9.1附苗器种类9.1.1塑料薄板9.1.2胶丝网布将材质为聚氯乙烯的40目胶丝网布裁剪成110cm×25cm，一端中间绑吊绳，另一端两角绑坠