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文档简介
生物工程生物科技企业研发实习报告一、摘要
2023年7月1日至2023年8月31日,我在一家生物科技企业研发部门担任助理工程师,参与重组蛋白表达优化项目。通过8周实践,我协助团队完成3株工程菌种构建,其中1株表达效率提升42%,达到实验室标准;独立完成5组发酵条件优化实验,使重组蛋白纯化回收率从58%提高至71%;运用分子克隆技术构建了含His标签的融合蛋白表达载体,并验证其表达活性。工作涉及基因编辑、蛋白纯化、酶活性测定等实验,熟练应用EcoRI、BamHI限制性内切酶进行基因亚克隆,掌握SDSPAGE和WesternBlotting技术进行蛋白鉴定。通过数据统计分析,我发现温度调控对表达效率影响显著,提出优化方案被团队采纳。此次实习深化了对生物工程流程的理解,掌握了标准化实验操作与结果验证方法,为后续科研工作积累了可复用的技术路径。
二、实习内容及过程
1.实习目的
我这次实习主要是想看看重组蛋白表达这事儿在实际里是怎么操作的,顺便把学校里学的分子克隆、发酵这些技能用起来,感受下企业研发部门的真实节奏。
2.实习单位简介
我去的这家公司主要做单克隆抗体的研发和产业化,实验室有蛋白表达、纯化、表征这些基础平台,也有挺多自动化设备,比如低温离心机、分光光度计这些。
3.实习内容与过程
我跟着一个项目组做重组蛋白的优化。7月5号开始,第一个任务是帮忙把三个基因片段用EcoRI和BamHI连接起来,构建表达载体。那时候手头有个载体骨架是Pichiapastoris系统用的,需要把这个基因克隆进去,然后转染到酵母里。用了两个星期,把三个片段都拼装好,送测序验证的时候,发现其中一个片段插错了,可能是酶切的时候反应时间太长了,最后花了三天重新跑胶回收,把正确的片段克隆出来。
8月10号左右,开始搞发酵优化。之前实验室有个工程菌表达量不太理想,我接手了温度、诱导剂浓度、培养基成分这些条件的调整。天天盯着摇床,看菌液OD值变化,最后发现把温度从30℃降到28℃能显著提高蛋白表达量,大概是多了快40%的表达量,SDSPAGE跑出来条带明显粗壮了。
4.实习成果与收获
主要成果就是参与完成了三个工程菌的构建,其中一株菌表达量达标了,纯化后的蛋白纯度能达到92%。我还独立优化了发酵条件,蛋白回收率从原来的58%提到71%。最大的收获是学会了怎么处理实验数据,比如用Excel做线性回归分析温度对表达的影响,还有怎么跟导师沟通实验问题,避免走弯路。
遇到的困难是刚开始用限制性内切酶的时候,总有些克隆失败,后来发现是酶的储存条件没注意,有些酶放冷冻了,有些放4℃,结果活性打折。还有一次摇瓶发酵忘了换气,导致菌落长死了,这让我意识到无菌操作不能马虎。通过这些事,我学会了看酶的说明书,还有怎么规划实验流程避免遗漏。
这段经历让我觉得,做研发不能光靠书本知识,还得会动手,会分析,会跟人沟通。虽然只是做了些基础工作,但感觉挺有价值的,至少知道以后想搞这个,得把实验细节抠扎实。
5.问题与建议
公司这边我感觉管理上有点乱,比如实验记录有时候没人审核,有些试剂随便放,有时候找不到合适的浓度,建议可以搞个电子台账,试剂出入库什么的系统化管理。培训机制也一般,没怎么讲企业标准操作规程,建议可以搞些入职培训,特别是SOP规范这块。我所在的岗位主要是做执行,跟设计思路关联不大,要是能有参与项目讨论的机会就好了,这样能学到更多。
三、总结与体会
1.实习价值闭环
这8周实习像把书上的理论跟实际操作缝合起来了。7月1号刚去的时候,对Pichiapastoris发酵条件怎么调心里没底,看了不少文献,但真到自己跑实验,还是遇到各种小麻烦。比如8月5号那次,工程菌诱导表达后蛋白纯化效果不好,WesternBlotting结果条带很弥散,最后发现是洗脱缓冲液pH调得不对,跟说明书推荐值差了0.5个单位。通过这种“犯错分析解决”的过程,我对重组蛋白表达的整个链条理解才真正落地。原来在学校做实验可能跑个胶看结果就结束了,企业这边要考虑成本、效率、纯度,每一步都要有数据支撑。这趟经历让我明白,知识只有用起来,跟实际场景对上号,才算真正掌握了。
2.职业规划联结
这段经历也让我更清楚自己想干嘛。之前想浑浑噩噩先找个工作,现在觉得应该往单抗开发或者工艺优化方向发展。8月20号跟着师兄去车间看中试罐的时候,发现工业化生产比实验室复杂太多了,需要考虑换床体积、流加策略这些,这让我觉得很有意思。我打算下学期把《生物工程设备》这门课补上,顺便去考个GMP证书,感觉这样简历会好看点。实习最后那天导师跟我说“你小子动手能力还可以”,虽然有点谦虚,但听到这话心里挺踏实的。
3.行业趋势展望
感觉生物制药现在特别卷,但卷的方向还挺有意思的。9月初我去参加了个行业展会,看到好多人研究AI辅助分子设计,还有基于干细胞的技术,这让我觉得学校里学的传统方法可能很快要被替代了。我们组那个酵母表达项目,后来老板让用CRISPR优化启动子,虽然我没参与,但感觉这是大趋势。我回来后偷偷报了个Python生物信息课,想学学怎么处理测序数据,不然以后真要被淘汰了。
4.心态转变
最明显的改变是责任心和抗压能力。刚开始跑实验的时候,8月15号连续三天摇床忘了看,结果菌液长满了泡沫,最后差点整批实验作废,那顿挨骂让我记到现在。现在做实验前都会列好清单,什么时间点该干嘛,导师布置的任务也尽量当天完成。虽然还是有点怂,但至少知道出问题了要怎么补救。这种心态转变可能比会了什么新技能更重要吧。
5.未来行动
下学期打算把实习里用的那些实验记录整理成SOP模板,学校老师也夸我这点做得好。另外那个发酵优化项目,我打算把数据整理成论文投给校刊,虽然知道发表不了但能梳理思路。导师说下个项目可以考虑让我参与设计阶段,如果真的有机会,我要把之前看的那些文献再翻出来看看,别到时候又得现学。
四、致谢
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