环境监测实验 课件 实验六 纳氏试剂分光光度法测定水中的氨氮

实验六

纳氏试剂分光光度法测定水中的氨氮《环境监测实验》教学课件指导老师：20xx.xx.xx实验背景与意义1实验目的2实验原理3实验仪器、试剂和材料4实验步骤5数据记录与处理6注意事项7思考题8目录实验背景与意义了解氨氮的定义、影响及测定方法01水中以游离氨（NH₃）和铵离子（NH₄⁺）形式存在。氨氮的存在形式02是水体主要耗氧污染物之一，消耗水中溶解氧。水体中的耗氧污染物03氨氮过高会使水生生物中毒，影响其生长和繁殖。对水生生物的影响04导致水体富营养化，破坏水质生态平衡。对水质的影响明确氨氮的存在形式和对水体的作用氨氮定义与影响掌握测定氨氮的国家标准和此方法的优势依据HJ535-2009《水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法》。测定标准1适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水。适用范围2最低检出浓度为0.025mg/L，灵敏度高。最低检出浓度3操作简单方便，易于掌握和推广。操作特点4测定标准与方法特点实验目的明确实验要达成的具体目标理解测定氨氮的原理和操作流程1.测定原理掌握氨氮在碱性条件下与纳氏试剂反应原理。2.操作方法学会使用分光光度计进行定量分析的方法。3.反应条件明确反应需在特定碱性环境和波长下进行。4.反应产物反应生成黄棕色络合物，有特定吸收峰。掌握原理与方法熟练运用分光光度法进行数据测定01熟练使用紫外-可见光分光光度计。仪器使用02学会根据吸光度数据计算氨氮浓度。数据分析03掌握比色皿的使用和比色操作要点。比色操作04依据标准曲线和吸光度准确计算浓度。结果计算学会定量分析知晓水样处理和实验过程中的要点01样品预处理方法了解过滤、蒸馏等预处理方式去除干扰。02实验注意事项明确实验过程中需注意的安全和操作事项。干扰因素知晓悬浮物、余氯等会对测定产生干扰。0304干扰消除方法掌握加入试剂消除干扰的方法，如加酒石酸钾钠。了解预处理与注意事项实验原理深入理解实验的反应过程和干扰因素详细阐述氨氮与纳氏试剂的反应情况反应条件在碱性条件下进行反应，保证反应充分。01反应产物生成黄棕色络合物，是测定关键。02最大吸收峰络合物在波长420nm处有最大吸收峰。03吸光度与浓度关系吸光度与氨氮浓度成正比，可定量分析。04反应过程分析干扰因素并提出解决办法悬浮物、余氯、金属离子、硫化物和有机物会干扰。干扰因素1加入酒石酸钾钠溶液消除钙镁离子干扰。钙镁离子干扰消除2加入硫代硫酸钠溶液去除余氯。余氯干扰消除3可根据具体情况选择合适的消除方法。其他干扰消除4干扰与消除实验仪器、试剂和材料熟悉实验所需的各种工具和物质了解实验用到的主要仪器设备01用于测定溶液的吸光度，是实验核心仪器。分光光度计02光程20mm，用于盛放溶液进行比色。比色皿03精度0.0001g，用于准确称量试剂。天平04对浑浊或有色水样进行蒸馏预处理。蒸馏装置05实验室常用，如容量瓶、移液管等。玻璃耗材实验仪器明确实验所需的各种试剂和样品纳氏试剂与氨氮反应生成络合物，是关键试剂。1酒石酸钾钠溶液消除钙镁等金属离子干扰。2氨氮标准储备液浓度为1000mg/L，用于配制标准溶液。3氨氮标准工作液浓度为20mg/L，用于绘制标准曲线。4无氨水作为溶剂和空白对照使用。5含氨氮废水工业废水或实验室模拟废水，待测样品。6试剂与材料实验步骤按照步骤完成实验的各项操作对水样进行初步处理去除干扰1过滤蒸馏处理若水样浑浊或有色，需进行过滤或蒸馏。2酒石酸钾钠加入取50mL水样加1mL酒石酸钾钠溶液。3余氯去除检验若有余氯，加硫代硫酸钠，用试纸检验。样品预处理绘制氨氮浓度与吸光度的关系曲线标准液体积加入取6个容量瓶，分别加入不同体积标准液。01定容显色用无氨水定容，加试剂显色静置10min。02吸光度测定在420nm波长处测定各标准液吸光度。03标准曲线绘制测定样品吸光度并做空白对照取预处理水样加试剂显色测吸光度，平行5次。样品测定操作用无氨水代替水样，按步骤测空白吸光度。空白试验操作样品测定与空白试验数据记录与处理准确记录数据并进行处理分析记录标准曲线各点的吸光度数据01记录项目记录氨氮标准液体积、浓度和吸光度。02数据表格根据实验记录数据填写表3-11。03记录要点准确记录每个数据，保证实验可追溯性。标准曲线吸光度记录绘制氨氮浓度与吸光度的标准曲线1绘图依据根据表3-11数据绘制标准曲线。2回归方程写出标准曲线的回归方程。3相关系数计算出R²，反映曲线拟合程度。标准曲线绘制记录并处理废水水样的测定数据1测定结果记录记录样品编号、吸光度和测定浓度。2平均值计算计算5个平行样的氨氮浓度平均值。3相对误差计算计算测定值与理论值的相对误差。4相对标准偏差计算计算测定结果的相对标准偏差。废水水样测定结果注意事项强调实验过程中需要注意的关键点纳氏试剂毒性纳氏试剂有毒，操作需佩戴防护用具。01防护用品使用佩戴手套和口罩，避免直接接触试剂。02玻璃仪器清洗用无氨水清洗玻璃仪器，防止污染。03确保试剂使用和仪器处理的安全性试剂安全与仪器清洗01显色反应需在10～30min内完成测定。显色反应时间02避免颜色褪去影响吸光度测定。颜色变化注意03水样浓度高时，需适当稀释后再测定。浓度稀释要求保证显色反应顺利进行及浓度准确性显色反应与浓度稀释思考题通过思考加深对实验的理解明确酒石酸钾钠在实验中的作用消除钙镁等金属离子的干扰。酒石酸钾钠加入原因金属离子会与试剂反应，影响测定结果。金属离子干扰表现酒石酸钾钠作用分析钙镁离子干扰及解决办法钙镁离子与试剂反应，使测定结果不准确。钙镁离子干