《植物油脂中黄曲霉毒素B1的测定 胶体金快速定量法》征求意见稿

ICS

点击此处添加中国标准文献分类号

团体标准

T/CCOA—XXXX

植物油脂中黄曲霉毒素B1的测定

胶体金快速定量法

DeterminationofaflatoxinB1invegetablefatsandoils

Rapidquantitativemethodofcolloidalgoldtechnique

征求意见稿

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

中国粮油学会发布

T/CCOAXXXX—XXXX

植物油脂中黄曲霉毒素B1的测定胶体金快速定量法

1范围

本标准规定了胶体金快速定量法测定植物油脂中黄曲霉毒素B1含量的原理、试剂、仪器、试样制备、

操作步骤、结果表示和精密度等。

本标准适用于玉米油、花生油及成品油中黄曲霉毒素B1的测定。

方法定量范围为2μg/kg~60μg/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T5524动植物油脂扦样

3原理

试样中的黄曲霉毒素B1与试纸条中的胶体金微粒发生呈色反应，颜色深浅与试样中黄曲霉毒素B1含

量有关。用定量检测仪测定试纸条上检测线颜色深浅，根据颜色深浅和定量检测仪内置曲线自动计算出

试样中黄曲霉毒素B1含量。

4试剂

除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T6682中二级水的要求。

4.1稀释液：由胶体金检测条配套提供，或根据产品使用说明书配制；

4.2提取液：50%（体积分数）乙醇溶液；

5仪器

5.1天平：分度值0.01g。

5.2离心管：1.5ml及50ml聚苯乙烯离心管。

5.3涡旋振荡器。

5.4离心机：转速不低于3000r/min。

5.5微孔板（内含冻干金标记特异性单克隆黄曲霉毒素B1抗体）。

5.6胶体金快速定量试纸条。

5.7金属孵育器。

5.8移液器。

5.9定量检测仪。

1

T/CCOAXXXX—XXXX

6操作步骤

6.1扦样方法

按照GB/T5524规定的方法扦样。

6.2样品处理

准确称取1.00g试样至50ml离心管（5.2）中，加入5.0ml提取液（4.2），用涡旋振荡器（5.3）振

荡3min，再用离心机（3000r/min）（5.4）离心5min。取离心后下清液100μl于1.5ml离心管（5.2）

中，加入600μl稀释液（4.1），充分混匀待测。

6.3样品测定

6.3.1从原包装中取出试剂桶，打开后取出所需数目的微孔板（5.5）和试纸条（5.6）。将孵育器

（5.7）预热至40℃。

6.3.2使用移液器（5.8）吸取120μl待测溶液（6.2）于微孔中，缓慢抽吸且充分与微孔板（5.5）

中冻干金标记特异性单克隆黄曲霉毒素B1抗体混匀。将微孔板（5.5）放入孵育器（5.7）加热孔中，

盖上孵育器（5.7），孵育3min。

6.3.3取微孔中100μl混合液（6.3.2），注入至试纸条（5.6）的加样槽内，盖上孵育器（5.7），

反应10min。

6.3.4打开定量检测仪（5.9），进入操作界面后，把曲线卡放置在仪器黑色板块上方，在操作界面

上点击“读取NFC卡”或点击“升级”并下载最新曲线后，手动选择该批次号曲线后点击“加载曲线”。

6.3.5将试纸条（5.6）从孵育器（5.7）中取出，放置于定量检测仪（5.9）的卡套托盘（加样槽面

向使用者），把托盘推入检测仪后仪器会自动判读或手动点击“扫描”读取结果。

6.4结果表述

试样中黄曲霉毒素B1含量由定量检测仪自动计算并显示，单位为微克每千克（μg/kg）。

当样本中黄曲霉毒素B1含量低于2ppb时，结果会显示<2ppb；

当样本中黄曲霉毒素B1含量高于60ppb时，结果会显示>60ppb;

当样本中黄曲霉毒素B1含量在2ppb-60ppb时，结果会显示其对应的数值。

7.重复性

在同一实验室，由同一操作者使用相同仪器。按相同的测定方法，对同一被测试对象进行互相独立

测试获得的两次独立测试结果的绝对差值大于其算术平均值20%的情况不超过5%。

2

T/CCOAXXXX—XXXX

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由中国粮油学会提出。

本标准起草单位：丰益（上海）生物技术研发中心有限公司

本标准参与起草单位：国家粮食局科学研究院，益海嘉里金龙鱼粮油食品股份有限公司，CAMTECH

DIAGNOSTICS

本标准主要起草人：姜元荣曾阿娜薛雅琳王格平DenyHartono

I

T/CCOAXXXX—XXXX

植物油脂中黄曲霉毒素B1的测定胶体金快速定量法

1范围

本标准规定了胶体金快速定量法测定植物油脂中黄曲霉毒素B1含量的原理、试剂、仪器、试样制备、

操作步骤、结果表示和精密度等。

本标准适用于玉米油、花生油及成品油中黄曲霉毒素B1的测定。

方法定量范围为2μg/kg~60μg/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T5524动植物油脂扦样

3原理

试样中的黄曲霉毒素B1与试纸条中的胶体金微粒发生呈色反应，颜色深浅与试样中黄曲霉毒素B1含

量有关。用定量检测仪测定试纸条上检测线颜色深浅，根据颜色深浅和定量检测仪内置曲线自动计算出

试样中黄曲霉毒素B1含量。

4试剂

除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T6682中二级水的要求。

4.1稀释液：由胶体金检测条配套提供，或根据产品使用说明书配制；

4.2提取液：50%（体积分数）乙醇溶液；

5仪器

5.1天平：分度值0.01g。

5.2离心管：1.5ml及50ml聚苯乙烯离心管。

5.3涡旋振荡器。

5.4离心机：转速不低于3000r/min。

5.5微孔板（内含冻干金标记特异性单克隆黄曲霉毒素B1抗体）。

5.6胶体金快速定量试纸条。

5.7金属孵育器。

5.8移液器。

5.9定量检测仪。

1

T/CCOAXXXX—XXXX

6操作步骤

6.1扦样方法

按照GB/T5524规定的方法扦样。

6.2样品处理

准确称取1.00g试样至50ml离心管（5.2）中，加入5.0ml提取液（4.2），用涡旋振荡器（5.3）振

荡3min，再用离心机（3000r/min）（5.4）离心5min。取离心后下清液100μl于1.5ml离心管（5.2）

中，加入600μl稀释液（4.1），充分混匀待测。

6.3样品测定

6.3.1从原包装中取出试剂桶，打开后取出所需数目的微孔板（5.5）和试纸条（5.6）。将孵育器

（5.7）预热至40℃。

6.3.2使用移液器（5.8）吸取120μl待测溶液（6.2）于微孔中，缓慢抽吸且充分与微孔板（5.5）

中冻干金标记特异性单克隆黄曲霉毒素B1抗体混匀。将微孔板（5.5）放入孵育器（5.7）加热孔中，

盖上孵育器（5.7），孵育3min。

6.3.3取微孔中100μl混合液（6.3.2），注入至试纸条（5.6）的加样槽内，盖上孵育器（5.7），

反应10min。

6.3.4打开定量检测仪（5.9），进入操作界面后，把曲线卡放置在仪器黑色板块上方，在操作界面

上点击“读取NFC卡”或点击“升级”并下载最新曲线后，手动选择该批次号曲线后点击“加载曲线”。

6.3.5将试纸条（5.6）从孵育器（5.7）中取出，放置于定量检测仪（5.9）的卡套托盘（加样槽面

向使用者），把托盘推入检测仪后仪器会自动判读或手动点击“扫描”读取结果。

6.4结果表述

试样中黄曲霉毒素B1含量由定量检测仪自动计算并显示，单位为微克每千克（μg/kg）。

当样本中黄曲霉毒素B1含量低于2ppb时，结果会显示<2ppb；

当样本中黄曲霉毒素B1含量高于60ppb时，结果会显示>60ppb;

当样本中黄曲霉毒素B1含量在2ppb-60ppb时，结果会显示其对应的数值。

7.重复性