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实验七厌氧性细菌形态.染色性及培养特性

(anaerobicbacteria)录像:无芽胞厌氧菌的感染示教:破伤风梭菌及产气荚膜梭菌的形态.染色性及培养特性Nagler反应无芽胞厌氧菌的形态(脆弱类杆菌.消化链球菌)厌氧培养方法操作:产气荚膜梭菌致病性试验肠道致病菌粪便标本的分离与鉴定(续)血清学反应/sundae_meng厌氧菌G+有芽胞破伤风梭菌产气荚膜梭菌肉毒梭菌艰难梭菌无芽胞G+双歧杆菌消化链球菌G-脆弱类杆菌韦荣菌属/sundae_meng破伤风梭菌(C.tetani)革兰染色涂片:菌体细长,芽胞正圆,比菌体粗,位于菌体顶端,使细菌呈鼓槌状。破伤风梭菌电镜图形态/sundae_meng产气荚膜梭菌(C.perfringens)革兰染色涂片:菌体粗大,两端几乎平切。芽胞呈椭圆形,位于次极端,不大于菌体,体外很少形成芽胞。产气荚膜梭菌荚膜(体内易形成):/sundae_meng培养特性血平板庖肉培养基紫牛奶培养基破伤风梭菌37℃48h,薄膜状爬行生长物,边缘不齐,伴轻度β溶血肉汤混浊,肉渣部分被消化,呈灰白色无明显改变产气荚膜梭菌菌落平整,光滑,边缘齐。有双层溶血环:内层完全溶血(θ毒素引起),外层不完全溶血(α毒素引起)分解肉渣中糖类而产生大量气体。分解乳糖产酸,指示剂变黄,培养基凝固,产生大量气体,呈蜂窝状,将液面凡士林上推,甚至冲走管口棉筛。/sundae_mengClostridiumperfringensshows"stormyfermentation"oflitmusmilk.AcidturnsthepHindicatorlitmusfrombluetopink,acidandenzymescoagulatetheproteinsinthemilk,andgastearsthecurdsapart.

汹涌发酵:stormyfermentation/sundae_mengNagler反应产气荚膜梭菌产生卵磷脂酶(α毒素),在蛋黄琼脂平板上,卵磷脂酶分解蛋黄中的卵磷脂,生成的甘油二酯在菌落周围形成乳白色混浊圈。当加入相应抗毒素后,卵磷脂酶活性丧失,菌落周围不出现混浊圈。/sundae_meng产气荚膜梭菌致病性试验培养液注入小鼠腹腔→断颈处死→剖腹→肝脏印片→石炭酸复红负染染色涂片→自然干燥→染液→迅速水洗→印干→油镜检37℃5-8h/sundae_meng厌氧培养方法1.物理法:厌氧箱或厌氧缸。用物理方法将氧气吸走,充入氮气、二氧化碳、氢气。2.化学法:氢气+氧气水3生物法:厌氧菌与需氧菌一起放入密闭空间培养。钯/sundae_meng肠道致病菌粪便标本的分离与鉴定(续)血清学反应标本选择鉴别培养基(SS平

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