青海省西宁市2026届生物高二第二学期期末检测试题含解析

青海省西宁市2026届生物高二第二学期期末检测试题注意事项1．考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回．2．答题前，请务必将自己的姓名、准考证号用0．5毫米黑色墨水的签字笔填写在试卷及答题卡的规定位置．3．请认真核对监考员在答题卡上所粘贴的条形码上的姓名、准考证号与本人是否相符．4．作答选择题，必须用2B铅笔将答题卡上对应选项的方框涂满、涂黑；如需改动，请用橡皮擦干净后，再选涂其他答案．作答非选择题，必须用05毫米黑色墨水的签字笔在答题卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律无效．5．如需作图，须用2B铅笔绘、写清楚，线条、符号等须加黑、加粗．一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．某肽链由50个氨基酸组成,如果用肽酶把其分解成1个二肽、2个五肽、2个七肽、3个八肽,则这些短肽的氨基总数的最小值、肽键总数依次是()A．8、42 B．2、42 C．2、50 D．8、502．．孟德尔遗传规律不适于下列哪种生物（）A．人类 B．玉米 C．蓝藻 D．大豆3．下图表示生物体内两种重要化合物的化学组成关系，下列叙述中正确的是（）A．上图中大分子B呈双螺旋结构B．a的种类约20种，b的种类为8种C．a与a之间通过“-NH-COOH-”相连接，b与b之间通过磷酸二酯键相连接D．HIV的遗传信息储存在大分子B中4．2019年5月底，北京市强制执行垃圾分类回收政策，对于垃圾中的有机废弃物将按照“无废化生态社区”模式进行处理。下图为“无废化生态社区”中对有机废弃物进行处理的相关方案。相关叙述正确的是()A．“无废化生态社区”主要遵循的生态学原理是协调与平衡原理B．从资源化、无害化角度分析，途径②、③优于④C．有机肥料能为农作物提供营养物质和能量D．“无废化生态社区”模式提高了物质循环速率和能量传递效率5．线粒体是一种半自主性细胞器。研究表明，参与组成线粒体的蛋白质有上千种之多，但线粒体基因能编码的只有20种左右，这20种蛋白质在线粒体内合成。核基因编码的蛋白质运送至线粒体内部时，均依赖一段由氨基酸组成的相当于“火车头”的导肽，引导这些蛋白质分配到线粒体的不同部位行使其功能。下列相关分析错误的是（）A．线粒体对核遗传系统有很大的依赖性B．线粒体内存在着能生产蛋白质的机器C．线粒体蛋白质的加工由内质网和高尔基体完成D．线粒体蛋白质可存在于外膜、内膜和基质中6．下列关于植物细胞工程的叙述，错误的是（）A．电刺激可以诱导植物原生质体的融合或动物细胞的融合B．通过体细胞杂交技术培育杂种植株的过程不涉及染色体数目变异C．诱导离体胡萝卜韧皮部细胞形成幼苗的过程中没有出现基因重组D．用花粉离体培养获得的抗病植株，其细胞仍具有全能性二、综合题：本大题共4小题7．（9分）图一代表植物体内光合作用和呼吸作用的物质转化过程。图二代表在一定条件下，测量植物A和植物B的CO2的吸收量随光照强度的变化曲线。请据图回答以下问题：（1）图一中，⑥代表_______，[H]为___________（填“NADPH”或“NADH”）。（2）若将18O2给予密闭容器中的植物，元素18O______（能或不能）出现在植物呼吸作用产生的CO2中，若对此植物进行遮光处理，容器内的O2含量将逐渐下降并完全耗尽后ATP合成的场所是____________。植物根尖成熟区细胞能完成图一中a～h中的_______过程。（3）图二中a点时，植物B的叶肉细胞光合作用强度______（填“大于”、“小于”或“等于”）呼吸作用强度。当用光照强度为b时，对A、B植物均处理12小时，则A植物比B植物光合作用固定的CO2多___________(mg/m2)。（4）从生长状况相同的棉花叶片上剪出大小、部位相同的若干小圆叶片，平均分成若干份，抽去叶片细胞内的气体，然后置于不同浓度的NaHCO3溶液中，给予相同的一定强度光照，测量小圆叶片上浮至液面所需时间，记录结果绘成曲线如图三，请据此回答。①该实验的目的是：_______。②从图解分析，C点以后曲线上行，其原因应该是_______。8．（10分）Ml溶瘤病毒能选择性地感染并杀伤包括肝癌、黑色素瘤在内的多种体外培养的癌细胞，而对正常细胞无毒副作用，作用机理如下图所示，请据图回答下列问题：（1）癌细胞产生的根本原因是_____，体外培养时霱要配制合成培养基，通常还需加入___，保证细胞的生命活动。（2）由图甲可知：Ml溶瘤病毒选择性感染癌细胞的原因是____，癌细胞凋亡与____（细胞结构）密切相关。（3）癌细胞在有氧条件下葡萄糖的部分代谢过程如图乙所示，其中①〜⑤不同种酶，其中分布在细胞质基质中的酶有_____（填序号）。（4）已知癌细胞大量摄入葡萄糖用于细胞呼吸，但其有氧呼吸产生的ATP与正常细胞却大体相当据图乙可知癌细胞有氧条件下呼吸方式是_____，ATP没有大量增加的原因是代谢中产生大量的_____等物质。（5）最新研究发现，如果限制体内谷氨酰胺的含量，就可以使癌细胞无法正常吸收葡萄糖，从而抑制它的生长。与此相关叙述不正确的是__________。A．减少葡萄糖的摄入可使癌细胞正常生长B．糖类是包括癌细胞在内的所有细胞的直接能源物质C．切断肿瘤细胞的“糖路”，可达到饿死肿瘤细胞的目的D．谷氨酰胺可能用于合成癌细胞的葡萄糖载体蛋白9．（10分）某动物（性别决定为XY型）的有角和无角受等位基因A和a控制；长翅和短翅受等位基因B和b、D和d控制，当B和D基因同时存在时个体表现为长翅，其他情况下个体均表现为短翅。这三对等位基因所在染色体情况未知，回答下列问题：（1）有角雌性个体与无角雄性个体交配，若F1中有角雌性：有角雄性：无角雌性：无角雄性=1：1：1：1，则由此推测两亲本的基因型有哪些可能？___________；若F1中雄性均有角，雌性均无角，且F1雌雄个体再交配，所得F2雄性中有角：无角=3:1、F2雌性中无角：有角=3：1，则由此推测两亲本的基因型为_________。（2）假设等位基因D和d位于X染色体上且等位基因B和b、D和d遵循自由组合定律基因型为_______的两长翅亲本交配，F1雄性中长翅：短翅=3：5，F1雌性中长翅：短翅=___________。（3）若等位基因A和a位于常染色体上，等位基因B和b位于X染色体上，等位基因D和d位于X和Y染色体上，则由该三对基因所构成的基因型共有___________种。10．（10分）基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。请回答下列问题：（1）若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是________________________________之间相连的化学键。（2）图3为目的基因中的某一片段，下列有关叙述正确的是____。A．若图中的ACT能决定一个氨基酸，则ACT可称为一个密码子B．DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处，解旋酶作用于①处C．若只用这个片段中的3个碱基对，排列出的DNA片段有64种D．就游离的磷酸基而言，该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基（3）若利用PCR技术增扩目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取_____________作为引物（DNA复制子链的延伸方向5’→3’）。该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生等长的目的基因片段______个。（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是____________。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有________种。（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含_________________基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。11．（15分）镰刀型细胞贫血症是种单基因遗传病，患者的血红蛋白分子β一肽链第6位氨基酸谷氨酸被缬导氨酸代替，导致功能异常。回答下列问题：（1）将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以合成正常血红蛋白达到治疗目的。此操作__（填“属于”或“不属于”）蛋白质工程，理由是该操作___________。（2）用基因工程方法制备血红蛋白时，可先提取早期红细胞中的______，以其作为模板，在____酶的作用下反转录合成cDNA。（3）检测受体菌是否已合成血红蛋白可从受体菌中提取蛋白质，用相应的抗体进行__________杂交，若出现杂交带，则表明该受体菌已合成血红蛋白。（4）既可以通过将健康外源基因导入到有基因缺陷的细胞中，对患者进行体外基因治疗，还可以对患者进行更简便的_________治疗。两种方法都可以解决器官移植中所面临的___________二两大问题。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、A【解析】

该50肽含有49个肽键，水解成短肽的过程中，需要消耗水分子。【详解】这些短肽共有8个肽链，氨基数目的最小值=肽链的数目，故氨基最少有8个；肽键的数目为50-8=42个。综上所述，BCD不符合题意，A符合题意。故选A。2、C【解析】

人类、玉米和大豆，都能进行有性生殖，在有性生殖过程中核基因的遗传遵循孟德尔遗传定律，而蓝藻属于原核生物，不能进行有性生殖，其遗传肯定不遵循孟德尔遗传定律，C正确。故选C。孟德尔遗传定律包括基因分离定律和基因自由组合定律，这两大定律都适用于进行有性生殖的生物的核基因的遗传，而真核生物细胞质基因的遗传及原核生物细胞中基因的遗传都不遵循孟德尔遗传定律。3、D【解析】

根据题意和图示分析可知，HIV是RNA病毒，小分子a是氨基酸，小分子b是核糖核苷酸，大分子A是蛋白质，大分子B是RNA，据此分析。【详解】A.图中大分子B是RNA，是单链结构，A错误；B.构成生物体的氨基酸a的种类约20种，小分子b是核糖核苷酸，有4种，B错误；C.氨基酸之间以“-CO-NH-”相连，C错误；D.HIV的遗传物质是RNA，遗传信息储存在大分子B中，D正确。4、B【解析】

1、生态工程的基本原理：

（1）物质循环再生原理：物质能在生态系统中循环往复，分层分级利用；

（2）物种多样性原理：物种繁多复杂的生态系统具有较高的抵抗力稳定性；

（3）协调与平衡原理：生态系统的生物数量不能超过环境承载力（环境容纳量）的限度；

（4）整体性原理：生态系统建设要考虑自然、经济、社会的整体影响；

（5）系统学和工程学原理：系统的结构决定功能原理：要通过改善和优化系统结构改善功能；系统整体性原理：系统各组分间要有适当的比例关系，使得能量、物质、信息等的转换和流通顺利完成，并实现总体功能大于各部分之和的效果，即“1+1＞2”。

2、从资源化的角度分析，途径②③优于④是由于多层次分级利用有机废弃物的物质，能充分利用有机物中的能量；从无害化角度分析途径②③优于④是由于减少了环境污染。【详解】A.“无废化生态社区”主要遵循的生态学原理是物质循环再生，A错误；B.从资源化、无害化角度分析，通过多层分级利用有机废弃物中的物质，既充分利用有机物中的能量、又减少环境污染，因此途径②、③优于④，B正确；C.有机肥料被分解者分解后能为农作物提供营养物质，但不能为农作物提供能量，C错误；D.“无废化生态社区”模式提高了物质循环速率和能量利用的效率，但不能提高能量传递效率，D错误。故选B。本题综合考查生态工程的相关知识，要求考生识记生态工程的概念及基本原理；识记生态系统的组成成分及各组成成分的功能，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查。5、C【解析】

线粒体：真核细胞主要细胞器（动植物都有），机能旺盛的含量多。呈粒状、棒状，具有双膜结构，内膜向内突起形成“嵴”，内膜和基质中有与有氧呼吸有关的酶，是有氧呼吸第二、三阶段的场所，生命体95%的能量来自线粒体，又叫“动力工厂”。【详解】线粒体是一种半自主性细胞器，因此其对核遗传系统有很大的依赖性，A正确；线粒体内存在着生产蛋白质的机器--核糖体，B正确；线粒体蛋白质的加工是在线粒体内完成的，不是由内质网和高尔基体完成的，C错误；线粒体蛋白质可存在于外膜、内膜和基质中，D正确。故选C。本题考查线粒体的相关知识，要求考生识记线粒体的结构和功能，能结合题干信息准确判断各选项。6、B【解析】

本题考查细胞工程，考查对植物组织培养、植物体细胞杂交的原理和细胞融合方法的理解和识记，解答此题，可根据植物组织培养、植物体细胞杂交的细胞学基础分析植物组织培养、植物体细胞杂交过程中可能出现的变异类型。【详解】植物原生质体的融合或动物细胞的融合均可以通过电刺激的方法进行诱导，A项正确；通过体细胞杂交技术培育杂种植株的过程导致染色体组成倍增加，B项错误；离体胡萝卜韧皮部细胞形成幼苗的过程中只涉及有丝分裂，没有出现基因重组，C项正确；用花粉离体培养获得的抗病植株，其细胞仍含有全套的遗传信息，具有全能性，D项正确。不同细胞增殖方式中可遗传变异的来源：（1）原核生物的二分裂：基因突变；（2）真核生物有丝分裂：基因突变、染色体变异。（3）真核生物的减数分裂：基因突变、基因重组、染色体变异。二、综合题：本大题共4小题7、丙酮酸NADH能细胞质基质begh大于36探究CO2浓度（NaHCO3浓度）对光合作用速率（或强度）的影响NaHCO3浓度太大，导致细胞失水，从而影响细胞代谢（或光合作用速率）【解析】

分析图一可知：物质①～⑦可分别代表NADPH、NADP+、ATP、ADP、H2O、丙酮酸、H2O，过程a、b、c、d、e、f、g、h分别表示CO2吸收、CO2释放、CO2固定、O2产生、O2吸收、O2释放、O2消耗、CO2产生。分析图二：光照为0时，两种植物均只进行呼吸作用，A植物的呼吸作用相对值为1，B植物的呼吸作用相对值为2。a点对B植物来说净光合作用强度等于0，B植物的有机物积累量为0。b点对B植物来说净光合速率等于呼吸速率，若光照与黑暗相等时间交替，一昼夜B植物的有机物积累量为0。【详解】（1）图一中，⑥代表呼吸作用第一阶段的产物，葡萄糖分解产生[H]和丙酮酸，故⑥代表丙酮酸。呼吸作用中产生的[H]为还原型辅酶Ⅰ，即NADH。（2）若将18O2给予密闭容器中的植物，18O2参与有氧呼吸第三阶段并产生水，由于水也是细胞呼吸的原料，在有氧呼吸第二阶段与丙酮酸反应产生CO2，水中的氧进入二氧化碳，因此放射性元素能出现在植物呼吸作用产生的CO2中。植物细胞中能产生ATP的场所有叶绿体、线粒体和细胞质基质，其中叶绿体产生ATP需在有光条件下，光反应过程中产生，线粒体需在有氧条件下产生，细胞质基质是有氧呼吸无氧呼吸共同的场所，有氧无氧都能产生ATP，所以对此植物进行遮光处理，容器内的O2含量将逐渐下降并完全耗尽后ATP合成的场所是在细胞质基质中。植物根尖成熟区细胞没有叶绿体，能进行呼吸作用而不能进行光合作用，图一中过程a、b、c、d、e、f、g、h分别表示CO2吸收、CO2释放、CO2固定、O2产生、O2吸收、O2释放、O2消耗、CO2产生，故植物根尖成熟区细胞能完成图一中a～h中的b、e、g、h过程。（3）由图二可知a点时光合作用强度等于呼吸作用强度，由于进行光合作用的只有叶肉细胞，根或不含叶绿体的部位不能进行光合作用，只能进行呼吸作用，而此点表示的是整棵植株的光合作用强度等于呼吸作用强度，所以a点时，植物B的叶肉细胞的光合作用强度肯定大于其呼吸作用强度。图二中，A植物的呼吸速率为1，B植物的呼吸速率为2，光照强度为b时，B植物的净光合速率为2，A植物的净光合速率为6。光合作用固定的二氧化碳速率即为总光合速率，总光合速率=呼吸速率+净光合速率，所以B植物的总光合速率为2+2=4，A植物的总光合速率为1+6=7，则每小时A植物的总光合速率比B植物的总光合速率多7-4=3，所以12小时后A植物比B植物光合作用固定的CO2多12×3=36mg/m2。（4）根据题意，小圆叶片上浮至液面所需时间代表光合作用强度，所以①该实验的目的是探究CO2浓度（NaHCO3浓度）对光合作用速率（或强度）的影响。小圆叶片上浮至液面时间越短说明光合作用强度越大。②曲线上升表明光合作用减弱（产生的氧气减少），而C点之后NaHCO3增加，导致叶片细胞外的浓度过高，叶片细胞失水从而影响了它的细胞代谢，故而导致光合作用降低。本题以生理流程图和坐标曲线图为载体，考查光合作用和细胞呼吸的过程及两者间的联系、影响光合作用的因素，意在考查考生能识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成一定知识网络的能力，并且具有一定的分析能力和理解能力，属于考纲综合运用层次。8、（癌细胞中）原癌基因和抑癌基因发生了基因突变动物血清癌细胞缺少ZAP蛋白内质网①②③④有氧呼吸和无氧呼吸乳酸、五碳糖AB【解析】

据图甲可以知道，因为ZAP蛋白能抑制M1溶瘤病毒的复制，而癌细胞缺少ZAP蛋白，故M1溶瘤病毒选择性感染癌细胞.细胞凋亡是由基因决定的，属于正常的生命现象，对生物体有利；细胞坏死是由外界环境因素引起的，是不正常的细胞死亡，对生物体有害。根据图乙分析，图示表示癌细胞在有氧条件下葡萄糖的部分代谢过程①②③为呼吸作用第一阶段的酶，分布在细胞质基质；④为无氧呼吸第二阶段的酶，也分布在细胞质基质；⑤为有氧呼吸的二、三阶段的酶，分布在线粒体。【详解】（1）细胞癌变的根本原因是原癌基因和抑癌基因发生了突变导致的。体外培养配制培养基时霱要加入血清。（2）据图甲可以知道：因为ZAP蛋白能抑制M1溶瘤病毒的复制，而癌细胞缺少ZAP蛋白，故M1溶瘤病毒选择性感染癌细胞；据图示可以知道，内质网应激反应导致细胞凋亡，故癌细胞凋亡与内质网密切相关。（3）①〜⑤代表不同种酶，其中①②③为呼吸作用第一阶段的酶，分布在细胞质基质；④为无氧呼吸第二阶段的酶，也分布在细胞质基质；⑤为有氧呼吸的二、三阶段的酶，分布在线粒体。（4）据图乙可以知道癌细胞有氧条件下呼吸方式是有氧呼吸和无氧呼吸，其中无氧呼吸中代谢产生大量的乳酸、五碳糖中还储存有大量能量，故ATP没有大量增加。（5）据题意可以知道，如果限制体内谷氨酰胺的含量，就可以使肿瘤细胞无法正常吸收葡萄糖。A、减少葡萄糖的摄入会影响癌细胞的正常生长，错误；B、细胞的直接能源物质是ATP，葡糖糖是主要能源物质，错误；C、由于葡萄糖的吸收属于主动运输，需要载体和能量，故根据图乙推测谷氨酰胺可能用于合成癌细胞的葡萄糖转运蛋白，造成葡萄糖含量减少，相当于切断了肿瘤细胞的“糖路”，可达到饿死肿瘤细胞的目的，正确；D、由于葡萄糖的吸收属于主动运输，需要载体和能量，故根据图乙推测谷氨酰胺可能用于合成癌细胞的葡萄糖转运蛋白，其含量减少最终导致癌细胞无法正常生长，正确。故选AB。解决此类题目需要考生结合题文和图文一起研读，题文中提到“Ml溶瘤病毒能选择性地感染并杀伤包括肝癌、黑色素瘤在内的多种体外培养的癌细胞，而对正常细胞无毒副作用”，接下来考生需要从示意图中寻找该病毒的作用机理：即癌细胞表面缺少ZAP蛋白，而正常细胞表面有ZAP蛋白，接下来的题目继续考查了葡萄糖在体内的氧化分解、以及从示意图中提取信息的能力。9、Aa、aa，XAXa、XaY或XAXa、XaYaAA、aaBbXDXd、BbXDY3:154【解析】

依据题意，有角雌性个体与无角雄性个体交配，若F1中有角雌性：有角雄性：无角雌性：无角雄性=1：1：1：1则A、a、基因所在的染色体存在三种情况，即常染色体、x染色体、X和Y染色体的同源区段。自由组合定律中，非等位基因要存在与非同源染色体上。【详解】（1）有角雌性个体与无角雄性个体交配，根据子代的表现型及比例，无法判断有角和无角的基因位置，若位于常染色体则两亲本的基因型Aa、aa，若位于x染色体则两亲本的基因型XAXa、XaY，若位于XY染色体的同源区段则两亲本的基因型XAXa、XaYa。依据题意F1雌雄个体再交配，子代中雌雄个体中性状分离比都是3：1，可以确定控制有角和无角的基因位于常染色体，而且有角相对无角为显性，则F1基因型都是Aa，且为从性遗传，即雄性均有角，雌性均无角，进而推测出两亲本基因型为AA、aa。（2）根据自由组合定律，位于非同源染色体上的非等位基因自由组合，基因D和d位于X染色体，则基因B和b位于常染色体上。两长翅亲本交配，F1雄性中长翅：短翅=3：5可以推出两长翅亲本的基因型为BbXDY与BbXDXd，则F1雌性中基因型有BBXDXD(长翅)、BBXDXd（长翅）、2BbXDXD(长翅)、2BbXDXd(长翅)、bbXDXD（短翅）、bbXDXd（短翅），长翅：短翅=6：2即3：1。（3）依据题意，位于常染色体上的基因A和a可构成3种基因型，位于X染色体上的基因有B、b、D、d四种，位于Y染色体上的基因有D、d两种，则构成的雄性基因型有8种，雌性基因型有10种，因此共有3x（10+8）=54种。本题考查了伴性遗传以及基因自由组合定律的有关知识，解题的关键是要确定基因所在的位置。遗传规律”是高中生物学的主干知识，也是历年高考的重点，它以基因的分离、自由组合规律为核心，通常的题型是概率的计算。随着高考对实验能力要求的提升，通过运用遗传规律以区别性状的显隐性、确定个体的基因型、推断基因位于常染色体或X染色体以及确定基因在染色体上的位置等实验题，已成为高考的热点题型。解答此类实验题时，可以运用遗传规律进行逆向思维，即先假定结果再反推原因。10、鸟嘌呤脱氧核苷酸和腺嘌脱氧核苷酸BDB和C8PstI、EcoRI1抗四环素基因【解析】

1、基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。2、基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。【详解】（1）DNA分子的一条多核苷酸链中，两个脱氧核苷酸之间以磷酸基团和五碳糖相连。由题目可知，EcoRⅠ识别的DNA序列只有G和A，故切开的是鸟嘌呤脱氧核苷酸和腺嘌呤脱氧核苷酸之间相连的化学键。（2）A、密码子是mRNA上决定一个氨基酸的3个相邻的碱基，若图中的ACT能决定一个氨基酸，则其对应的密码子是UGA，A错误；B、DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②磷酸二酯键处，解旋酶作用中①氢键处，B正确；C、A和T之间有2个氢键，C和G之间有3个氢键，因此若只用这片段中的3个碱基对，可以排列出23种片段，C错误；D、就游离的磷酸基而言，该片段有2个游离的磷酸基，而重组质粒不含游离的磷酸基，因此该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基，D正确。