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/专题16发酵工程目录第一部分高考新风向洞察考向,感知前沿第二部分分层巧突破固本培优,精准提分A组·保分基础练题型01传统发酵技术的应用题型02微生物的培养技术题型03发酵工程及其应用B组·增分能力练第三部分真题刷进阶对标高考,感悟考法1.(2025·河北邢台·一模)研究人员在探究枯草芽孢杆菌发酵生产维生素K2(一种脂溶性有机物)的工艺优化实验中发现,在发酵初期(0~12小时),高溶解氧(≥60%)促进菌体快速增殖;进入产物合成期(12小时后),将溶解氧控制在30%时维生素K2产量最高,比恒定的60%溶解氧条件下的产量提升约45%,并且可减少菌株对营养物质的消耗。下列有关叙述正确的是(
)A.枯草芽孢杆菌细胞中含有编码维生素K2的基因,可直接表达产生维生素K2B.12小时后,过量氧气可能会诱导菌体增加对营养物质的消耗导致产物积累减少C.发酵初期氧气充足时菌体可以快速增殖,故在发酵前不需要对枯草芽孢杆菌进行扩大培养D.若提高发酵罐中营养物质的含量,一定会提高菌体数量和维生素K2的产量【答案】B【解析】枯草芽孢杆菌细胞中不直接含有编码维生素K2的基因。维生素K2是次级代谢产物,其合成需多种酶参与,由多个基因共同调控,并非单一基因直接表达产生,A错误;12小时后,30%溶解氧条件下维生素K2产量高于60%溶解氧条件,且营养消耗减少。说明过量氧气可能增强菌体有氧呼吸,加速营养物质消耗,导致用于产物合成的能量和物质减少,从而降低产量,B正确;发酵初期高溶解氧虽促进菌体增殖,但发酵前仍需对枯草芽孢杆菌进行扩大培养,以获得足够数量的菌种,确保发酵效率,C错误;提高营养物质含量可能促进菌体增殖,但若超过最适浓度,可能导致代谢紊乱、溶氧不足或副产物积累,反而抑制维生素K2合成,D错误。2.【新考法·魏氏藻】(2026·陕西·一模)某校学生以培养基为纸,接种环为笔,不同菌种为墨,为我们勾画出一幅微生物版的部分中国地图。在该作品中,白色区域、绿色和黄色区域分别由地衣芽孢杆菌、gxu-a13魏氏藻、胁迫后的魏氏藻绘制而成。下列说法错误的是(
)A.制备培养基时要经过计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板等步骤B.图中作品白色区域的培养基的pH一般为酸性C.本实验的接种方法为平板划线法,使用接种环接种时,取菌种前和接种后都需将接种环进行灼烧灭菌D.胁迫后的魏氏藻变黄的原因是叶绿素被分解破坏的结果【答案】B【解析】培养基的配制过程为:计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板等步骤,其中溶化后灭菌前一定要进行的操作是调pH,满足所培养的微生物的需求,A正确;不同微生物培养时对pH的要求往往不同,培养细菌时需将pH调至中性或微碱性,在该作品中,白色区域由地衣芽孢杆菌绘制而成,所以该区域pH一般为中性或微碱性,B错误;本实验的接种方法为平板划线法,使用接种环接种时,取菌种前和接种后都需将接种环进行灼烧灭菌,取菌种前避免污染、接种后防止菌种扩散,C正确;魏氏藻的色素包含叶绿素,胁迫会导致叶绿素分解,类胡萝卜素等色素占比上升,从而呈现黄色,D正确。3.【新考法】(2025·河北沧州·一模)黄曲霉毒素B1(AFB1,)是由黄曲霉等产生的强毒性次生代谢物,常见于发霉的谷物等粮食中,是已知的强致癌物。科研人员分离出了能够分解AFB1的菌种A,并尝试从菌种A中获取能够降解AFB1的物质。制备菌种A悬液进行分组实验,实验处理及检测结果如图。下列叙述正确的是(
)A.黄曲霉毒素是黄曲霉生长所必需的产物B.分离菌种A需用以AFB1为唯一碳源的鉴别培养基C.利用涂布器蘸取适量菌种A的浸出液,涂布到培养基中D.菌种A中降解AFB1的物质是不耐高温的蛋白质【答案】D【解析】黄曲霉毒素是次级代谢产物,不是黄曲霉生长必需的产物,A错误;分离菌种A需用以AFB1为唯一碳源的选择培养基,B错误;涂布器只可用于涂布,不可用于蘸取浸出液,C错误;根据图示结果可以看出,降解AFB1的物质不耐高温且会被蛋白酶降解,推测其化学本质是蛋白质,D正确。4.【新情境·分层固体发酵法】(2025·四川乐山·一模)某醋厂生产的老醋因其乳酸含量高而独具风味,源于其采用独特的分层固体发酵法。如图1是分层固体发酵法示意图,图2为发酵过程中检测的醋酸杆菌密度。酒醅是经蒸煮糊化后的粮食原料拌入糖化剂(如曲粉)和酒曲,正在进行酒精发酵的固态物料。醋醅是含有酒精的液态或固态物料(通常由酒醅发酵后的酒液等)拌入疏松材料(如谷壳、麸皮)和醋酸菌种后,正在进行醋酸发酵的固态物料。下列说法错误的是()A.发酵过程中,接种醋酸杆菌后,需封闭发酵缸置于18-30℃条件下培养B.发酵过程中,发酵缸中下层醋醅有利于乳酸菌繁殖和发酵,积累乳酸C.据图2分析,A、B层颠倒后B层醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是氧气浓度D.发酵后期不同种类乳酸菌的种间竞争加剧,成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少【答案】A【解析】醋酸杆菌是好氧细菌,在醋酸发酵阶段需要充足的氧气,所以接种醋酸杆菌后不能封闭发酵缸,且醋酸杆菌发酵的适宜温度是30-35℃,而不是18-30℃,A错误;乳酸菌是厌氧菌,发酵缸中下层氧气含量低,有利于乳酸菌繁殖和发酵,积累乳酸,B正确;醋酸杆菌是好氧菌,A、B层颠倒后,B层由下层变为上层,氧气浓度增加,所以B层醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是氧气浓度,C正确;发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化,加剧了不同种类乳酸菌的种间竞争,导致成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少,D正确。01传统发酵技术的应用1.【新载体】《齐民要术》中记载了多种农作物的加工技术,如小麦可酿酒、可磨成面粉做馒头,芝麻可榨油等。下列叙述错误的是()A.酿酒时,酒精是在酵母菌细胞的细胞质基质中产生的B.用面粉发酵制作馒头时,酵母菌可进行有氧呼吸产生CO2C.芝麻油的主要成分是脂肪,其饱和脂肪酸含量较高D.馒头中的淀粉需要水解为单糖才能被人体吸收、利用【答案】C【解析】A、酵母菌无氧呼吸(酒精发酵)的场所为细胞质基质,最终产物包含酒精,A正确;B、面粉发酵过程中,酵母菌利用葡萄糖进行有氧呼吸产生CO₂和水,CO₂使面团膨胀,B正确;C、芝麻油为植物油,其脂肪分子中不饱和脂肪酸含量较高(常温呈液态),而非饱和脂肪酸(常温固态),C错误;D、淀粉为多糖,需经消化道中唾液淀粉酶、胰淀粉酶等水解为葡萄糖(单糖),才能通过小肠上皮细胞主动运输吸收,D正确。2.【新考法】湖北孝感米酒的制作主要包括糯米浸泡、蒸煮、冷却、加酒曲发酵等步骤。其中,“发酵”是形成米酒风味的关键工序,其本质是糯米中的淀粉在酒曲中酶的作用下水解为葡萄糖,进而被酵母菌转化为酒精和的过程。下列叙述错误的是(
)A.“浸泡”过程中,糯米细胞主要吸收自由水B.“蒸煮”过程通过高温破坏细胞结构,使淀粉糊化并杀死杂菌C.“发酵”过程中,酵母菌产生酒精和的场所分别是细胞质基质、线粒体D.“冷却”是为了防止高温杀死酒曲中的酵母菌和酶,保证发酵正常进行【答案】C【解析】A、糯米浸泡时,吸水主要依靠物理渗透作用,吸收的水具有流动性和溶解性,为自由水,A正确;B、蒸煮通过高温使糯米细胞膜、细胞器结构破坏,淀粉分子空间结构改变(糊化),同时高温使杂菌蛋白质变性失活,起到灭菌作用,B正确;C、酵母菌在无氧发酵时,葡萄糖在细胞质基质中分解为丙酮酸,丙酮酸继续在细胞质基质中转化为酒精和CO₂,全过程均在线粒体外进行,C错误;D、酒曲中的酵母菌和酶(淀粉酶等)在高温下会失活,冷却可保持其生物活性,确保后续发酵正常进行,D正确。3.《齐民要术》记载了一种酿醋工艺,“大率酒一斗,用水三斗,合瓮盛,置日中曝之。七日后当臭,衣(指菌膜)生,勿得怪也,但停置,勿移动,挠搅之。数十日,醋成”。下列说法错误的是()A.此酿醋方法的原理是在缺少糖源时特定微生物可将酒精转化为醋酸B.“置日中曝之”目的是杀死发酵液中的酵母菌C.“衣”位于发酵液表面,是由醋酸菌大量繁殖形成的D.“挠搅”有利于酒精与微生物的充分接触,且可增加溶解氧【答案】B【解析】A、该工艺以酒(酒精)为原料酿醋,符合醋酸菌在缺乏糖源时将乙醇氧化为乙醛,再转化为乙酸的代谢途径,A正确;B、“置日中曝之”指将发酵装置置于阳光下曝晒,目的是利用日光升温(30~35℃),为醋酸菌发酵提供适宜温度,而非杀死酵母菌(酵母菌最适温度约20℃),B错误;C、“衣”指液面形成的菌膜,由需氧型醋酸菌大量繁殖聚集形成,是醋酸发酵的典型现象,C正确;D、“挠搅”即搅拌,可促进发酵液中酒精与醋酸菌的接触,同时增加溶解氧以满足醋酸菌的有氧呼吸需求,D正确。4.安梨有消炎、利尿、润喉、止咳、降血压、解酒等药用价值。以安梨皮渣为原料制备安梨皮渣酒和安梨皮渣醋的过程如下图所示。下列叙述正确的是()A.安梨皮渣酒发酵完成后升温至30~35℃,通入无菌空气,不用接种即可制作安梨皮渣醋B.安梨皮渣醋发酵时,可用酸性重铬酸钾测定醋酸含量变化,且溶液灰绿色逐日加深C.安梨皮渣酒、安梨皮渣醋发酵所需菌种的细胞结构相同D.推测在安梨皮渣中加入果胶酶进行酶解可以提高果汁的出汁率【答案】D【解析】A、安梨皮渣酒发酵完成后升温至30~35℃,通入无菌空气,需要接种醋酸菌才可用于制作安梨皮渣醋,A错误;B、酸性重铬酸钾是用于鉴定酒精的,不用来鉴定醋酸,B错误;C、安梨皮渣酒的发酵需要的微生物为酵母菌,属于真核生物,安梨皮渣醋的发酵需要的微生物为醋酸菌,属于原核生物,所以安梨皮渣酒、安梨皮渣醋发酵所需菌种的细胞结构不同,C错误;D、植物细胞壁的组成成分为纤维素和果胶,所以在安梨皮渣中加入果胶酶进行酶解可以提高果汁的出汁率,D正确。02微生物的培养技术5.【新情境】野生型大肠杆菌通过一系列的生化反应合成生长所必需的物质M,从而能在基本培养基上生长,但如果发生基因突变,导致某一步骤不能进行,而致使物质M不能合成,无法在基本培养基上生长,科学家利用紫外线处理后,得到4种不能在基本培养基上生长的突变体,突变体及相应突变基因均依次标记为a~d。为了突变体少量生长,四个平板配置有基本培养基和微量物质M。用稀释涂布平板法将微量的4种突变体细菌(a~d)依次接种到平板①~④。适当时间后,在每一个平板的培养基表面上各接种4种突变体(图中圆框a~d)。黑色实心圆圈表明非常良好的生长情况。一个细菌菌落如果在物质M的生物合成的后续步骤中被抑制,其合成的中间产物会聚集;产生的中间产物能够供给在之前步骤中被抑制的细菌株营养。下列哪一个物质M的合成过程中的正常基因a~d作用的顺序是正确的(
)A.c→d→b→a B.b→d→c→aC.a→c→d→b D.a→b→c→d。【答案】C【解析】对于某突变体来说,由于后续步骤中被抑制,其合成的中间产物会聚集,这些中间产物能够供给在之前步骤中被抑制的其他类型的细菌株营养,进而使其他类型的细菌株能越过被抑制的步骤,顺利合成生长所必需的物质M,从而能在基本培养基上生长。说明突变体被抑制步骤越靠后,其合成的中间产物能挽救的其他突变体种类就越多。也就是说,能挽救的其他突变体种类就越多,该中间产物在生化反应步骤中越靠后,平板②有(a、c、d)3种突变体生长,故突变体b产生的中间产物最靠后,抑制的步骤也在最后。平板④有(a、c)2种突变体生长,故突变体d产生的中间产物较平板中②突变体b产生的靠前,抑制的步骤比平板中②突变体b的靠前。如此类推,物质M的合成过程中的正常基因a~d作用的顺序为a→c→d→b,C正确,ABD错误。6.瘤胃是反刍动物的第一个胃,是降解纤维素的场所。现要从牛的瘤胃中分离出能够分解纤维素的微生物,下列有关说法正确的是(
)A.实验前需对培养基、接种工具、瘤胃等进行湿热灭菌B.培养基中加伊红—亚甲蓝,可用来鉴别纤维素分解菌C.接种后,培养基应在无氧条件下培养,直至长出菌落D.筛选出纤维素分解菌后,应使用固体培养基扩大培养【答案】C【解析】A、瘤胃内含目标微生物(纤维素分解菌),若进行湿热灭菌会杀死所有微生物,导致实验失败。实验前仅需对培养基、接种工具灭菌,瘤胃内容物无需灭菌,A错误;B、伊红-亚甲蓝培养基用于鉴别大肠杆菌等肠道细菌,纤维素分解菌的鉴别需用刚果红染色法,B错误;C、瘤胃为厌氧环境,其中的纤维素分解菌多为厌氧菌,需在无氧条件下培养才能获得目标菌落,C正确;D、扩大培养需提高菌体数量,应使用液体培养基(提供充足营养及氧气交换),固体培养基主要用于分离单菌落,D错误。7.为了提高乳糖酶的产量,科研人员从奶酪中分离纯化出了能高效生产乳糖酶的酵母菌,操作过程如图所示。其中X-gal是一种无色物质,能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝,使菌落呈蓝色。下列相关叙述不正确的是()A.将菌液接种到培养基乙所采用的方法是稀释涂布平板法B.含X-gal培养基从功能上划分,属于鉴别培养基C.纯培养过程中,配制好培养基后须依次进行灭菌、调节酸碱度和倒平板操作D.牛奶中添加适量乳糖酶获得无乳糖牛奶,一般不会破坏牛奶中的其他营养成分【答案】C【解析】A、根据培养基乙中的菌落分布情况可知,将菌液接种到培养基乙所采用的方法是稀释涂布平板法,A正确;B、X-gal是一种无色物质,能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝,使菌落呈蓝色,含X-gal培养基从功能上划分,属于鉴别培养基,B正确;C、纯培养过程中,培养基配制好后,需先进行酸碱度的调节,然后灭菌,最后进行倒平板操作,C错误;D、牛奶中添加适量乳糖酶获得无乳糖牛奶,一般不会破坏牛奶中的其他营养成分,因为乳糖酶专一性地分解乳糖,D正确。8.【新载体】微生物筛选与鉴定过程中常出现透明圈、变色圈、抑菌圈和生长圈(指固体培养基中微生物的生长区域)等(如图),它们的形成原理和应用场景不同,下列有关说法错误的是()A.甲图中,石油降解菌降解培养基中的石油而形成透明圈B.乙图中,尿素的分解产物氨溶于培养基中的水后,使指示剂变色形成变色圈C.在含有抗生素的滤纸片周围可以形成抑菌圈,抑菌圈越大,该菌耐药性越强D.在含特定营养物质的滤纸片周围形成了生长圈,可筛选出营养合成缺陷型突变菌株【答案】C【解析】A、甲图是石油降解菌的筛选:石油是培养基中的碳源,石油降解菌能分解培养基中的石油(脂肪类物质),使原本不透明的石油被分解,从而形成透明圈,A正确;B、乙图是尿素分解菌的鉴定:尿素分解菌能将培养基中的尿素分解为氨(含氮废物),氨溶于水后使培养基呈碱性,若培养基中添加了酚红等指示剂,碱性环境会使指示剂变色,从而形成变色圈,B正确;C、含抗生素的滤纸片周围的抑菌圈,反映的是抗生素对微生物的抑制能力:抑菌圈越大,说明该微生物对这种抗生素的敏感性越强(越容易被抑制),C错误;D、营养缺陷型突变株自身不能合成某种营养物质,若滤纸片含该特定营养物质,突变株会在滤纸片周围生长,形成生长圈,以此可筛选出营养缺陷型突变株,D正确。03发酵工程及其应用9.青霉菌是一种好氧微生物,在青霉菌发酵时,在合成的开始阶段青霉素和头孢霉素有共同的前体,不久出现分支。生产抗生素的发酵罐如图所示,以下叙述正确的是()A.由于青霉素的抗菌作用,通入发酵罐的空气不需要灭菌B.搅拌能够使氧气与培养液快速混合,但不利于散热C.将血红蛋白基因导入青霉菌,可能提高菌体对氧的吸收和利用率D.青霉菌的发酵最终获得的青霉素是一种单细胞蛋白【答案】C【解析】A、青霉素本身具有杀菌作用,但不能杀灭所有的微生物,因此,发酵罐需要严格灭菌,通入发酵罐的空气需灭菌,A错误;B、搅拌能够使氧气与培养液快速混合,同时有利于散热,B错误;C、将血红蛋白基因导入青霉菌后,会在青霉菌内表达产生血红蛋白,进而提高菌体对氧的吸收和利用率,C正确;D、微生物菌体本身属于单细胞蛋白,青霉素不是单细胞蛋白,D错误。10.酱油在发酵过程中会产生色胺、组胺、酪胺等生物胺,当人体摄入过量的生物胺,尤其是同时摄入多种生物胺时,会引起头痛、恶心、心悸、血压变化、呼吸紊乱等过敏反应,严重时还会危及生命。科学家们将基因工程菌生产的多铜氧化酶添加至酱油中,可有效降解酱油中的多种生物胺。下图为不同pH下的多铜氧化酶活性,相关分析错误的是(
)A.将基因工程菌接种至培养基中,收集并破碎菌体细胞可获得酶液B.与pH=4相比,多铜氧化酶在pH=3时降低化学反应活化能的作用更显著C.pH>5时多铜氧化酶活性迅速下降,原因是该酶的空间结构遭到破坏D.多铜氧化酶可有效降解酱油中的多种生物胺,说明其不具有专一性【答案】D【解析】A、基因工程菌合成的多铜氧化酶若为胞内酶,需破碎菌体才能获得酶液,A正确;B、酶的催化作用是降低化学反应活化能,相对活性越高,催化效果越显著;pH=3时酶相对活性高于pH=4,故其降低活化能的作用更显著,B正确;C、pH过高会破坏酶的空间结构,导致酶活性下降,C正确;D、酶的专一性是指一种酶催化一种或一类化学反应;多铜氧化酶降解“多种生物胺”,属于催化“一类物质”的反应,仍具有专一性,D错误。11.科学家从土壤中筛选了一株产苏氨酸的菌株a。通过对菌株a的AK酶(其能催化苏氨酸的生成,该过程会被最终产物苏氨酸负反馈抑制)改良,得到了苏氨酸高产菌株b。部分操作过程如图,其中培养基Ⅰ和培养基Ⅱ的配方相同。下列叙述正确的是()A.培养基Ⅰ与Ⅱ均属于选择培养基,其上获得的细菌种类数相同B.培养基Ⅱ上采用的接种方法是稀释涂布平板法C.与菌株a相比,菌株b的AK酶与苏氨酸结合力下降D.后续若将菌株b用于发酵工程进行生产,中心环节是进行菌种的扩大培养【答案】C【解析】A、实验的目的是筛选谷氨酸棒状杆菌,培养基Ⅰ和培养基Ⅱ的配方相同,所以培养基Ⅰ、Ⅱ均为选择培养基,通过选择培养后,在培养基Ⅰ和Ⅱ上获得的细菌种类数会出现差异,A错误;B、据图可知,在培养基Ⅱ上采用的接种方法是平板划线法(连续划线),B错误;C、菌株b与菌株a相比较,苏氨酸更高产,再结合题意负反馈调节,所以可推知,菌株b中AK酶与苏氨酸的结合力下降,C正确;D、发酵工程进行生产的中心环节是发酵罐内发酵,D错误。12.葡萄酒、猕猴桃酒等果酒酿造逐步从农户自制发展到规模化生产,品质更优,产量更高。下表是果酒制作方式的比较。下列叙述错误的是()制作方式发酵类型核心菌种/菌群关键控制条件风味特点农户自制自然发酵果皮野生酿酒酵母、乳酸菌常温避光,无需灭菌,定期翻缸排气果香浓郁,口感醇厚,带轻微酸涩感规模化生产人工接种发酵优选酿酒酵母发酵前果汁灭菌(巴氏消毒),全程控氧,酸甜平衡口感清爽,风味稳定,酸甜平衡A.菌种差异、杂菌情况不明和发酵过程的控制缺乏标准等,会导致自制果酒品质不一B.自制果酒过程中定期翻缸排气,是为了排出酵母菌有氧呼吸过程中产生的二氧化碳C.性状优良的酿酒酵母可以从天然菌种中筛选,也可以通过诱变育种或基因工程育种获得D.规模化生产时先在有氧条件下对菌种进行扩大培养,然后在发酵罐中进行无氧发酵【答案】B【解析】A、农户自制果酒采用自然发酵,核心菌种为果皮野生酿酒酵母和乳酸菌等混合菌群,杂菌存在且发酵条件(如温度、氧气)缺乏标准化控制,导致产品品质不稳定,A正确;B、定期翻缸排气的主要目的是排出酵母菌无氧发酵(酒精发酵)过程中产生的大量二氧化碳,防止容器内压过高,B错误;C、性状优良的酿酒酵母可通过筛选天然菌种(如野生酵母)获得,也可利用诱变育种(诱发基因突变)或基因工程育种(定向改造基因)等现代生物技术培育,C正确;D、规模化生产中,需先在有氧条件下对优选酿酒酵母进行扩大培养(促进菌体增殖),再转入发酵罐进行无氧发酵(促进酒精生成),符合发酵工艺要求,D正确。1.(2025·四川成都·一模)某醋厂的醋酸发酵采用独特的分层固体发酵法,部分工艺如图。下列叙述正确的是(
)A.刚开始发酵缸中提供成熟酒醅的作用是接种醋酸菌B.发酵的前15天温度设为30℃,随后应调整为20℃C.每天翻动的操作目的是抑制醋酸菌的无氧呼吸过程D.发酵全过程中A层的醋酸杆菌密度会先于B层上升【答案】D【解析】A、酿酒所用的菌种是酵母菌,利用酵母菌在无氧的情况下进行酒精发酵,因此成熟酒醅中没有醋酸菌,提供成熟酒醅的作用是为醋酸发酵提供原料,A错误;B、醋酸发酵的最适温度是30-35℃,整个发酵过程都需要维持在这个温度范围内,不需要调整,B错误;C、醋酸菌的代谢类型是异养需氧型,每天翻动的操作目的是增加发酵料的通气量,保证醋酸菌进行有氧呼吸,从而促进醋酸发酵,C错误;D、发酵前期只翻动A层,A层的通气条件更好,醋酸菌繁殖更快,因此A层的醋酸杆菌密度会先于B层上升;第15天颠倒后,B层变为上层,后续B层的醋酸杆菌密度才会进一步上升,D正确。故选D。2.(2025·河北·一模)某同学尝试用糯米制作传统米酒和米醋,实验流程如下:①糯米浸泡后蒸熟,冷却至;②加入酒曲(含酵母菌和根霉),搅拌均匀后密封;③发酵3天后,开盖加入醋曲(含醋酸菌),并保持通气;④继续发酵5天,过滤得米醋。下列关于上述实验的分析正确的是()A.步骤①中糯米蒸熟的目的是杀灭所有微生物,避免杂菌污染B.步骤②中密封的目的是为酵母菌提供无氧环境,促进其大量繁殖C.步骤③中加入醋曲后通气的目的是促进醋酸菌将酒精转化为醋酸D.步骤④中过滤前检测到发酵液中酒精浓度下降,则说明米醋制作成功【答案】C【解析】A、步骤①中糯米蒸熟的主要目的是高温灭菌,减少杂菌污染,但“杀灭所有微生物”表述过于绝对(可能存在耐高温的微生物孢子),A错误;B、步骤②密封的目的是创造无氧环境,促进酵母菌进行无氧呼吸产生酒精(米酒),但酵母菌大量繁殖需在有氧条件下进行,密封不利于其繁殖,B错误;C、步骤③加入醋曲后通气,因醋酸菌为需氧型细菌,其通过有氧呼吸将乙醇氧化为醋酸,通气可提供有氧条件促进该转化,C正确;D、步骤④中酒精浓度下降可能是醋酸菌将酒精转化为醋酸,但也可能是其他因素(如挥发、杂菌消耗等),不能直接说明米醋制作成功,需进一步检测醋酸含量,D错误。故选C。3.(2025·陕西渭南·一模)获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提。下列叙述正确的是(
)A.允许特定微生物生长、繁殖的培养基就是选择培养基B.稀释涂布平板法和平板划线法均可用于微生物的分离和计数C.微生物的纯培养操作顺序为:配制培养基→调pH→灭菌→接种→分离和培养等D.接种后需立即倒置培养以避免皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染【答案】C【解析】A、选择培养基是允许特定微生物生长,同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基,A错误;B、稀释涂布平板法可用于微生物的分离和计数(通过菌落数计算活菌数),但平板划线法仅用于微生物的分离(纯化菌种),无法精确计数(因菌落重叠或未分散),B错误;C、微生物纯培养的正确操作顺序应为:配制培养基→调pH→灭菌→接种→培养。若先灭菌后调pH,会破坏培养基的无菌状态(调pH需在灭菌前完成),C正确;D、接种后待菌液被培养基吸收后,再将平板倒置,不是立即倒置,D错误。故选C。4.(2025·四川自贡·一模)【新情境】石油污染土壤的微生物修复是环境治理的重要方向。研究人员从石油污染土壤中分离出一株高效降解石油烃的菌株BS3,并研究了不同石油烃浓度对其生长和降解的影响,结果如下图。下列相关叙述正确的是()A.污染土壤制成浸出液后,可采用平板划线法分离菌株BS3B.石油烃初始浓度为0.3g/L时,BS3对石油烃的降解量最多C.石油烃可抑制菌株BS3的生长,且浓度越大抑制作用越强D.修复时,施用适宜浓度BS3菌液至污染区即可获得理想效果【答案】A【解析】A、污染土壤制成浸出液后,采用平板划线法可分离菌株BS3,这是微生物分离的常见方法,A正确;B、从石油烃浓度对单菌株降解效果的影响折线图可知,石油烃初始浓度为0.3g/L时,BS3对石油烃的降解率最大,而非降解量最多,B错误;C、从不同石油烃浓度对菌株生长的影响柱状图可以看出,在浓度较小时的一定范围内,石油烃能促进菌株BS3的生长,C错误;D、图中并没有体现出菌株BS3对不同种类石油的降解能力,同时,微生物修复不仅需要适宜的菌株浓度,还需考虑环境因素(如温度、pH、氧气含量等)、营养物质供应等。仅施用适宜浓度的菌液可能无法达到理想效果,D错误。5.(2025·浙江·一模)【新载体】我国常用滤膜法测定饮用水中的大肠杆菌数目来检测水样是否符合饮用水标准,流程图如下,其中EMB培养基中的伊红美蓝可使大肠杆菌菌落呈紫黑色。某研究小组将10mL待测水样加入90mL无菌水中,稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上紫黑色菌落数平均为33。以下说法正确的是(
)A.从功能上看伊红美蓝培养基属于选择培养基B.过滤装置和水样等均需高压蒸汽灭菌后使用C.沾在滤杯杯壁上的部分微生物需用蒸馏水冲洗,并再次过滤D.经推测1L待测水样中大肠杆菌数目约为3300个【答案】D【解析】A、含伊红美蓝的培养基从功能上看属于鉴定培养基,A错误;B、过滤装置和需高压蒸汽灭菌,水样不能灭菌,B错误;C、沾在滤杯杯壁上的部分微生物需用无菌水冲洗,避免杂菌混入,C错误;D、10mL菌液中大肠杆菌数目为33个,则1L中的数目为100×33=3300,D正确。故选D。6.(2025·四川眉山·一模)农业生产中使用的除草剂不易被降解,长期使用会导致土壤污染。选取降解除草剂的菌种成为修复除草剂污染土壤的关键,如图为筛选降解除草剂菌种的流程。下列说法错误的是()A.样品应选自长期使用除草剂的农田B.过程Ⅰ接种时总共灼烧接种环6次C.过程Ⅱ应挑取5号区域的菌落进行接种培养D.用过程Ⅱ所使用的接种方法统计菌落数时结果偏大【答案】D【解析】A、长期使用除草剂的农田中,能降解该除草剂的菌种数量更多、更容易筛选到目标菌种;普通农田中这类菌种占比极低,不利于筛选,A正确;B、过程Ⅰ划线操作,并且共划了5个区域,那么在每次划线前后均需要对接种环进行灼烧灭菌,因此总共需要灼烧接种环6次,B正确;C、平板划线法中,越靠后的划线区域(如5号区域),菌种稀释度越高,得到的菌落更可能是单菌落(纯培养),适合进一步接种培养,C正确;D、平板划线法不能用来计数,D错误。7.(2025·河北·一模)【新情境】双乙酰含量过高会导致啤酒出现“馊饭味”。科学家通过改造获得了低表达ILV2(α-乙酰羟酸合成酶)基因的酵母菌,使双乙酰量下降58%。下图表示酿造低双乙酰啤酒的大致流程。下列叙述错误的是()A.焙烤是为了杀死种子的胚,且不使α-淀粉酶失活B.加入的啤酒花具有调节啤酒风味的作用C.酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成D.低表达ILV2基因可能是通过DNA甲基化干扰RNA聚合酶与起始密码子结合来实现的【答案】D【解析】A、焙烤的目的是杀死麦芽胚(避免其萌发消耗营养),同时需保留α-淀粉酶的活性(以便后续糖化分解淀粉),A正确;B、啤酒花能赋予啤酒独特的苦味、香气,同时具有一定防腐作用,可调节啤酒风味,B正确;C、主发酵阶段是酵母菌快速繁殖、利用糖分进行酒精发酵(分解糖产生酒精等代谢物)的主要阶段,后发酵主要是风味物质的进一步形成,C正确;D、DNA甲基化主要干扰RNA聚合酶与启动子的结合(抑制转录),而非与起始密码子结合(起始密码子是翻译的起点),D错误。故选D。8.(2025·四川内江·一模)黄酒传统酿制中,先以蒸煮的小麦或麸皮扩大培养酒曲(含多种微生物,可产生淀粉酶),再将酒曲与蒸煮后的糯米、大米混合,然后加足量酒母(含酵母菌)完成发酵,压榨得成品。下列叙述错误的是(
)A.小麦、麸皮可为酒曲微生物提供碳源和氮源B.将糯米等蒸煮可杀死杂菌并使淀粉更易分解C.酒母发酵时需频繁开盖搅拌以提高发酵效率D.黄酒酿造过程中伴随有pH下降和气体产生【答案】C【解析】A、小麦、麸皮含淀粉(碳源)和蛋白质(氮源),可为酒曲中的微生物(如霉菌)提供营养物质,A正确;B、蒸煮糯米可高温灭菌,同时使淀粉糊化,便于淀粉酶催化分解,B正确;C、酵母菌酒精发酵需严格厌氧环境,频繁开盖搅拌会引入氧气、增加杂菌污染风险,抑制酒精生成,降低发酵效率,C错误;D、酵母菌发酵产生CO₂(气体)和有机酸(如丙酮酸),导致pH下降,D正确。9.(2025·河南·一模)【新情境】水产养殖中嗜水气单胞菌常引发鱼类病害。为筛选高效拮抗菌,研究人员从患病鱼塘底泥中分离多种菌株并扩大培养。将各组菌株的无菌发酵滤液与未凝固的普通培养基(该温度不会对菌株造成影响)混合倒平板,冷却后中央接种嗜水气单胞菌,通过菌落生长情况筛选拮抗菌。下列叙述错误的是()A.在患病鱼塘底泥取样比清洁水域更容易获得嗜水气单胞菌拮抗菌B.平板中央接种嗜水气单胞菌后,需要放在恒温培养箱中正置培养C.可将等量无菌水与未凝固的普通培养基混合倒平板,冷却后接种作对照D.嗜水气单胞菌生长最受抑制的组别对应的菌株即为最高效拮抗菌【答案】B【解析】A、患病鱼塘底泥中存在嗜水气单胞菌,更有可能存在能抑制它的拮抗菌,所以在患病鱼塘底泥取样比清洁水域更容易获得嗜水气单胞菌拮抗菌,A正确;
B、平板中央接种嗜水气单胞菌后,应放在恒温培养箱中倒置培养,而不是正置培养,B错误;
C、将等量无菌水与未凝固的普通培养基混合倒平板,冷却后接种作对照,可排除培养基等其他因素对实验结果的干扰,C正确;
D、嗜水气单胞菌生长最受抑制的组别,说明该组菌株产生的物质对嗜水气单胞菌的抑制作用最强,对应的菌株即为最高效拮抗菌,D正确。故选B。10.(2025·四川泸州·一模)某种嗜盐细菌合成的聚羟基脂肪酸酯(PHA),可用于制造无污染的“绿色塑料”。下图是从咸水湖中寻找生产PHA的菌种的过程。下列叙述错误的是()A.配制步骤②③④的培养基时,需要高浓度的盐B.步骤③要使用固体培养基培养细菌,才能获得单菌落并纯化菌株C.最终获得的目标菌株,具有细菌数量与PHA含量的比值大的特征D.若从土壤中寻找菌种,则在②之前要对土壤浸出液进行梯度稀释【答案】C【解析】A、目标菌株是嗜盐细菌,因此配制培养基时需要高浓度盐以筛选嗜盐菌,A表述正确,A不符合题意;B、步骤③使用固体培养基才能形成单菌落,进而实现菌株的纯化,B表述正确,B不符合题意;C、目标菌株需要PHA产量高,应是“PHA含量与细菌数量的比值大”(即单位细菌产PHA多),而非“细菌数量与PHA含量的比值大”,C表述错误,C符合题意;D、从土壤中找菌种时,需对土壤浸出液梯度稀释,避免菌液浓度过高无法形成单菌落,D表述正确,D不符合题意。1.(2025·海南·高考真题)山兰酒以海南山兰早稻米为原料
添加酒曲,经传统发酵酿造而成,发酵结束后快速冷却酒液并过滤,可获得风味独特的清澈酒体。米熟化的均匀度、发酵温度均会影响酒的品质。下列有关叙述错误的是(
)A.酿造山兰酒所使用的酒曲为单一菌种B.充分蒸熟山兰米有利于淀粉糖化,为酵母菌提供更多的原料C.适宜的发酵温度有利于提高酶的活性,进而提高酒的产量D.快速冷却有利于保留酒液中易挥发的风味物质【答案】A【解析】A、酒曲在传统发酵中通常含有多种微生物,如霉菌(如根霉、曲霉)负责淀粉糖化,酵母菌负责酒精发酵,并非单一菌种,A错误;B、充分蒸熟山兰米可使淀粉糊化,便于酶(如淀粉酶)将其分解为葡萄糖等还原糖,为酵母菌发酵提供更多底物,B正确;C、发酵过程中,酶的活性受温度影响,适宜温度能提高酶促反应速率,促进酵母菌的酒精发酵,从而提高酒的产量,C正确;D、快速冷却可降低温度,减少酒液中易挥发的风味物质(如酯类)的损失,有助于保留独特风味,D正确。故选A。2.(2025·天津·高考真题)青霉素可采取液体发酵方式以青霉菌(一种需氧、多细胞丝状真菌)为生产菌株进行生产,过程中操作不当的是(
)A.用诱变或基因工程等途径得到的菌种进行接种B.监控pH、温度、溶解氧等参数C.用血细胞计数板实时监测活菌数量 D.用大肠杆菌为指示菌监测青霉素产量【答案】C【解析】A、诱变或基因工程等途径可改造青霉菌菌株,获得高产等优良菌种,用于接种发酵生产青霉素,操作恰当,A正确;B、发酵过程中,pH、温度、溶解氧等参数会影响青霉菌的生长和代谢,监控这些参数是必要的,操作恰当,B正确;C、血细胞计数板无法区分死菌与活菌,且青霉菌为多细胞丝状结构,难以分散计数,实时监测活菌数不准确,操作不当,C错误;D、大肠杆菌对青霉素敏感,可用大肠杆菌为指示菌,通过观察大肠杆菌的生长情况来监测青霉素产量,操作恰当,D正确。3.(2025·广西·高考真题)利用微生物分解厨余垃圾可实现资源的再利用。下列说法错误的是()A.厨余垃圾分解过程产生的热量,会影响分解效率B.对组成复杂的厨余垃圾再分类,可提高利用效率C.厨余垃圾中的淀粉,可作为微生物的碳源和氮源D.含盐量高的厨余垃圾,可选用耐高盐的微生物分解【答案】C【解析】A、微生物分解有机物时通过呼吸作用释放热量,若温度过高可能导致酶活性下降,从而影响分解效率,A正确;B、厨余垃圾成分复杂,分类后可根据不同成分选择适宜微生物或处理条件,提高分解效率,B正确;C、淀粉由C、H、O组成,仅含碳元素,可为微生物提供碳源,但无法提供氮源(氮源需含N元素),C错误;D、高盐环境会抑制普通微生物生长,但耐高盐微生物(如嗜盐菌)可适应此环境并分解有机物,D正确。4.(2025·贵州·高考真题)金龟子绿僵菌(Ma)是一种昆虫病原真菌,可以侵染某些农林害虫。Ma寄生时其孢子(单细胞后代)萌发后侵入昆虫体内大量增殖并产生毒素,导致寄主僵化、死亡。下列叙述错误的是()A.可利用Ma开发成微生物杀虫剂B.为分离Ma可从研磨的僵虫组织中取样C.稀释涂布平板法可用于分离样品中的MaD.接种培养Ma时使用的器具需消毒【答案】D【解析】A、金龟子绿僵菌(Ma)作为昆虫病原真菌,可通过寄生导致害虫死亡,符合微生物杀虫剂的特点,可用于生物防治,A正确;B、僵化死亡的昆虫体内含有大量Ma菌体,因此从研磨的僵虫组织取样是分离Ma的合理方法,B正确;C、稀释涂布平板法可通过梯度稀释和菌落形成来分离纯化微生物,适用于分离样品中的Ma,C正确;D、微生物培养中,接种环等直接接触菌种的器具需严格灭菌(如灼烧灭菌),而非仅消毒,消毒无法彻底杀灭微生物的芽孢或孢子,D错误。5.(2025·浙江·高考真题)猕猴桃醋生产的基本工艺流程如下,其中①②③表示发酵的三个环节,糖化是将淀粉转化为葡萄糖的过程。下列叙述错误的是()A.通过蒸煮可以杀灭猕猴桃自带的绝大多数微生物B.麸曲中曲霉的主要作用是对糖类进行氧化分解C.环节③需要通入无菌空气D.①②③都需要控制温度、pH等条件【答案】B【解析】A、蒸煮过程中高温可以破坏微生物的细胞结构等,从而杀灭猕猴桃自带的绝大多数微生物,A正确;B、麸曲中的曲霉主要作用是将淀粉等多糖分解为葡萄糖等单糖,而不是对糖类进行氧化分解,B错误;C、环节③是醋酸发酵,醋酸菌是好氧菌,所以需要通入无菌空气,C正确;D、①糖化过程、②酒精发酵、③醋酸发酵都需要适宜的温度和pH等条件来保证微生物的正常生长和代谢,D正确。6.(2025·重庆·高考真题)豆瓣酱是我国地方特色调味品,生产豆瓣酱时要将蚕豆瓣制作成豆瓣曲,再添加调料进一步发酵,下列说法错误的是(
)A.沸水浸泡能杀死蚕豆细胞,减少有机物消耗B.面粉可为菌种的快速繁殖和生长提供营养C.菌种中含有产蛋白酶和淀粉酶的微生物D.豆瓣酱的制备主要是利用厌氧微生物发酵【答案】D【解析】A、沸水浸泡能使蚕豆细胞死亡,从而减少细胞呼吸等对有机物的消耗,A正确;B、面粉中含有淀粉等营养物质,可为菌种的快速繁殖和生长提供营养,B正确;C、在发酵过程中需要将蛋白质和淀粉等分解,所以菌种中含有产蛋白酶和淀粉酶的微生物,C正确;D、从图中可以看出,在制作豆瓣曲过程中有翻拌操作,且整个过程不是完全密封的,说明主要利用的是好氧微生物发酵,而不是厌氧微生物发酵,D错误。7.(2025·四川·高考真题)微塑料由塑料废弃物风化形成,难以降解,会危害生态环境和人体健康。有人分离到X和Y两种微塑料降解菌,将总菌量相同的X、Y、X+Y(X:Y=1:1)分别接种于含有等量微塑料的蛋白胨液体培养基中,培养一段时间后测定微塑料的残留率(残留率=剩余量/添加量×100%),结果如下图。下列叙述正确的是(
)A.用平板划线法能测定X
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