DB21∕T 4398-2026 四角蛤蜊 种质

I

DB21/T4398—2026

四角蛤蜊种质

1范围

本文件给出了四角蛤蜊[Mactraveneriformis]的名称与分类、主要形态特征、繁殖生物学特征、

细胞遗传学特性、分子遗传学特性、检测方法和判定规则。

本文件适用于四角蛤蜊的种质检测与鉴定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T18654.2养殖鱼类种质检测第二部分：抽样方法。

GB/T32757贝类染色体组型分析

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4名称与分类

4.1学名

四角蛤蜊[Mactraveneriformis(Reeve,1853)]。

4.2分类地位

隶属于软体动物门（Mollusca）、双壳纲（Bivalvia）、帘蛤目（Veneroida）、蛤蜊科（Mactridae）、

蛤蜊属（Mactra）。

5主要形态特征

5.1外部形态

贝壳坚厚，略成四角形；两壳极膨胀；壳顶突出，位于背缘中央略靠前方，尖端向前弯；小月面及

楯面极明显，呈心形；外韧带细薄，不明显；贝壳具外皮，顶部白色，幼小个体呈淡紫色，近腹缘为黄

褐色，腹面边缘常有1条很窄的边缘。生长线明显粗大，形成凹凸不平的同心环纹；贝壳2片，左右对称；

贝壳内面白色，铰合部宽大，左壳具一个分叉的主齿，右壳具有2个排列成“八”字形的主齿；内韧带

发达，呈三角形，位于壳顶后方斜三角形韧带槽内。四角蛤蜊的外部形态见图1。

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图1四角蛤蜊外部形态

5.2内部构造

由左右外膜附着壳内面包围整个肉体形成外套腔，套膜分边缘、中央两部分；边缘部分肌肉发达较

肥厚、中央部分薄而透明。外套膜在后端腹侧着，形成两个水管，水管短而粗，两个水管紧靠，出水管

较入水管细而短，位于入水管背面；两水管的末端具有触手。体中部稍后方左右两侧有两个鳃瓣，鳃前

方左右各有两片唇瓣、唇瓣之间为口。外套腔偏前方有一略呈扁形的内脏块，其腹面为呈斧刀状的足。

心脏位于壳顶下方，内脏块背侧偏后，呈梭形带透明状。

5.3可数性状

5.3.1贝壳2片，左右对称。

5.3.2外套膜2片，左右两叶。

5.3.3鳃瓣左右各2片。

5.3.4左壳具主齿1枚，右壳具主齿2枚。

5.3.5内韧带1条。

6繁殖生物学特性

6.1性成熟年龄与性腺特征

雌雄异体，雌雄性腺肉眼观察无区别；首次性成熟年龄为1龄，成熟季节，雌、雄性生殖腺均为乳

白色。

6.2性比

雌雄性比约为1:1.08，雄性多于雌性。

6.3繁殖期

周年2次繁殖期。

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6.4产卵量

1龄～2龄四角蛤蜊第一次产卵量为1.3×106 粒～1.8×109 粒。

6.5精卵特征

沉性卵，卵径为70 μm～80 μm。精子分为头部、中段和尾部三部分。

7细胞遗传学特性

7.1染色体数

二倍体体细胞染色体数：2n=38.

7.2核型公式

染色体组核型公式：14M+14SM+10ST/T,NF=66。

8分子遗传学特性

8.1线粒体COⅠ基因序列片段（658 bp，GeneBank序列号：MN317133）

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8.2线粒体16srRNA基因序列片段（306 bp，GeneBank序列号：MN317133）

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9检测方法

9.1抽样

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参照GB/T18654.2的规定执行。

9.2主要形态构造检测

9.2.1外部形态

光线充足时，肉眼观察。

9.2.2可量性状

壳高和壳长按照定义描述用游标卡尺测量。

9.2.3内部构造

光线充足时，解剖后用解剖镜或肉眼观察。

9.3细胞遗传学检测

9.3.1抽样

参照GB/T18654.2的规定执行。

9.3.2染色体和核型

9.3.2.1染色体标本制备

参照GB/T32757的规定执行。

9.3.2.2核型分析

观察100个左右的分散良好的中期分裂相，记数确定二倍体数。从中挑选10个分散良好、形态清晰

的中期分裂相进行显微摄影、放大、测量，按GB/T32757的分类标准对染色体分类。

9.4分子遗传学检测

9.4.1DNA提取

取斧足肌肉30 mg，剪碎至糜状，DNA提取试剂盒或常规酚-氯仿方法提取总DNA,灭菌双蒸水溶解备

用。

9.4.2引物序列

COⅠ：LCO1490：5’-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3’，

HCO2198：5’-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3’；

16SrRNA：16S3L：5’-TGAGCGTGCTAAGGTAGC-3’，

16S4H：5’-AGCCAACATCGAGGTCGC-3’。

9.4.3PCR反应体系

DNA模板50 ng～100 ng、10×Buffer（500 mmol/LKCl；100 mmol/LTris-HCl，pH8.3；15 mmol/L

MgCl2）5 μL、上下游引物（10 μmol/L）各1 μL、Taq酶（5 U/μL）0.5 μL，dNTP混合液（10 mmol/L）

8 μL、超纯水定容至50 μL。

9.4.4PCR反应程序

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9.4.4.1COⅠ基因PCR反应程序

反应条件为：94 ℃预变性5 min；94 ℃变性30 s，45 ℃退火40 s，72 ℃延伸1 min，循环35 次；72 ℃

延伸10 min。每组PCR均设阴性对照来检测是否污染。

9.4.4.216SrRNA基因PCR反应程序

反应条件为：94 ℃预变性5 min；94 ℃变性30 s，50 ℃退火30 s，72 ℃延伸40 s，循环35次；72 ℃

延伸5 min。每组PCR均设阴性对照来检测是否污染。

9.4.5测序

产物直接测序，为了保证序列的准