CNAL C 2002.04B2-2005蛋白质一细胞色素C的氨基酸组成分析一氨基酸自动分析法_第1页
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文档简介

编号：CNALC2002.04B2-Protein—AminoacidcompositiondeterminationofcytochromeAminoacidcompositionautomatic中国实验室国家认可委员会公布 检测/校准标准和方法对于检测/校准活动的有效性具有至关重要ISO/IEC17025CNALCNAL经CNAL审查通过且纳入CNAL凡意愿将其非标准方法纳入CNAL检测方法目录的机构，均可向CNAL提出确认申请，经CNALCNALCCNALC2002.04B2-蛋白质—细胞色素CProtein—AminoacidcompositiondeterminationofcytochromeC—Aminoacidcompositionautomaticanalysis 本方法采用OP/FMOCC本方法适用于SDS对于细胞或组织等提取的全部蛋白质，进行SDS无水醋酸钠、醋酸、四氢呋喃均为国产分析纯；甲叉双丙烯酰胺为进口分装；乙腈、甲醇、为色谱纯；邻苯二甲醛、氯甲酸芴甲酯溶液、硼酸盐缓冲液（pH10.2）购自HewlettPackard氨基酸标准品，细胞色素CHewlettPackard1100HPLC（色谱条件：色谱柱C18ODS-Hypersil，1ml/min转印缓冲液：0.025mol·L-1Tris，0.192mol·L-1甘氨酸，20%蛋白提取液：水：乙腈：0.1%流动相：A：0.02mol·L-1醋酸钠,0.018%三乙胺，0.3%10%pH（pH7.2酸水解：将PVDF6mol/LHCl400μl，封口24h170氨基酸的测定：采用OP/FMOC将供试品（或其杂质）的峰面积或峰高带入对照品的线性回归方程yabx进行计算:Cx=(Axa)/bWx=(TCxVx/W)×式中：yabx,为对照品的线性回归方程；y―AR；x―rAx（或其杂质）ARCR（μg/mL；Cx（或其杂质）的浓度（μg/mL；Vx（mL；TW―供试品称样

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