（正式版）DB65∕T 4966-2025 《规模化牛场布鲁氏菌病净化技术规范》

DB65/T4966—2规模化牛场布鲁氏菌病净化技术规范2025-11-25发布2026-01-25实施I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则起草。第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件由新疆中科基因科技有限公司提出。本文件由新疆维吾尔自治区农业农村厅归口并组织实施。本文件起草单位：新疆中科基因科技有限公司、北京市动物疫病预防控制中心、新疆维吾尔自治区动物疫病预防控制中心、新疆维吾尔自治区质量基础发展研究院、乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心、昌吉州动物疾病预防控制中心、唯泰科生物科技(武汉)有限公司。本文件主要起草人：傅彩霞、施远翔、蔡扩军、张启龙、杨海峰、艾力·马合木提、陈懿、连晓春、冯发家、彭华刚、彭叶龙、蒲文兵、王校敏、吴小梅、栗云鹏、刘海莹、马晓燕、马倩若、夏圃青、陈本文件实施应用中的疑问，请咨询新疆中科基因科技有限公司。本文件的修改意见建议，请反馈至新疆维吾尔自治区农业农村厅(乌鲁木齐市新华南路408号)、新疆中科基因科技有限公司(新疆乌鲁木齐高新区(乌鲁木齐新市区)阜新街1号8号楼4层)、新疆维吾尔自治区市场监督管理局(乌鲁木齐市新华南路167号)。新疆维吾尔自治区农业农村厅联系电话传真邮编：830004新疆中科基因科技有限公司联系电话传真邮编：830011新疆维吾尔自治区市场监督管理局联系电话传真邮编：8300041规模化牛场布鲁氏菌病净化技术规范本文件规定了规模化牛场开展布鲁氏菌病净化有关生产管理、监测、调运监管、疫苗免疫和净化标准的技术要求。本文件适用于指导辖区内规模化牛场开展布鲁氏菌病净化工作。下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。污水综合排放标准畜禽养殖业污染物排放标准动物布鲁氏菌病诊断技术兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范牛羊布鲁氏菌病荧光偏振(FPA)检测方法牛布鲁氏菌A19-△VirB12分子标记疫苗鉴别诊断方法家畜布鲁氏菌LAMP检测方法牛羊布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验鉴别诊断方法下列术语和定义适用于本文件。由布鲁氏菌属细菌感染牛、羊等多种动物和人而引起的一种人兽共患传染病，临床上以生殖器官和胎膜发炎、流产、不育和各种组织的局部病灶为主要特征。规模化牛场large-scalecattlefarm依法取得《动物防疫条件合格证》,从事牛的生产经营，具备一定规模并具有独立法人资格的养殖场(包括种牛场、奶牛场、肉牛场)。在特定区域或场所采取措施，有计划地消灭布鲁氏菌病的过程，逐步达到该范围内个体不发病和无感染状态的目标。指因流产而排出母体的胚胎、胎儿以及相关的附属物，包括胎膜、胎盘等与妊娠相关的组织及羊水等物质。2RBT:虎红平板凝集试验(RoseBenSAT:试管凝集试验(SerumAgglutiniELISA:间接酶联免疫吸附试验(indirectEnzyme-LinkedImmunosocELISA:竞争酶联免疫吸附试验(competitiveEnzyme-LinkedImmunosorbFPA:荧光偏振试验(FluorescencePolarizationAssay)5.1.1场址选择地势较高、干燥、背风向阳、排水良好的地方，场地开阔、整齐，有足够的面积，一般每头成年牛占地面积在(15～20)m²,且要位于居民区的下风向和水源的下游。5.1.2场区位置独立，与主要交通干道、居民生活区、屠宰场、交易市场等的距离应符合《动物防疫5.1.4场区内按生物安全风险等级实施分区管理，办公区、生活区、生产区、隔离区、粪污处理区、病死畜无害化(暂存)处理区应严格分开。生产区距离其它功能区50m以上或通过物理屏障有效隔离。隔离区、粪污处理区和病死畜无害化(暂存)处理区应在生产区下风向。5.1.5场区内净道与污道应严格分开，互不交叉。如存在部分交叉，应有规定使用时间和科学有效的5.1.6场区内应有专门的产犊场地或产房。5.1.7场区内应有引种、患病动物隔离观察牛舍。5.1.8场区内应有独立兽医室，兽医室配备开展临床诊疗、采样、高压灭菌、消毒等的设施设备。5.1.9场区内应有固定的牛粪贮存、堆放场所，存放地点有防雨、防渗漏、防溢流措施。5.2.1场区入口处设置消毒通道或消毒池，消毒池的深度能保证入场最大吨位车辆的车轮外沿全部浸没消毒液中且不溢出，消毒池的长度至少超过入场最大吨位车辆车轮转动2次周长距离以上。5.2.2生产区入口应设置进出人员更衣、洗手、消毒等设施。有条件的可设置曲行通道、淋浴及进出5.2.4场区内应有与生产规模相匹配的废弃物(粪便、废水、垫料等)无害化处理设施，应有病死畜5.2.8场区内应有给排水设施，并符合GB8978和GB18596的环保要求。5.3.1牛场人员应每年定期进行健康检查，发现患有布鲁氏菌病的应调离岗位，及时治疗。3技术方法。5.5.1定期对场区出入口、场内、舍内况进行记录。消毒剂选择及使用方法详见附录A。5.5.4圈舍、场地、车辆等，宜选用2%～5%氢氧化钠、氯制剂、戊二醛等消毒剂消毒。定或委托病死畜无害化处理场进行处理。b)采用干湿分离的方式进行无害化处理，干湿分离后的固体有机肥可还田再利用，干湿分离后5.6.2建立日常生产管理制度。5.6.3建立适合本场的卫生防疫制度。5.6.4建立投入品(含饲料、兽药、生物制品)使用管理制度。5.6.5建立日常消毒制度和操作规程(包括人员、车辆、用具、设施、设备和环境等)及应急消毒处5.7.2规范使用耳标等各类个体标识。6监测46.1.1未接种布鲁氏菌病疫苗的12月龄以上的牛(孕牛在怀孕后1个月和生产前后1个月的除外)。6.1.2免疫接种布鲁氏菌病疫苗12个月后的牛。6.2.1布鲁氏菌病非免疫场的种牛、奶牛，每年全群开展2次布鲁氏菌病抗体监测，流产物进行病原学检测。肉牛场每年开展1次抽检。6.2.2布鲁氏菌病免疫牛场，在牛免疫后3周～4周，可采集适当数量的血样，评价免疫抗体转阳率。6.2.3对布鲁氏菌病免疫12个月后的奶牛，每3个月开展1次布鲁氏菌病抗体检测，流产物进行病原学检测，直至连续2次检测均为阴性的视为假定健康牛群，以后每年全群检测2次。6.2.4对布鲁氏菌病免疫12个月后的肉牛，每3个月开展1次布鲁氏菌病抗体抽检，流产物进行病原学检测，直至连续2次检测均为阴性的视为假定健康牛群，以后每年抽检1次。信水平CL=95%,疫病预定流行率P=3%),采用随机抽样，覆盖非免疫场各类牛群、免疫场成年牛不6.5.1.1RBT检测方法按照GB/T1866.5.1.2iELISA检测方法按照GB/T18646的规定执行。6.5.1.3FPA检测方法按照DB65/T4292的规定执行。6.5.2.1cELISA检测方法按照GB/T18646的规定执行。6.5.2.2SAT检测方法按照GB/T18646的规定执行。6.5.2.3牛布鲁氏菌活疫苗(A19-△VirB12株)iELISA鉴别诊断方法按照DB65/T4495的规定执行。6.5.2.4牛布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验鉴别诊断方法按照DB65/T4666的规定执行。6.5.2.5牛流产物的病原学检测方法按照GB/T18646或世界动物卫生组织(WOAH)推荐的病原检测方法(在符合生物安全标准的实验室进行)执行，或者按照DB65/T4527的规定执行。6.6.1按照本文件6.5.1.1～6.5.1.3的其中之一方法初筛检测，结果为阳性的，判定为疑似布鲁氏菌6.6.2非免疫牛，初筛为阳性，再按照本文件6.5.2.1或6.5.2.2或GB/T18646中非免疫牛其它确诊6.6.3免疫牛，初筛为阳性，再按照本文件6.5.2.3或6.5.2.4或GB/T18646中免疫牛其它确诊方法6.6.4按照本文件6.5.2.2判定为疑似布鲁氏菌感染牛，30d后应重新采血检测，如果仍为可疑，判56.8.2布鲁氏菌感染牛的同群牛需严格检测且限制贸易。需对该牛群所有性成熟牛进行连续2次布鲁氏菌病抗体检测；第1次检测在最后一例病例扑杀3个月后，第2次检测在扑杀之后的6个月～12个月之间。如2次检测仍为阳性，之后需每3个月进行1次检测，直至该牛群所有牛在连续2次检测中均7.1跨省区、跨地(州、市)调运活牛时，不应从布鲁氏菌病高风险区域(免疫区)向低风险区域(非免疫区)调运。7.2调入的乳用或种用牛应隔离饲养30d,经布鲁氏菌病检测为阴性，方可解除隔离，混群饲养。7.3如果需要调入牛，调入的牛应来自布鲁氏菌病非疫区，或是布鲁氏菌病非免疫牛。在调入前30d8.1.1不应对种牛进行布鲁氏菌病疫苗免疫。8.1.2对开展布鲁氏菌病免疫牛群的3月～8月龄健康犊牛进行布鲁氏菌病活疫苗免疫。8.1.3实施布鲁氏菌病活疫苗免疫12个月后可开展净化监测。使用有国家正式批准文号的牛用布鲁氏菌病活疫苗，从具有相应资应有符合要求的疫苗存放设备和管理制度，按照疫苗使用说明书的要求进行贮存。8.5疫苗使用69净化标准满足以下要求，视为达到净化标准：a)非免疫场各类牛群布鲁氏菌抗体检测为阴性，流产物的病原学检测为阴性；且牛场连续2年以上无布鲁氏菌病临床病例；b)免疫场布鲁氏菌病活疫苗免疫12个月后的成年牛布鲁氏菌抗体检测为阴性，流产物的病原学检测为阴性；且牛场连续2年以上无布鲁氏菌病临床病例。7DB65/T4966—2025(资料性)消毒剂选择及使用方法消毒剂选择及使用方法见表A.1。表A.1消毒剂选择及使用方法(稀)戊二醛溶液喷洒喷洒、浸泡以癸甲溴铵有效含量计，稀释成0.05%溶液，作用30min喷洒、擦拭、浸泡二氯异氰尿酸钠喷洒、浸泡以有效氯计，按照每1L水加0.2g使用喷洒、浸泡喷洒、浸泡以戊二醛计，配制成2%溶液，pH值调至7.5～7.8,消毒15min~20min或放置至干次氯酸钠溶液喷洒、喷雾、浸泡以次氯酸钠计，配制成2%次氯酸钠溶液含氯石灰(漂白粉)喷洒、浸泡配制成20%漂白粉混悬液使用，作用15mi喷洒、浸泡用生石灰加水配制成20%混悬液(石灰乳),取上清使用，喷洒、浸泡喷酒、喷雾、浸泡以本品计。喷雾消毒，1:250倍稀释；浸泡消毒，1:500二氯异氰尿酸钠喷洒、浸泡以有效氯计，按照每1L水加0.2g使用含氯石灰(漂白粉)喷酒、浸泡配制成20%漂白粉混悬液使用，作用15喷洒、浸泡用生石灰加水配制成20%混悬液(石灰乳),取上清使用：喷洒、浸泡含氯石灰(漂白粉)投加以本品计，按照0.2g/L投加，搅匀，作用30min溴氯海因投加以本品计，按照0.75g/L投加，搅匀，作用30min复合次氯酸钙粉时按照1:20倍稀释，50mL/m³,作用30min;临时消毒时按照1:15倍稀释，50mL/m³,作用30min以本品计，按照4g/L投加，搅匀，作用30min8表A.1消毒剂选择及使用方法(续)乙醇喷洒、涂抹、擦喷洒、涂抹、擦拭以