《临床基本检验》课件-07 脑脊液检验

第七章

其他体液检验第一节

脑脊液检验第一节

脑脊液检查1一、标本采集与处理2二、一般性状检查3三、显微镜检查4四、化学检查第一节

脑脊液检查（CSF）存在于各脑室、蛛网膜下腔和脊髓中央管内无色透明液体的细胞外液主要由脑室脉络丛细胞主动分泌和超滤作用形成。正常成人脑脊液的产生和重吸收保持动态平衡，总量维持在120ml～180ml左右，约占体液总量的1.5%。概述（一）脑脊液的生成★易通过脉络丛的有钠、镁、氯化物、CO2等；★部分通过的有蛋白质、葡萄糖、尿素、氨基酸、尿酸、乳酸及酶等；★不易透过的有胆红素、纤维蛋白原、补体、抗体、胆固醇等。正常情况下了解第一节

脑脊液检查①保护脑和脊髓免受外力震荡损伤。②调节颅内压力变化。③供给脑、脊髓营养物质,运走代谢产物。④调节神经系统碱储量、维持正常pH。⑤转运生物胺类物质，参与神经内分泌调节。（二）脑脊液生理功能了解第一节

脑脊液检查脑脊液含细胞及化学成分，其性状与压力受多种因素影响，中枢神经系统器质性病变（如感染、肿瘤等）可致其改变。检测脑脊液指标变化，对中枢神经系统疾病的诊断鉴别、治疗观察及预后判断具重要价值。（三）脑脊液与临床疾病了解第一节

脑脊液检查一、标本采集与处理脑脊液标本由临床医师通过腰椎穿刺的方式采集，必要时可从小脑延髓池或侧脑室穿刺采集。立即送检。（一）标本采集与运送第一节

脑脊液检查脑脊液标本抽取后，可用3支无菌试管收集，每管1～2ml。

第一管:生化和免疫学检查第二管:作细菌学检查第三管:作一般性状和显微镜检查重点第一节

脑脊液检查/2018

脑脊液第三管常用作A.蛋白质测定 B.细菌培养 C.细胞计数D.葡萄糖测定 E.免疫球蛋白测定C第一管CSF标本通常作A.细胞计数 B.化学检查 C.免疫学检查 D.细菌学检查 E.细胞学检查B第一节

脑脊液检查实验室工作人员应对送达实验室的标本进行核对和查验，对标本容器标识清晰、无明显外溢情况、标本量符合检验项目要求的脑脊液标本予以接收。标本接收后应尽快检验，一般不超过1小时。如不能及时检验，则将标本保存于2℃～8℃环境中，并保证在4小时内完成检验。标本久置可造成细胞变形或破坏，葡萄糖等物质分解，细菌溶解，从而影响检验结果的准确性。如标本存在信息不全、唯一性标识不清、标本外溢明显或量不足、或者存在其他影响检验结果准确性的因素时应予以拒收，记录并及时将标本不合格的情况反馈给送检科室。（二）标本接收与拒收了解第一节

脑脊液检查（一）颜色（二）透明度（三）凝固性二、一般性状检查（理学检验）第一节

脑脊液检查★蛛网膜下腔出血或脑出血，脑脊液离心后上清夜为淡红色或黄色（陈旧性出血），隐血试验阳性。★穿刺损伤（新鲜出血），脑脊液离心后上清液为无色，且上清液作隐血试验为阴性。（一）颜色1.参考区间无色透明2.临床意义

中枢神经系统发生感染、出血、肿瘤时，脑脊液的颜色可出现不同程度的改变。（1）红色：常因各种原因出血所致重点第一节

脑脊液检查

检查内容

新鲜出血陈旧性出血外观三管红色逐渐变淡三管红色均匀一致凝固性易凝固不易凝固离心后上清液颜色无色透明呈红色、淡红色或黄色红细胞形态无变化有皱缩上清液隐血试验多为阴性阳性白细胞计数不增高继发性或反应性增高脑脊液新鲜出血和陈旧性出血的鉴别第一节

脑脊液检查★蛛网膜下腔梗阻所致脑脊液滞留时，或疾病引起脑脊液内蛋白质含量＞1.5g/L时也可呈黄色，颜色的深浅与蛋白质含量成正比；★当血清胆红素＞171μmol/L或脑脊液中胆红素＞8.6μmol/L时，脑脊液可呈黄色；★标本采集后未及时检测，由于红细胞破坏，血红蛋白降解常呈淡黄色；★进食色素或脑脊液含黑色素时，脑脊液可呈黄色。（2）黄色：又称黄变症常见于脑及蛛网膜下腔的陈旧性出血。第一节

脑脊液检查（3）乳白色：由于白（脓）细胞增多所致，常见于各种化脓性细菌引起的化脓性脑膜炎。（4）绿色：见于铜绿假单胞菌、肺炎链球菌或甲型链球菌引起的脑膜炎等。（5）褐色或黑色：常见于脑膜黑色素瘤。第一节

脑脊液检查☆脑脊液中白细胞、红细胞、细菌、真菌或蛋白质含量增加可致混浊。（二）透明度1．参考区间清晰透明。2．临床意义

☆清晰透明：见于正常脑脊液，病毒性脑炎、神经梅毒等；☆乳白色混浊：见于化脓性脑膜炎；☆毛玻璃样混浊：见于结核性脑膜炎；☆血性混浊：穿刺损伤或颅内出血报告方式：以“清晰”、“微浑”、“混浊”等进行报告。重点第一节

脑脊液检查结核性炎脑膜炎的脑脊液呈脓性白色混浊A淡粉红色浑浊B淡黄绿色深浊C毛玻璃样浑浊D深棕色浑浊E提交单选题1分（三）凝固性脑脊液的凝固性可按“无凝块”、“有凝块”、“有薄膜”、“胶冻状”等描述。2．参考区间

无凝块、无沉淀，放置12小时～24小时后不形成薄膜。1．结果报告第一节

脑脊液检查☆化脓性脑膜炎患者的脑脊液一般在1小时～2小时内形成薄膜、凝块或沉淀；☆结核性脑膜炎的脑脊液放置12小时～24小时后形成薄膜或纤细凝块；☆蛛网膜下腔梗阻的脑脊液由于蛋白质含量明显增高，可呈黄色胶冻状。脑脊液同时出现胶样凝固、黄变症和蛋白质-细胞分离现象（蛋白质明显增高，细胞数正常或轻度增高），称为Froin-Nonne（弗鲁安氏）/凝块综合征，此为蛛网膜下腔梗阻脑脊液的特征。☆神经梅毒及脊髓灰质炎脑脊液中可出现絮状小凝块。3．临床意义当脑脊液内的蛋白质（特别是纤维蛋白原）含量增高超过10g/L时，可出现薄膜、凝块或沉淀。重点第一节

脑脊液检查A.0~1h内 B.1~2h内 C.2~12h内D.12~24h后 E.24~36h后D2017化脓化脑膜炎脑脊液出现凝块，常在脑脊液静置 B结核性脑膜炎脑脊液出现纤细的网膜，常在脑脊液静置第一节

脑脊液检查三、化学检查（一）蛋白质测定（二）葡萄糖测定

（三）氯化物测定第一节

脑脊液检查

健康人的脑脊液只含少量蛋白质，约为血浆蛋白含量的1%，主要为清蛋白。脑脊液蛋白质检查对中枢神经系统疾病诊断、鉴别诊断和疗效观察具有重要意义。

脑脊液蛋白质检查有定性试验和定量测定两大类方法。（一）蛋白质测定第一节

脑脊液检查

2）试剂：饱和苯酚（石碳酸）溶液（1）潘氏试验（Pandytest）3）简要操作：1）原理：脑脊液中的蛋白质与苯酚结合，形成不溶性蛋白盐而出现白色混浊或沉淀。取试剂2ml于试管中→垂直滴加脑脊液1滴～2滴→立即在黑色背景下观察结果，若出现白色混浊或沉淀即为阳性。此试验较敏感，不仅局限于球蛋白，当蛋白质浓度超过0.25g/L即可呈阳性反应，因此正常人脑脊液也可呈弱阳性反应。1.检验方法重点第一节

脑脊液检查

包括罗-琼试验和诺-爱试验。主要是利用半饱和硫酸铵沉淀球蛋白，出现白色混浊或沉淀。主要有磺基水杨酸-硫酸钠比浊法、邻苯三酚红钼络合法和双缩脲法等方法。（2）硫酸铵试验（3）脑脊液蛋白质定量测定

第一节

脑脊液检查①定性试验：潘氏试验阴性或极弱阳性；硫酸铵试验阴性。②定量测定：腰椎穿刺液：0.20g/L～0.40g/L；脑池液：0.10g/L～0.25g/L；脑室液：0.05g/L～0.15g/L。4.参考区间

第一节

脑脊液检查第一节

脑脊液检查

脑脊液蛋白质升高的核心机制是血脑屏障破坏、脑脊液循环梗阻或中枢神经系统炎症/损伤，导致血浆蛋白渗入脑脊液或脑脊液中蛋白合成增加化脓性脑膜炎表现为蛋白显著升高（1~5g/L及以上）结核性脑膜炎呈中度升高（0.5~3g/L）病毒性脑膜炎则轻度至中度升高（0.5~1.5g/L）

主要有葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法。●葡萄糖氧化酶法易受一些还原性物质干扰，特异性较低；●己糖激酶法不受轻度溶血、脂血、黄疸、维生素C及药物的干扰，特异性、准确性都高于葡萄糖氧化酶法。（二）葡萄糖测定1.检验方法

2．参考区间（己糖激酶法）

腰穿：2.5～4.4mmol/L脑池：3.0～4.4mmol/L延髓池：2.8～4.5mmol/L旧版成人：2.5～4.5mmol/L儿童：2.8～4.5mmol/L第一节

脑脊液检查

①化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎和真菌性脑膜炎：葡萄糖含量越低，预后越差。化脓性脑膜炎最明显②脑寄生虫病：如脑囊虫病、血吸虫病、肺吸虫病、弓形虫病等。③脑肿瘤，尤其是恶性肿瘤。④神经性梅毒。⑤低血糖等。3．临床意义①早产儿或新生儿：主要由于血-脑脊液屏障的通透性较高所致。②饱餐或静脉注射葡萄糖后，血液葡萄糖含量增高。③影响到脑干的急性外伤或中毒。④脑出血。⑤糖尿病等。（1）脑脊液葡萄糖降低：（2）脑脊液葡萄糖升高：病毒性脑膜炎葡萄糖浓度正常重点第一节

脑脊液检查

●目前临床常用的方法有硝酸汞滴定法、硫氰酸汞比色法、离子选择电极法、电量分析法、干化学分析法等。●其中离子选择电极法（ISE法）变异系数小，准确度和精密度良好，易于自动化，为使用最广泛的常规方法。（三）氯化物测定1．检验方法

2．参考区间

成人：120～130mmol/L；儿童：111～123mmol/L第一节

脑脊液检查

①脑部细菌或真菌感染：如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎及真菌性脑膜炎。结核性脑膜炎时，脑脊液中氯化物降低尤为明显，比葡萄糖降低出现得还要早，故对结核性脑膜炎与化脓性脑膜炎鉴别有一定价值。②低血氯症：各种原因如体内氯化物的异常丢失、摄入氯化物过少等引起血氯降低时，脑脊液中氯化物可随之降低。③呕吐、肾上腺皮质功能减退症和肾脏病变。④病毒性脑膜炎、脊髓灰质炎，脑脓肿、神经梅毒氯化物稍减低或正常。3．临床意义

尿毒症、脱水、心力衰竭和浆液性脑膜炎等。（1）氯化物降低主要见于：（2）氯化物升高主要见于：重点第一节

脑脊液检查脑脊液氯化物含量明显降低见于脑出血A脑肿瘤B化脓性脑膜炎C结核性脑膜炎D流行性乙脑E提交单选题1分

1.酶及乳酸测定：脑脊液常见的其他化学检查主要有酶及乳酸测定，其浓度增高的临床意义见下表。项目参考区间临床意义AST＜20U/L脑梗死、脑萎缩、中毒性脑病、急性颅脑损伤、中枢神经系统转移癌ALT＜15U/L同ASTLD＜40U/L化脓性脑膜炎、脑组织坏死、蛛网膜下腔出血、脑出血、脑梗死、脑肿瘤、脱髓鞘病急性期CK0.5～2U/L化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、进行性脑积水、继发性癫痫、多发性硬化症、蛛网膜下腔出血、脑脑瘤、脑供血不足、慢性硬膜下血肿等腺苷脱氨酶（ADA）0～8U/L结核性脑膜炎、脑出血、脑梗死、格林-巴利综合征等神经元特异烯醇化酶（NSE）1.14±0.39U/L脑出血、脑梗死、癫痫持续状态乳酸1.0～2.9mmol/L细菌性脑膜炎、脑供血不足、低碳酸血症、脑积水、癫痫发作或持续状态、脑脓肿、急性脑梗死、脑死亡溶菌酶无或含量甚微结核性脑膜炎增高的程度明显高于细菌性脑膜炎，且与病情变化相一致（四）其他第一节

脑脊液检查四、显微镜检查

（一）细胞总数计数（1）直接计数法：脑脊液混匀→充池→低倍镜计数→计算。因脑脊液中细胞数量少，因此，需计数2个计数池内四角和中央大方格共10个大方格内的细胞数。1．简要操作（2）稀释计数法：浑浊或血性的脑脊液，可用生理盐水或红细胞稀释液稀释后再充池计数，计算时乘以稀释倍数后再换算成每升脑脊液中的细胞总数。实验课学习第一节

脑脊液检查●直接计数法操作简便、省时，适用于细胞总数不多的脑脊液标本。2．方法学评价5．临床意义见白细胞分类计数。4．参考区间正常人脑脊液无红细胞；仅有少量白细胞。●稀释计数法适用于浑浊的脑脊液标本，但操作相对烦琐，存在稀释误差。第一节

脑脊液检查

（1）为避免脑脊液标本凝固，应尽快送检、尽快检验。遇高球蛋白标本时，可用EDTA盐抗凝。（2）脑脊液细胞计数应在标本采集后1小时内完成，以免放置过久，细胞变形、破坏或脑脊液凝固，导致计数不准确。（3）穿刺损伤导致的血性脑脊液，计数细胞总数无意义。（4）计数时注意新型隐球菌与白细胞、红细胞区别。新型隐球菌不溶于乙酸，加优质墨汁后可见不着色的荚膜。红细胞加酸后溶解；白细胞加酸后细胞核和细胞质更加明显。（5）细胞计数时，如发现较多皱缩或肿胀的红细胞，应在报告中予以描述，以帮助临床鉴别陈旧性或新鲜性出血。3．质量保证第一节

脑脊液检查

（二）白细胞计数1．简要操作（1）直接计数法：

适用于非血性的脑脊液标本。用微量吸管吸取冰乙酸后再全部吹出，使微量吸管内壁黏附少量冰乙酸，再吸入混匀的脑脊液标本，数分钟后混匀充入血细胞计数板内计数。（2）稀释计数法：

适用于浑浊或血性的脑脊液标本。用白细胞稀释液稀释脑脊液，充池计数白细胞。同细胞总数计数第一节

脑脊液检查4．参考区间

①成人：（0～8）×106/L。②儿童：（0～15）×106/L；新生儿：（0～30）×106/L。5．临床意义

见白细胞分类计数。第一节

脑脊液检查1．直接分类法

白细胞直接计数后，在高倍镜下根据细胞核形态分别计数多个核细胞（粒细胞）和单个核细胞（淋巴细胞、单核细胞和内皮细胞），共计数100个有核细胞，并以百分数表示多个核细胞和单个核细胞所占的比例。（三）白细胞分类计数2．染色分类法

取离心后的脑脊液沉淀物涂片，瑞氏或瑞-吉复合染色，分类方法与血液白细胞分类计数方法相同。如有内皮细胞，需要另作描述并报告。第一节

脑脊液检查

（1）标本：若标本陈旧、细胞变形时，白细胞直接分类法误差较大，应改用涂片染色。（2）涂片固定时间不能太长，温度不能过高，以免细胞皱缩难以分类；细胞涂片要均匀集中，以利于观察。（3）染色分类法标本离心时速度不宜太快、时间不宜过长，以减少细胞的破坏和变形。（4）染色分类时，如见内皮细胞、室管膜细胞应计入分类百分比中；若见肿瘤细胞，则另行描述报告。（5）若白细胞总数少于100个，则直接写出单个核细胞和多个核细胞各自的具体数字。4．质量保证第一节

脑脊液检查①成人：淋巴细胞40%～80%，单核细胞15%～45%，中性粒细胞0%～6%②新生儿：淋巴细胞5%～35%，单核细胞50%～90%，中性粒细胞0%～8%5．参考区间多为淋巴细胞及单核细胞（7∶3），偶见内皮细胞。（2）染色分类法：（1）直接分类法：第一节

脑脊液检查正常脑脊液中主要的白细胞是中性粒细胞A淋巴细胞B单核细胞C嗜碱性粒细胞D提交嗜酸性粒细胞E单选题1分●中枢神经系统病毒感染、结核性或真菌性脑膜炎时，细胞轻到中度增加，常以淋巴细胞为主；●细菌感染所致化脓性脑膜炎时，细胞数显著增加，以中性粒细胞为主；

●脑寄生虫病时，可见嗜酸性粒细胞增多；●脑室或蛛网膜下腔出血时，脑脊液内可见大量红细胞。6．临床意义

中枢神经系统病变时脑脊液细胞数可增多，其增多的程度及细胞种类与病变的性质有关。第一节

脑脊液检查结核性脑膜炎增殖期化脓性脑膜炎增殖期第一节

脑脊液检查

检查内容检查方法评

价细菌检查显微镜检查法将脑脊液离心后取沉淀物涂片进行革兰染色、抗酸染色，可初步判断细菌染色情况和形态特点。该法简单、快速，可以及时获得初步诊断，但阳性率较低细菌培养法排除污染因素，若培养出细菌可确诊细菌感染，并能确定细菌的种类以及进行药敏试验。缺点是耗时长，不能及时诊断ELISA法可以检查细菌的抗原和抗体，如检测脑脊液中抗结核分枝杆菌抗体水平，对结核性脑膜炎的诊断及鉴别诊断有较高价值真菌检查显微镜检查法将脑脊液离心后取沉淀物涂片进行墨汁染色，如发现新型隐球菌，可诊断新型隐球菌性脑膜炎真菌培养法排除污染因素，若培养出真菌可确诊，并能确定真菌的种类以及进行药敏试验。缺点是耗时长，不能及时诊断寄生虫检查显微镜检查法将脑脊液离心后取沉淀物涂片，发现寄生虫虫卵即可诊断脑寄生虫病。脑脊液中可发现血吸虫卵、肺吸虫卵、弓形虫、阿米巴滋养体等。该法简单、快速、可以确诊，但阳性率较低免疫学法ELISA法对诊断脑囊虫病具有高度的特异性。梅毒螺旋体荧光抗体吸收试验对神经梅毒诊断有较高的灵敏度和特异性（四）病原生物学检查第一节

脑脊液检查五、脑脊液检查临床应用熟悉第一节

脑脊液检查

1．化脓性脑膜炎

脑脊液细胞数明显增多，分类以中性粒细胞为主，蛋白质明