CN115961080B 一种马铃薯晚疫病恒温分子检测标记引物及检测方法 (四川儒愿生物科技有限公司)_第1页
CN115961080B 一种马铃薯晚疫病恒温分子检测标记引物及检测方法 (四川儒愿生物科技有限公司)_第2页
CN115961080B 一种马铃薯晚疫病恒温分子检测标记引物及检测方法 (四川儒愿生物科技有限公司)_第3页
CN115961080B 一种马铃薯晚疫病恒温分子检测标记引物及检测方法 (四川儒愿生物科技有限公司)_第4页
CN115961080B 一种马铃薯晚疫病恒温分子检测标记引物及检测方法 (四川儒愿生物科技有限公司)_第5页
已阅读5页,还剩11页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

一种马铃薯晚疫病恒温分子检测标记引物本发明公开一种马铃薯晚疫病恒温分子检序列表SEQIDNO:1~3所示的上游引物RAA_设计的RAA扩增引物与探针经与NCBI的核酸序列为25min时,RAA_LFD的最低检测下限为1×10_2AGTGGACTAATGCGTTGACGTCTTCGACGC_四氢呋喃(THF)_GATACTATTGCAGGC_SpacerC3_3'。3.一种基于权利要求1所述分子检测标记引物探针组的恒温分子检测方法,其特征在3而直接观察容易遗漏发病初期的植物材料,且致病疫霉引发的病害易与Pythiumspp.,备。目前比较常见的等温扩增技术有依赖核酸序列的扩增技术(Nuclearacidsequence_[0007]赵玉梅等基于Ypt1建立的马铃薯晚疫病RPA_LFD检测体系在模板浓度为40ng/μLYpt1建立的致病疫霉LAMP检测技术的最低检出限为128fg/μL。GauravVerma等基于ITS_14铃薯叶片样本材料基因组DNA作为模板,用RAA_Pi1F/RAA_Pi1R引物和Pi_Probe探针进行[0021]a)本发明设计的RAA扩增引物与探针经与NCBI的核酸序列数据库进行比对,确定2O9为使用质粒10倍51×10_2fg/μ1×10_6fg/μL。2O序列设计的RAA恒温检测引物与探针(见表1)。上游引物RAA_Pi1F核苷酸序列如序列表SEQ[0036]本实施例设计的RAA扩增引物与探针经与NCBI的核酸序列数据库(现今全球范围6[0041]本实施例所描述的马铃薯晚疫病恒温分子检测方法,是应用实施例1所述马铃薯[0047]为证明RAA_LFD恒温检测方法的灵敏度,克隆RAA_Pi1F/RAA_Pi1Rd的目的扩增片1043210copies/μL数量级的重组质粒溶液,用37℃/5min的RAA扩增条件进行7[0048]进一步以不同稀释倍数的低浓度重组质粒为模板,对RAA不同扩增时间下的最低叶片样本和6个未发病大田叶片样本)进行RAA_LFD扩增检测,结果显示所有样本均无检测

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论