2026年病理科切片制作规范试题及答案

2026年病理科切片制作规范试题及答案一、单项选择题（每题2分，共40分）1.以下哪种固定液最常用于病理切片制作的固定（）A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.苦味酸答案：A。甲醛是最常用的固定液，它能较好地保存组织的形态结构，使组织硬化，便于后续的切片等操作。乙醇多用于快速固定或脱水，丙酮常用于一些特殊组织的固定，苦味酸单独使用较少，一般和其他固定液混合使用。2.组织脱水的顺序通常是（）A.从低浓度乙醇到高浓度乙醇B.从高浓度乙醇到低浓度乙醇C.直接用高浓度乙醇D.直接用低浓度乙醇答案：A。组织脱水是从低浓度乙醇逐步过渡到高浓度乙醇，这样可以使组织内的水分逐渐被乙醇取代，避免组织因脱水过快而收缩变形。3.石蜡切片的厚度一般为（）A.12μmB.46μmC.810μmD.1215μm答案：B。46μm是石蜡切片比较合适的厚度，这个厚度能较好地展示组织的结构，便于显微镜观察。过薄可能导致组织成分丢失，过厚则会影响观察效果。4.苏木精伊红染色（HE染色）中，苏木精主要染（）A.细胞质B.细胞核C.细胞膜D.细胞间质答案：B。苏木精是一种碱性染料，能与细胞核内的酸性物质（如DNA）结合，将细胞核染成蓝色。伊红是酸性染料，主要染细胞质等成分。5.切片时出现切片破碎不连续，可能的原因是（）A.组织固定不充分B.切片刀不锋利C.组织脱水不彻底D.以上都是答案：D。组织固定不充分，组织质地不均匀，切片时容易破碎；切片刀不锋利，无法顺利切割组织，会导致切片破碎；组织脱水不彻底，组织含水量高，也会影响切片的完整性。6.用于包埋组织的石蜡熔点一般为（）A.3040℃B.4050℃C.5660℃D.6070℃答案：C。5660℃熔点的石蜡比较适合包埋组织，这个温度范围的石蜡在常温下能保持一定的硬度，便于切片操作，同时在包埋过程中也能较好地渗透到组织中。7.免疫组织化学染色中，封闭内源性过氧化物酶常用的试剂是（）A.过氧化氢B.甲醇C.柠檬酸钠D.胰蛋白酶答案：A。过氧化氢可以封闭内源性过氧化物酶，避免其在免疫组织化学染色过程中产生非特异性反应，影响染色结果。甲醇常用于固定，柠檬酸钠用于抗原修复，胰蛋白酶用于消化处理。8.冰冻切片的优点不包括（）A.能快速得到切片结果B.适用于手术中快速病理诊断C.组织形态保存好D.可以进行免疫组织化学染色答案：C。冰冻切片的速度快，能在短时间内得到切片结果，适用于手术中快速病理诊断，也可以进行免疫组织化学染色。但与石蜡切片相比，冰冻切片的组织形态保存相对较差，容易出现冰晶等影响观察的情况。9.脱蜡常用的试剂是（）A.乙醇B.二甲苯C.丙酮D.水答案：B。二甲苯是常用的脱蜡试剂，它能溶解石蜡，使切片中的石蜡去除，便于后续的染色等操作。乙醇主要用于脱水和复水，丙酮用于特殊情况，水不能脱蜡。10.切片染色后出现背景染色过深，可能的原因是（）A.染色时间过长B.洗涤不充分C.抗体浓度过高D.以上都是答案：D。染色时间过长会使染料过多地结合到组织上，导致背景染色过深；洗涤不充分，残留的染料会使背景颜色加深；抗体浓度过高，也会增加非特异性结合，使背景染色加重。11.组织取材时，一般要求组织块的大小为（）A.0.5cm×0.5cm×0.2cmB.1.0cm×1.0cm×0.3cmC.2.0cm×2.0cm×0.5cmD.3.0cm×3.0cm×1.0cm答案：B。组织块大小一般为1.0cm×1.0cm×0.3cm左右，这样的大小便于固定液充分渗透，也有利于后续的脱水、透明、包埋等操作。12.透明剂的作用是（）A.使组织透明B.去除组织内的水分C.使石蜡更好地渗透到组织中D.以上都是答案：D。透明剂既能使组织透明，便于观察，又能去除组织内的水分，还能作为石蜡和脱水剂之间的过渡，使石蜡更好地渗透到组织中。13.免疫组织化学染色中，阳性对照的作用是（）A.验证实验方法的可靠性B.排除非特异性染色C.确定抗原的表达部位D.以上都是答案：A。阳性对照是已知含有目标抗原的组织，通过对阳性对照进行染色，若能得到预期的阳性结果，说明实验方法可靠，操作过程正确。排除非特异性染色主要通过设置阴性对照等方法，确定抗原表达部位是免疫组织化学染色的目的之一，但不是阳性对照的主要作用。14.切片在载玻片上的粘贴常用的试剂是（）A.明胶B.甘油C.乙醇D.水答案：A。明胶可以使切片更好地粘贴在载玻片上，防止切片在后续染色等过程中脱落。甘油常用于封片，乙醇和水不能起到粘贴切片的作用。15.组织固定的时间一般为（）A.12小时B.46小时C.1224小时D.4872小时答案：C。1224小时是组织固定比较合适的时间，能使固定液充分渗透到组织中，达到较好的固定效果。时间过短固定不充分，时间过长可能会导致组织过度硬化。16.以下哪种组织需要特殊的固定方法（）A.肝脏B.肾脏C.脑组织D.肌肉组织答案：C。脑组织质地柔软，容易变形，需要特殊的固定方法，如先进行灌注固定等，以更好地保存其形态结构。肝脏、肾脏、肌肉组织一般采用常规的固定方法即可。17.染色过程中，分化的目的是（）A.去除多余的染料B.增强染色效果C.使染色更加均匀D.以上都是答案：A。分化的目的是去除组织中多余的染料，使染色更加清晰，突出目标结构。增强染色效果和使染色均匀不是分化的主要目的。18.切片制作完成后，封片常用的封片剂是（）A.甘油B.树胶C.乙醇D.水答案：B。树胶是常用的封片剂，它能使切片与盖玻片紧密结合，保护切片，同时具有良好的透明度，便于显微镜观察。甘油一般用于临时封片，乙醇和水不能用于封片。19.免疫组织化学染色中，抗原修复的方法不包括（）A.微波修复B.高压修复C.酶消化修复D.冷冻修复答案：D。抗原修复的方法有微波修复、高压修复、酶消化修复等，冷冻修复不是抗原修复的常用方法。20.切片制作过程中，脱水不彻底会导致（）A.切片易碎B.石蜡无法渗透C.染色不均匀D.以上都是答案：D。脱水不彻底，组织内含有较多水分，会使切片易碎；水分的存在会阻碍石蜡的渗透；同时也会影响染色效果，导致染色不均匀。二、多项选择题（每题3分，共30分）1.病理切片制作的基本步骤包括（）A.取材B.固定C.脱水D.透明E.包埋答案：ABCDE。病理切片制作首先要进行取材，获取合适的组织；然后进行固定，保存组织形态；接着脱水去除组织内水分；再进行透明处理，便于石蜡渗透；最后进行包埋，将组织包在石蜡中，以便切片。2.影响切片质量的因素有（）A.组织固定情况B.切片刀的锋利程度C.切片机的性能D.操作人员的技术水平E.组织的质地答案：ABCDE。组织固定不充分或过度固定都会影响切片质量；切片刀不锋利会导致切片不完整；切片机性能不佳会使切片厚度不均匀等；操作人员技术水平高低直接影响切片的质量；组织质地不同，如软硬程度、有无韧性等，也会对切片产生影响。3.苏木精伊红染色（HE染色）的优点有（）A.操作简单B.成本低C.能显示组织的基本结构D.可长期保存E.能进行免疫组织化学染色答案：ABCD。HE染色操作相对简单，成本较低，能清晰地显示组织的基本结构，如细胞核、细胞质等。染色后的切片可以长期保存。但HE染色不能进行免疫组织化学染色，免疫组织化学染色需要特定的抗体和方法。4.免疫组织化学染色的步骤包括（）A.切片脱蜡水化B.抗原修复C.封闭内源性过氧化物酶D.加一抗E.加二抗及显色答案：ABCDE。免疫组织化学染色首先要将切片脱蜡水化，使组织恢复到可进行染色的状态；然后进行抗原修复，暴露被掩盖的抗原；接着封闭内源性过氧化物酶，避免非特异性反应；再加入一抗与目标抗原结合；最后加入二抗及显色剂，使抗原抗体复合物显色。5.石蜡切片制作中，透明剂的选择应考虑（）A.透明效果B.对组织的损伤程度C.与石蜡的互溶性D.价格E.毒性答案：ABCDE。选择透明剂时，要考虑其透明效果，能否使组织充分透明；对组织的损伤程度要小，避免影响组织形态；要与石蜡有良好的互溶性，便于石蜡渗透；价格也是一个因素，要考虑成本；同时要考虑其毒性，尽量选择毒性小的透明剂。6.冰冻切片的缺点有（）A.组织形态保存不如石蜡切片B.切片厚度不易控制C.不能进行免疫组织化学染色D.容易出现冰晶E.不适用于手术中快速病理诊断答案：ABD。冰冻切片组织形态保存相对较差，容易出现冰晶影响观察；切片厚度不易控制，操作难度较大。但冰冻切片可以进行免疫组织化学染色，且适用于手术中快速病理诊断。7.组织固定的目的有（）A.防止组织自溶和腐败B.使组织硬化，便于切片C.保存组织的抗原性D.使组织保持生活时的形态结构E.便于染色答案：ABCDE。组织固定可以防止组织自溶和腐败，保持组织的原有状态；使组织硬化，便于后续的切片操作；能保存组织的抗原性，有利于免疫组织化学等检测；让组织尽可能保持生活时的形态结构；同时也便于后续的染色等处理。8.切片染色后出现染色过浅的原因可能有（）A.染色时间过短B.染料浓度过低C.组织固定不充分D.分化过度E.洗涤过度答案：ABCDE。染色时间过短，染料结合不足，会导致染色过浅；染料浓度过低，也会使染色效果不佳；组织固定不充分，影响染料的结合；分化过度会去除过多的染料；洗涤过度会将已结合的染料洗掉，都可能导致染色过浅。9.免疫组织化学染色中，阴性对照的作用有（）A.排除非特异性染色B.验证抗体的特异性C.确定抗原的表达部位D.评估实验的可靠性E.观察背景染色情况答案：ABDE。阴性对照是不含有目标抗原的组织，通过对阴性对照进行染色，若没有出现阳性结果，说明实验中没有非特异性染色，验证了抗体的特异性，也能评估实验的可靠性，同时可以观察背景染色情况。确定抗原的表达部位不是阴性对照的主要作用。10.切片制作过程中，脱水剂的选择应考虑（）A.脱水能力B.对组织的损伤程度C.与透明剂的互溶性D.价格E.毒性答案：ABCDE。选择脱水剂时，要考虑其脱水能力，能否有效去除组织内的水分；对组织的损伤程度要小，避免组织变形；要与透明剂有良好的互溶性，便于后续的透明处理；价格和毒性也是需要考虑的因素。三、简答题（每题10分，共30分）1.简述石蜡切片制作的主要步骤。答：石蜡切片制作的主要步骤如下：（1）取材：选取合适的组织，大小一般为1.0cm×1.0cm×0.3cm左右，尽量避免组织受挤压等损伤。（2）固定：将取材后的组织放入固定液中，常用的固定液是甲醛，固定时间一般为1224小时，使组织保持生活时的形态结构，防止自溶和腐败。（3）脱水：从低浓度乙醇到高浓度乙醇逐步脱水，使组织内的水分被乙醇取代，一般顺序为70%、80%、90%、95%、无水乙醇，每个浓度处理一定时间。（4）透明：用透明剂如二甲苯处理组织，使组织透明，同时去除乙醇，便于石蜡渗透。（5）浸蜡：将透明后的组织放入熔化的石蜡中，让石蜡充分渗透到组织中，一般经过23次浸蜡。（6）包埋：将浸蜡后的组织放入包埋模具中，加入熔化的石蜡，冷却凝固后形成含有组织的石蜡块。（7）切片：用切片机将石蜡块切成46μm厚的切片。（8）贴片：将切片粘贴在载玻片上，常用明胶等试剂。（9）脱蜡水化：用二甲苯脱蜡，然后通过不同浓度的乙醇进行水化，使组织恢复到可染色的状态。（10）染色：常用苏木精伊红染色（HE染色），苏木精染细胞核，伊红染细胞质等。（11）脱水透明：用乙醇脱水，再用二甲苯透明。（12）封片：用树胶等封片剂将切片封固，便于显微镜观察。2.分析免疫组织化学染色出现非特异性染色的原因及解决方法。答：免疫组织化学染色出现非特异性染色的原因及解决方法如下：原因：（1）抗体浓度过高：过高的抗体浓度会导致非特异性结合增加。（2）内源性过氧化物酶未封闭完全：内源性过氧化物酶会与显色剂反应，产生非特异性染色。（3）组织中存在交叉反应抗原：组织中可能存在与目标抗原结构相似的抗原，导致抗体的交叉反应。（4）洗涤不充分：残留的抗体等物质会导致非特异性染色。（5）孵育时间过长或温度过高：会增加非特异性结合的机会。解决方法：（1）优化抗体浓度：通过预实验确定合适的抗体浓度。（2）充分封闭内源性过氧化物酶：使用过氧化氢等试剂进行封闭，确保封闭完全。（3）选择特异性高的抗体：尽量选择经过验证的特异性高的抗体，减少交叉反应。（4）加强洗涤：增加洗涤次数和时间，确保去除残留的抗体等物质。（5）控制孵育条件：严格控制孵育时间和温度，避免过长时间或过高温度导致的非特异性结合。3.简述冰冻切片的操作要点及适用情况。答：冰冻切片的操作要点如下：（1）取材：尽快获取组织，避免组织干燥和损伤，取材大小适中。（2）冷冻：将组织放入冷冻剂（如液氮或干冰乙醇）中快速冷冻，使组织迅速降温，减少冰晶形成。（3）切片