（征求意见稿）《结构油脂 (OPO型) 甘油三酯酶法制备技术规范》

ICS67.200.10CCSX14T/GDPF团体标T准Technicalspecificationforenzymaticpreparationofstructuredlipids(OPO-type)广东省食品生产技术协会发布I 2规范性引用文件 3术语和定义 4技术要求 5试验方法 6检验规则 7包装、储运及标签 本文件按照GB/T1.1—2020的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由广州雅禾生物科技有限公司提出。本文件由广东省食品生产技术协会归口。本文件起草单位：暨南大学、广州市雅禾生物科技有限公司、暨科优脂（佛山）科技研发有限公司、广州工商学院。本文件主要起草人：张震、艾洪增、汪勇、鲁玉侠。1结构油脂(OPO型)甘油三酯酶法制备技术规范本标准规定了以三棕榈酸甘油三酯和油酸为原料，通过特异性脂肪酶催化酸解反应制备结构油脂(OPO型)甘油三酯的技术要求、试验方法、检验规则及标签、包装、运输和贮存要求。本标准适用于以酶法酸解反应工业化制备1,3-二棕榈酸-2-油酸甘油三酯(OPO)含量不低于45%的结构油脂产品。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB2716食品安全国家标准植物油GB4806.5食品安全国家标准玻璃制品GB4806.7食品安全国家标准食品接触用塑料材料及制品GB4806.9食品安全国家标准食品接触用金属材料及制品GB4806.13食品安全国家标准食品接触用复合材料及制品GB5009.168食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定GB/T6543运输包装用单瓦楞纸箱和双瓦楞纸箱GB7718食品安全国家标准预包装食品标签通则GB/T10004包装用塑料复合膜、袋干法复合、挤出复合GB28050食品安全国家标准预包装食品营养标签通则GB/T28118食品包装用塑料与铝箔复合膜、袋国家市场监督管理总局令第70号《定量包装商品计量监督管理办法》3术语和定义3.1结构油脂structuredlipids通过化学或酶法改性，改变天然油脂中脂肪酸在甘油三酯骨架上的组成和/或位置分布而制成的油3.2OPO型甘油三酯OPO-typetriglycerides特指在甘油三酯的sn-1和sn-3位为棕榈酸（P），sn-2位为油酸（O）的甘油三酯分子，即1,3-二棕榈酸-2-油酸甘油三酯。23.3酶法酸解enzymaticacidolysis在脂肪酶催化下，甘油三酯与游离脂肪酸之间发生酯交换反应，生成新的甘油三酯和游离脂肪酸的过程。4技术要求4.1原料要求4.1.1三棕榈酸甘油三酯：纯度（以三棕榈酸甘油三酯计）应不低于85%。4.1.2油酸：纯度（以顺式-9-十八碳烯酸计）应不低于95%，应符合相关食品级标准。4.2脂肪酶要求应选用具有sn-1,3位置特异性的脂肪酶，如来源于Thermomyceslanuginosus的固定化脂肪酶（TLIM）。酶制剂应符合国家相关食品添加剂标准，推荐使用固定于大孔阴离子树脂等载体的固定化酶以提升操作稳定性。4.3生产过程控制要求4.3.1投料比：三棕榈酸甘油三酯与油酸的投料摩尔比应控制在1:(7.5-8.5)范围内。4.3.2反应温度：应控制在65℃-75℃范围内。4.3.3搅拌速率：机械搅拌速率应控制在350r/min-450r/min范围内。4.3.4反应时间：核心酸解反应时间应不少于5小时。反应终点可通过监控产物中OPO含量或酸值变化确定。4.4产品质量指标4.4.1感官要求：常温下为白色至淡黄色固体或半固体，具有产品特有的油脂气味，无异味。4.4.2理化指标：应符合表1规定。表1理化指标酸值（以KOH计）/（mg/g）≤4.4.3食品安全指标：应符合GB2716的规定。5试验方法5.1取样：反应结束后，经离心或过滤去除固定化酶，收集反应油脂作为样品。35.2OPO含量测定5.2.1原理：样品经适当衍生化后，采用气相色谱法（GC）或银离子色谱结合气相色谱法（Ag+-HPLC/GC）分离并测定甘油三酯的组成，通过对比标准品保留时间或质谱定性，面积归一化法或内标法定量计算OPO占总甘油三酯的百分比。5.2.2仪器与试剂：1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯标准品:纯度≥99%。二十一烷酸甘油三酯标准品:纯度≥99%。正己烷:色谱纯。氮气,纯度≥99.999%。配备氢火焰离子化检测器的气相色谱仪5.2.3分析步骤：5.2.3.1气相色谱参考条件如下：a）色谱柱：配备毛细管柱（Rtx-65TG，30m×0.25mm内径，0.1μm膜厚）；b）程序升温：初始炉温为280℃并保持1.5min，随后以10℃/min的速率升温至340℃并保持9.5min。最后以1℃/min的速率升至350℃并保持12min；c）检测器温度：360℃e）载气：氢气；f）流速为40mL/min，分流比设定为1:25（v/v）；5.2.3.2前处理：1、标准溶液制备二十一烷酸甘油三酯标准溶液（1mg/mL）：称取50mg二十一烷酸甘油三酯标准品，加入适量的正己烷溶解，定容至50ml。1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯标准溶液（2mg/mL）：称取200mg1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯标准品，加入适量的正己烷，定容至100mL。混合标准溶液（0.2mg/mL）的配制：移取2.0mL二十一烷酸甘油三酯标准溶液（1mg/mL）和1.0mL1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯标准溶液（2mg/mL）于10mL容量瓶中，加入适量的正己烷稀释至刻度，摇匀。2、样品溶液制备称取20mg样品至25mL离心管中，用少许正己烷溶解，混匀。加入2.0mL二十一烷酸甘油三酯标准溶液。用正己烷定容至刻度，摇匀。3、测定在规定的色谱条件下，取标准溶液和样品溶液各1.0μL，于气相色谱仪中测量，记录所得的标准溶液中组分峰面积和试样溶液中组分的峰面积。44、结果计算1、试样中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯质量分数wi，按式(A.2)计算：式中：Ai——试样溶液中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的峰面积；AR——试样溶液色谱图中二十一烷酸甘油三酯的峰面积；fi——1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的校正因子；R——二十一烷酸甘油三酯的浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)；VR——试样溶液中加入二十一烷酸甘油三酯的体积，单位为毫升(mL)；m——试样的质量，单位为毫克(mg)。2、1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的校正因子fi，按式(A.3)计算：式中：AY——混合标准溶液中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯或棕榈酸甘油三酯的峰面积；S——混合标准溶液中十七碳酸甘油三酯的浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)；AS——混合标准溶液中十七碳酸甘油三酯的峰面积；Y——混合标准溶液中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯或棕榈酸甘油三酯的浓度，单位为毫克每毫在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。6检验规则6.1原辅料入库检验每批原辅材料入库前，应由本企业质量部门按标准进行验收，合格后方可入库。6.2组批由同一批投料生产的同一品种为一批。56.3抽样在每批产品中随机抽取，抽样数量不少于6个包装且总量不少于2kg，平均分成2份，1份检验，1份备查。净含量偏差检验的抽样方法以及数量按JJF1070的规定执行。6.4产品检验6.4.1出厂检验6.4.1.1产品出厂前对产品进行检验，符合产品要求方可出厂。6.4.1.2出厂检验项目：感官要求、酸价、过氧化值、净含量。6.4.2型式检验6.4.2.1正常生产时每半年进行一次型式检验；有下列情况时也应进行型式检验。a)新产品投产前；b)更换生产设备时；c)原辅材料产地或供应商发生改变时；d)停产三个月以上，恢复生产时；e)出厂检验的结果与上次型式检验的结果有较大差异时；f)食品安全监督部门提出要求时。6.4.2.2型式检验项目包括要求中的全部项目。6.5判定规则检验项目全部符合本标准时，判定为合格。检验结果中若有指标不符合本标准要求时，允许加倍抽样对不合格项目进行复检，如仍有1项指标不合格，判该批产品为不合格品。7包装、储运及标签7.1标志：应符合GB/T191的要求。7.2标签：应符合GB7718、GB28050和《食品标识管理办法》的要求。标签还应符合卫健委（原卫生部、卫计委）相关公共中的标签、标识的要求。在营养成分表中标示OPO含量。7.3包装材料：产品采用复合膜、袋包装，应符合GB4806.13、GB/T10004、GB/T28118的要求；或采用塑料制品包装，应符合GB4806.7的要求；或采用玻