定点标记蛋白赋能细胞药物高效可重复性检测

定点标记蛋白：赋能细胞药物高效、可重复性检测3定点标记蛋白在细胞药物检测中的优势细胞治疗概述与质量控制挑战21体内CAR靶向递送检测新工具的开发与应用4代表性产品及数据主要内容义翘神州01义翘神州细胞治疗概述与质量控制挑战CAR的结构与功能：如何在杀伤癌细胞中发挥作用CAR的基本结构CAR-T细胞的杀伤作用CAR-TcellPerforin,

Granzyme,

&

Cytokine

ReleaseAntigen

RecognitionTarget

AntigenCancer

CellCancer

Cell

DeathAntigen

Recognition

EventTriggers

Cytolytic

ActivityThrough

CAR

ActivationAnd

Intraccllular

SignalingInsert

gene

for

CARChimeric

antigenreceptor

(CAR)CAR-immune

cellAntigen-recognitiondomainSignalingdomains义翘神州经过复杂体外操作，终产品为活细胞，状态复杂提取来自患者的血液

样本免疫细胞（T细胞）将非活性病毒基因导入T细胞T细胞产生嵌合抗原受体（CAR）。CAR-T细胞识别并靶向癌细胞CAR-T细胞在体外增殖质量控制PK血药浓度检测CAR细胞浸润检测义翘神州CAR-T细胞回输到患者体内CAR-T细胞附着在癌细胞并对进行其攻击癌细胞被消灭体外CAR-T细胞的制备流程CAR-T细胞的关键质量属性——阳性率《CAR-T

细胞治疗产品质量控制检测研究及非临床研究考虑要点》义翘神州CAR-T细胞流式检测试剂(1)

Protein

L(2)

F(ab')2

fragment(3)&(4)

Antigen-specific

detection

reagentsSchanda,

N.

et

al.

doi:

10.3390/cells10113208义翘神州CAR-T细胞流式检测试剂Anti-idiotype

Ab(1)

Protein

L(2)

F(ab')2

fragment(3)&(4)

Antigen-specific

detection

reagentsSchanda,

N.

et

al.

doi:

10.3390/cells10113208义翘神州CAR-T细胞流式检测试剂Property

Protein

LAnti-F

(ab’)2Anti-idiotypeAbAntigen-fluorophoreOne-step

stainingCompatibility

w/Ab

panelsCompatibility

w/FcXreagentsSpecificiy

for

CARR&D

cycleNoNoNoNoYesYesYesYesYesYesInconsistentInconsistentLowLowShortShortHighHighMediumLong义翘神州定点标记蛋白：位点和氨基酸特异性标记批内均一性和批间一致性好，更适于复杂细胞药物的检测传统化学标记（非定点标记）和定点标记传统化学标记定点标记常用伯氨基、巯基反应性试剂位点特异性反应试剂义翘神州02义翘神州义翘神州定点标记蛋白策略、优势及应用义翘神州定点标记蛋白开发策略标记位于蛋白N或C末端表达纯化加接头标记义翘神州义翘神州定点标记优势传统化学标记在特定氨基酸类型上标记标记位置及数量随机

可能影响构象及活性均一性差批间差大表位暴露多样化工艺较简单定点标记在末端标签上标记标记数量确定保持天然构象和活性批内高度均质性

批间高度一致性表位暴露充分工艺复杂VS义翘神州义翘神州定点标记：主要标记物类型AF类小分子APCPE义翘神州定点标记蛋白的应用定点蛋白标记不仅适用于所有传统化学标记的场景，还具备更优异的稳定性和均一性应用方向细胞药物检测PK研究义翘神州抗体筛选蛋白互作研究基于光学的检测实验CAR细胞质控血液中CAR细胞药物含量测定等定点标记蛋白应用场景——细胞药物检测义翘神州Ying

et

al.

doi:

10.1186/s12885-021-07934-1操作步骤少，时间短不需二抗，特异性高信号、批间一致性高定点标记蛋白应用场景——细胞药物组织定位CAR特异性与肿瘤表面抗原及荧光标记抗原同时结合，IHC组织定位义翘神州定点标记蛋白应用场景——抗体筛选FACS分选抗原维持天然活性，表位暴露较充分批内均一性高，分选结果可靠和非定点标记蛋白互为补充义翘神州对表位和距离有要求的分子互作定点荧光标记不影响分子间互作，两荧光基团间距离可设计确保产生高信号强度的荧光共振能量转移（FRET）定点标记蛋白应用场景——蛋白互作研究义翘神州荧光信号收集定点荧光标记不影响分子间结合可利用荧光信号直接检测不需第二抗体，操作简便定点标记蛋白应用场景——蛋白互作检测义翘神州03义翘神州代表性产品及数据定点标记蛋白的质量控制PBMC批检放行用高质量蛋白进行标记活性验证、稳定性验证CAR细胞批检放行纯度验证批间一致性验证123456义翘神州定点标记蛋白数据：CD19-AF

647Cat#:

11880-H08W1-SGPBMC检测CAR-293检测CAR和PBMC细胞批检放行，严格质控义翘神州定点标记蛋白数据：CD19-AF

647Cat#:

11880-H08W1-SGBLI：Inebilizumab

+

CD19Protein-AF647，kD=

0.651

nM11880-H08W1，标记前，Ec50=26.9

ng/mL11880-H08W1-SG，标记后，Ec50=25.3ng/mLAF

647标记不影响CD19活性义翘神州37℃加速7天不影响活性（等同于-20℃一年）冻融10次不影响活性冻融稳定性义翘神州加速稳定性(37℃)定点标记蛋白数据：CD19-AF

647Cat#:

11880-H08W1-SG定点标记蛋白数据：CD19-APCCat#:

11880-H08W1-SAPBMC检测CAR-293检测CAR和PBMC细胞批检放行，严格质控义翘神州竞品对比冻融10次不影响活性，同等条件信号强度高于竞品冻融稳定性义翘神州定点标记蛋白数据：CD19-APCCat#:

11880-H08W1-SA定点标记蛋白案例：CD19-PECat#:

11880-H08W1-SP批间一致性、冻融稳定性好，同等条件信号高于竞品CAR-293检测义翘神州竞品对比冻融稳定性批间一致性定点标记蛋白案例：BCMA-PECat#:

10620-H86H-SPPBMC检测CAR-293检测CAR和PBMC细胞批检放行，严格质控义翘神州定点标记蛋白稳定性：BCMA-PECat#:

10620-H86H-SP冻融10次不影响活性，同等条件信号强度高于竞品竞品对比冻融稳定性BCMA-PE-F0(293cells)BCMA-PE-F0BCMA-PE-F5BCMA-PE-F10义翘神州NormalizedTo

Mode101

102103104105106

107PE定点标记蛋白案例：BCMA-APCCat#:

10620-H86H-SA竞品对比义翘神州冻融稳定性冻融10次不影响活性，同等条件信号强度高于竞品CD38：表位适配性CAR检测——N端标记和C端标记区别10818-H86H-SA：C端标记10818-H85H-SA：N端标记义翘神州CD38：表位适配性CAR检测——N端标记和C端标记区别10818-H86H-SA：C端标记识别中间表位CAR优于C端表位10818-H85H-SA：N端标记两种CAR均可很好识别义翘神州定点标记蛋白稳定性：CD38-APCCat#:

10818-H85H-SA冻融稳定性

批间一致性冻融10次不影响活性，批间一致性高义翘神州定点标记蛋白稳定性测试-B7-H3Cat#:

11188-H86H-SD37℃加速14天不影响活性（等同于-20℃两年）冻融10次不影响活性冻融稳定性加速稳定性(37℃)义翘神州定点标记蛋白纯度、批间一致性验证标记前对照：标记前；Lot1~3：标记后标记后B7-H3未标记B7-H3-AF

488-Lot1B7-H3-AF

488-Lot2B7-H3-AF

488-Lot3Cat#:

11188-H86H-SD标记后纯度和活性不受影响，批间一致性高116KDa

M

B7-H3

KDa

M

B7-H311666.266.245.045.035.035.025.025.018.414.4义翘神州18.414.4流式检测CAR-293：推荐使用浓度9

μg/mL定点标记蛋白使用量推荐在使用时进行滴定，根据CAR的表达丰度确定合适用量，以获得最佳信噪比义翘神州04义翘神州体内CAR靶向递送检测新工具的开发与应用经过复杂体外操作，终产品为活细胞，状态复杂提取来自患者的血液

样本免疫细胞（T细胞）将非活性病毒基因导入T细胞T细胞产生嵌合抗原受体（CAR）。CAR-T细胞识别并靶向癌细胞CAR-T细胞在体外增殖质量控制PK血药浓度检测CAR细胞浸润检测义翘神州CAR-T细胞回输到患者体内CAR-T细胞附着在癌细胞并对进行其攻击癌细胞被消灭体外CAR-T细胞的制备流程In

vivo

CAR简介无需体外生产流程，工艺较简单，周期短，成本低2025年研究火热Tcell

TransfectionVirusNanoparticlesIn

vivo

CAR-T

TherapyDeathof

cancer

cellsCART义翘神州cellGene

EditingNucleusIn

VivoCAR示例义翘神州图片来自虹信公司公众号靶向递送靶点的抗体肿瘤标志物CAR定点标记靶点蛋白用于检测血药浓度定点标记CD19蛋白使用定点标记蛋白表征递送载体定点标记蛋白精准检测LNP表面功能抗体，信号稳定、批间一致性好定点标记CD8蛋白Proprietary

anti-CD8

AntibodyFragmentCD19

CAR

mRNAProprietary义翘神州lonizableLipid:

ILB-3132PBMC检测

CAR-293检测义翘神州CAR和PBMC细胞批检放行，严格质控Cat#:

CT038-H2586H-SA

CD3D

&

CD3E

-

APC定点标记蛋白案例—CD3D&CD3E微球偶联抗体检测结合活性定点标记蛋白案例—CD3D&CD3ECat#:

CT038-H2586H-SA CD3D

&

CD3E

-

APCUnstained0.02μL/Test0.04μL/Test0.1μL/Test0.26μL/Test0.64μL/Test1.6μL/Test4μL/Test10μL/Test义翘神州PBMC检测CAR-293检测同等条件下信号高于竞品Cat#:

CT038-H2586H-SDCD3D

&

CD3E

–

AF

488定点标记蛋白案例—CD3D&CD3E竞品对比义翘神州微球偶联抗体检测结合活性定点标记蛋白案例—CD3D&CD3ECat#:

CT038-H2586H-SD CD3D

&

CD3E

–

AF

488Unstained0.03μg/mL0.08μg/mL0.2μg/mL0.51μg/mL1.28μg/mL3.2μg/mL8μg/mL20μg/mL义翘神州PBMC检测CAR-293检测CAR和PBMC细胞批检放行，严格质控Cat#:

10400-H86H-SGCD4-AF

647定点标记蛋白案例—CD4义翘神州定点标记蛋白案例—CD4微球偶联抗体检测结合活性Cat#:

10400-H86H-SGCD4-AF

647Unstained0.03μg/mL0.08μg/mL0.2μg/mL0.51μg/mL1.28μg/mL3.2μg/mL8μg/mL20μg/mL义翘神州体内CAR靶向递送相关产品列表义翘神州靶点货号标记类型CD3D

&

CD3ECT038-H2586H-SDAF

488CD3D

&

CD3ECT038-H2586H-SGAF

647CD3D

&

CD3ECT038-H2586H-SPPECD3D

&

CD3ECT038-H2586H-SAAPCCD8

A10980-H86C-SPPECD8

A10980-H86C-SAAPCCD410400-H86H-SDAF

488CD410400-H86H-SGAF

647CD410400-H86H-SPPECD410400-H86H-SAAPCCD511027-H86H-SDAF

488CD511027-H86H-SGAF

647CD511027-H86H-SPPECD511027-H86H-SAAPCCD711028-H86H-SDAF

488CD711028-H86H-SGAF

647CD711028-H86H-SPPECD711028-H86H-SAAPC其它CAR细胞检测产品（非定点标记）货号产品名称标记应用111774-R0013-FWhitlow

218

linker

Antibody

(FITC),

Rabbit

MAbFITCFCM111774-R0013-PWhitlow

218

linker

Antibody(PE),

Rabbit

MAbPEFCM111774-R0013-DWhitlow

218

linker

Antibody

(AF

488),

Rabbit

MAbAF

488FCM111774-R0013-GWhitlow

218

linker

Antibody(AF

647),

Rabbit

MAbAF

647FCM111774-R0013-BWhitlow

218

linker

Antibody

(Biotin),

Rabbit

MAbBiotinFCM111774-R0013-AWhitlow

218

linker

Antibody(APC),

Rabbit

MAbAPCFCM11044-H07E-PRecombinant

Protein

L

(PE

conjugated)PEFCMGS

linkerWhitlow218linker义翘神州CAR-immune

cell生物试剂

CRO服务10,000+重组蛋白15,000+抗体50,000+基因ELISA试剂盒、无血清培养基、

GMP级核酸酶...义翘神州坚持自主研发生产，打造生命科学研究和