DB34∕T 3719-2020 染井吉野樱组培育苗技术规程

ICS65.020.01CCSB2134DB34/T3719—2020染井吉野樱组培育苗技术规程TechnicalregulationsfortissuecultureofPrunus×yedoensis2020-11-27发布2020-12-27实施安徽省市场监督管理局发布DB34/T3719—2020I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由安徽省林业高科技开发中心提出。本文件由安徽省林业局归口。本文件起草单位：安徽省林业高科技开发中心、界首市佳祺农业开发有限公司、安徽天润建筑工程集团有限公司、芜湖市雨田润农业科技股份有限公司、安徽林业职业技术学院、合肥市包河区林业工作站、安徽省农科院农业工程研究所、皖西盐肤木研究所、利辛县东方美景园林绿化工程有限公司。本文件主要起草人：许早时、朱谦、任杰、汪耀、许娟、沈国良、纪坤、殷勇、姚瑶、刘若森、李春生、李葵阳、孙刚、孟可、孔伶俐、李媛、张作坊、胡仲华、江鸿超、雷经洋。DB34/T3719—20202染井吉野樱组培育苗技术规程本文件规定了良种染井吉野樱（Prunus×yedoensis）组培育苗中外植体材料的选择、消毒灭菌、初代培养、继代培养、生根培养、炼苗、移植、苗期管护、质量标准、包装标签和运输、档案记录管理等技术要求。本文件适用于染井吉野樱组培育苗生产作业。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB3095环境质量标准LY/T2289林木种苗生产经营管理档案LY/T2290林木种苗标签危险化学品安全管理条例中华人民共和国国务院令第645号3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1植物组培planttissueculture将从植物体分离出的符合需要的组织、器官或细胞及原生质体等材料，通过无菌操作接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株的技术。3.2将消毒后的外植体或干净培养材料在无菌条件下接入培养容器内培养基中的过程。3.3消毒disinfection通过物理、化学方法去除物体表面大部分有害病原微生物（孢子除外）的过程。3.4灭菌sterilization通过物理和化学方法杀灭一切微生物（包括孢子等）的过程。3.5外植体explant从自然生长的活体植物上获取的用于建立植物组培快繁体系的起始材料。3.6初代培养primarycultureDB34/T3719—20203直接从机体取下的细胞、组织和器官等材料的培养。3.7继代培养subculture将培养材料从老培养基中转接入新鲜培养基中继续培养的过程。3.8生根培养rootingculture将继代增殖后的无根芽苗转接至生根培养上诱导生根培养得到完整的植株的过程。3.9炼苗acclimatization炼苗是在保护地育苗的情况下，采取放风、降温、适当控水等措施对幼苗强行锻炼的过程。4外植体材料的选择4月～6月从染井吉野樱健壮母株上截取半木质化的腋芽茎段或顶芽等器官作为组培快繁体系的外植体材料。5消毒灭菌5.1洁净用1%～2%的洗衣粉水浸泡20min～30min，用软毛刷去除外植体表面的尘土等杂质，再用流动的自来水冲洗2h～4h。5.2消毒洁净后的外植体材料至超净工作台上用质量分数70%～75%乙醇消毒8s～15s后，用无菌水清5.3灭菌用15%次氯酸钠溶液浸泡8min～15min，用玻璃棒搅拌；无菌水冲洗4次～6次，最后用无菌纱布或无菌滤纸吸干外植体表面水珠后待用。消毒剂按照GB3095及中华人民共和国国务院令第645号的规定执行。6初代培养诱导培养基为MS+BA0.5mg/L～1.0mg/L+NAA0.02mg/L+TDZ2.0mg/L～3.0mg/L+蔗糖20g/L~30g/L+琼脂5.5g/L～6.5g/L。将经过消毒处理后的染井吉野樱腋芽茎段或顶芽切成1.5cm～2.5cm小段接种至上述培养基中。先在22℃~25℃条件下全暗培养5d～7d，然后置于每天光照10h~12h，光照强度1500lx～2000lx的培养室中培养，25d左右继代一次，直至诱导形成丛生芽。7继代培养继代培养基为1/2MS+BA0.5mg/L～0.8mg/L+NAA0.05mg/L～0.08mg/L+蔗糖20g/L～30g/L+琼脂5.5g/L～6.5g/L。将4.3获得的丛生芽分切成芽块至继代增殖培养基中，置于每天光照10h～12h，DB34/T3719—20204光照强度约2000lx，培养温度22℃~25℃的条件下培养，多次反复切割进行继代增殖培养，直至得到健壮丛生芽。8生根培养生根培养基为1/2MS+NAA0.01mg/L～0.02mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5.5g/L～6.5g/L。将4.4获得的高度约为2.5cm～3.5cm的健壮芽分切接种至生根培养基中，接种后先在22℃~25℃左右条件下暗培养0d～5d，然后置于光照10h～12h，光照强度2000lx，温度为22℃~25℃左右的培养室中培养30d～35d即可出瓶。9炼苗9.1生根苗移植条件在培养容器中生长的根、茎、叶俱全的完整植株，苗高3.5cm～5.5cm，基部长出3根～5根不定根时，即可进行炼苗。9.2炼苗方法将培养容器松开容器盖放置在有散射光的温室中3d～5d，温度控制在（25±5）℃。10.1移植时间生根瓶苗一般在春季（3月～5月）或秋季（9月～11月）炼苗移植为宜。10.2栽培基质装入穴盘中并稍压实待用。取出组培苗，放入自来水中将表面培养基漂洗干净，并用75％可湿性多菌灵粉剂1500倍溶液浸泡20min～30min，最后用自来水冲洗一次。操作过程中注意轻拿轻放。10.4移植方法在穴盘基质上打孔，孔径1cm左右，孔深3cm。将洗净的组培苗植入孔中，保持根系舒展。10.5摆放穴盘苗按移植日期在温室苗床上整齐摆放。11苗期管理11.1缓苗期管理DB34/T3719—20205缓苗期大约15天左右。温度应控制在15℃~30℃；每天定期给幼苗喷雾保湿，叶片周围湿度保持在7590遮光率70％左右。11.2幼苗期管理待15d长出新叶、新根后便进入温室正常管理。温室大棚相对湿度保持在6070％。11.3施肥移植4周～8周内，每周可喷施高氮型叶面肥（N：P：K=40：20：20）)一次，稀释浓度为2000倍液。8周后视植株生长情况，调整施肥的肥料种类、浓度和次数。12质量标准12.1组培苗质量标准在培养容器中生根培养30天～35天，生根苗达表1合格苗标准即可出瓶。表1染井吉野樱组培生根苗质量标准无12.2组培穴盘苗的质量标准温室培育40d后，穴盘苗达表2合格苗标准即可出圃。表2染井吉野樱穴盘苗质量标准变异率低于5%无无13包装、标签和运输13.1包装DB34/T3719—2020613.1.1组培苗产品按照客户（或者订单）要求包装。13.1.2琼脂苗包装：琼脂苗保留在培养容器中，培养容器整齐摆放于泡沫箱，箱外再用纸箱包装，超过25℃泡沫箱应加冰袋。为防止上下倒置，运输时可使用托盘。13.1.3无琼脂苗包装：生根组培苗洗去琼脂后，先装入小塑料盒（袋），再放在泡沫箱里，箱外再用纸箱包装，超过25℃泡沫箱应放冰块。13.1.4穴盘苗包装：穴盘装在小纸箱内，再将小纸箱装入大纸箱内，每箱装3个～4个穴盘，运输时宜使用托盘。13.2标签注明树种、品种、苗龄、原产地、产地、质量指标、生产日期、林木种子生产经营许可证编号、植物检疫证明编号、苗批号、备注（对于进口苗木、转基因材料繁殖的苗木、授权品种苗木以及药剂处理等的苗木进行备注）。按照L