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文档简介

2026届高考一轮复习第52讲

动物细胞工程考情分析1.从命题题型和内容上看,选择题:常以基础概念、原理和技术流程为考查点,如动物细胞培养的条件、单克隆抗体制备的步骤等。选项设置可能会涉及一些易混淆的知识点,考查学生对概念的准确理解和辨析能力。该题型难度相对较低,但需要学生对基础知识有扎实的掌握等。解答题:通常会以一个具体的动物细胞工程技术应用为背景,如克隆动物的培育、单克隆抗体的制备等,要求学生回答相关的原理、操作步骤、注意事项以及结果分析等问题。这种题型难度较高,注重考查学生的综合运用能力、逻辑思维能力和语言表达能力。2.从命题思路上看,从以下几个方面进行考查(1)注重实验与探究能力考查:可能会给出实验目的、材料和部分实验步骤,让学生设计实验方案、预测实验结果或分析实验现象;(2)考查知识的综合运用:将动物细胞工程与其他知识点,如细胞的结构和功能、细胞的生命历程、基因工程等相结合,考查学生对生物学知识的整体把握和综合运用能力。复习目标1.考查细胞结构与功能的适配性。(生命观念)2.通过技术流程推导考查逻辑思维,借助流程图、示意图考查建模能力,要求学生理解“核移植技术中供体细胞与受体细胞的选择逻辑”。(科学思维)3.以实验情境考查探究能力,结合技术改进考查创新思维,如“如何优化动物细胞培养的培养基成分以提高细胞存活率”,引导学生基于现有技术提出合理创新方案。(社会责任)考情解码·考点定标动物细胞培养动物细胞融合动物细胞核移植动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。一、动物细胞培养1概念:动物体组织单个细胞细胞生长和增殖取出分散适宜条件①从动物体取出的成块组织中,细胞与细胞靠在一起,彼此限制了生长和增殖;②能使细胞与培养液充分接触,更易进行物质交换。细胞增殖(有丝分裂)原理:目的:获得细胞或细胞产物;不能获得完整动物个体未体现动物细胞的全能性地位:动物细胞工程的基础一、动物细胞培养(1)营养条件①培养基构成:糖类、氨基酸、无机盐、维生素等+

血清等天然成分合成培养基

将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。(人们对动物细胞所需营养物质尚未全部研究清楚,动物血清中某些含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质。)②培养基的物理性质:液体培养基(也称为培养液)培养瓶培养皿无菌防止细菌污染①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理②在无菌环境下进行操作③添加一定量的抗生素无毒定期更换培养液清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。(2)无菌、无毒的环境2培养条件:一、动物细胞培养(3)适宜的温度、pH和渗透压①适宜的温度:哺乳动物细胞培养的温度多以

为宜;②适宜的pH:多数动物细胞生存的适宜pH为

;③适宜的渗透压:36.5±

0.5℃7.2~7.4(与相应动物内环境的理化性质保持一致)维持细胞正常的形态和功能。(4)适宜的气体环境①主要气体成分:②培养仪器:——细胞代谢所必需的——维持培养液的pHO2CO2用培养皿或松盖培养瓶,在含有___________和_________的混合气体的____________

95%空气5%CO2CO2培养箱CO2培养箱培养皿松盖培养瓶一、动物细胞培养1.取动物组织②原因:①材料的选择:

幼龄动物

or

老龄动物2.分散成单个细胞①原因:成块组织中,细胞与细胞靠在一起,彼此限制了生长和增殖一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。这些组织的细胞分化程度低,增殖能力强,容易培养。②方法:用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理取动物组织分散成单个细胞胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理3培养过程:一、动物细胞培养3.制成细胞悬液用培养液将细胞制成细胞悬液。将细胞悬液放入培养皿或培养瓶内,置于适宜环境中进行原代培养。取动物组织制成细胞悬液分散成单个细胞加培养液悬浮生长类:贴壁生长类:体外培养的动物细胞类型能够悬浮在培养液中生长增殖。需要贴附于某些基质表面才能生长增殖。这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。——细胞贴壁注意:培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。原代培养:

指动物组织经处理后的初次培养。(大多数)进行原代培养酶处理一、动物细胞培养一、动物细胞培养会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。除受以上因素影响外,还会发生接触抑制现象。接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂增殖的现象。数量不再增加。[思考3]悬浮培养的细胞和贴壁细胞能一直分裂增殖吗?为什么?悬浮生长类:贴壁生长类:一般的正常细胞并不重叠于其他细胞之上生长,而是单层生长。而癌变细胞细胞没有接触抑制现象,可以在培养瓶中形成多层细胞。思考:如何解决正常细胞体外培养分裂受阻的问题呢?(1)收集细胞①悬浮生长类:直接用离心法收集②贴壁生长类:重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集(2)将收集的细胞制成细胞悬液,分瓶培养4、分瓶、进行传代培养【思考3】进行传代培养时,如何处理悬浮细胞和贴壁细胞?传代培养:

指分瓶后的细胞培养。注意:区别原代培养和传代培养就看是否分瓶!取动物组织制成细胞悬液进行原代培养分瓶进行传代培养细胞贴壁接触抑制分散成单个细胞胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理第一次使用的目的是使组织细胞分散开;贴壁细胞传代培养时使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来,分散成单个细胞,便于分瓶后继续培养一、动物细胞培养细胞株细胞系原代培养传代培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代单个细胞加培养液用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理一、动物细胞培养部分细胞的细胞核型可能会发生变化,增殖缓慢,甚至完全停止。大部分细胞衰老死亡;(有限细胞系)少数细胞会克服细胞寿命的自然极限,获得不死性,这些细胞已经发生了突变,正朝癌细胞发展。(遗传物质改变)(无限细胞系)10代以内,保持细胞正常的二倍体核型(遗传物质不改变)。思考:“细胞增殖到互相接触的时候,糖蛋白识别了这种信息,就会使细胞停止继续繁殖,出现接触抑制的现象”试结合上述解释,举例说明哪种细胞无接触抑制现象,并阐述原因。癌细胞;癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少肿瘤细胞失去接触抑制,条件适宜在培养液可以无限增殖下去。一、动物细胞培养思考:进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞,这说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,当pH大于6时,胃蛋白酶就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性,所以用胃蛋白酶不行。一、动物细胞培养

如图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线,图中B、E两点表示经筛选、分装后继续培养。据图分析:(1)原代培养和传代培养的分界点是哪个?(2)AB段和DE段繁殖速度缓慢的原因是什么?(3)E点后的细胞大多数具有异倍体核型,这样的细胞有什么特点?B点之前的培养称为原代培养,之后的培养称为传代培养。拓展:AB段发生了接触抑制;DE段细胞大部分衰老失去分裂能力。E点后的细胞属于细胞系,遗传物质已经改变,正朝癌细胞发展,能无限增殖。一、动物细胞培养项目动物细胞培养植物组织培养理论基础细胞增殖植物细胞的全能性培养前处理无菌;用机械的方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理,使组织分散成单个细胞无菌、离体取材动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织植物幼嫩的部位或花药等培养基性质液体固体一、动物细胞培养植物组织培养和动物细胞培养的比较项目动物细胞培养植物组织培养培养基成分糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等水、矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和琼脂等结果产生大量细胞,不形成新个体可产生新个体应用人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产快速繁殖、作物脱毒、细胞产物的工厂化生产和单倍体育种等相同点①都需人工条件下的无菌操作;②都需要适宜的温度、pH等条件;③都进行有丝分裂,都不涉及减数分裂一、动物细胞培养1、干细胞动物和人体内仍保留的_______________________________的细胞。在一定条件下,干细胞可以分化成其他类型的细胞。存在于_______________________和_____________等多种组织和器官中。少数具有分裂和分化能力早期胚胎、骨髓脐带血2、分布3、分类一、动物细胞培养胚胎干细胞分布特点局限性实例早期胚胎中具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。必须从胚胎中获取,涉及伦理问题;因而限制了在医学上的应用。需要分化诱导因子诱导一、动物细胞培养4、干细胞类型和特点成体干细胞分布特点运用实例实例成体组织或器官内具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力①造血干细胞(骨髓、外周血和脐带血中)②神经干细胞(神经系统中)③精原干细胞(睾丸中)治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病(如帕金森病、阿尔茨海默病等)治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病造血干细胞→神经干细胞→发现最早、研究最多的、应用最成熟的实例一、动物细胞培养

通过体外诱导小鼠成纤维细胞,获得了类似胚胎干细胞的一种细胞,称为诱导多能干细胞,简称iPS细胞①诱导及流程病人各种类型的细胞导入特定基因导入特定蛋白小分子化合物成纤维细胞T细胞B细胞iPS细胞分化取出移植(3)诱导多能干细胞一、动物细胞培养iPS细胞用于治疗人类疾病示意图及视频取成纤维细胞转入相关因子细胞转化为iPS细胞诱导iPS细胞定向分化为多种组织细胞移植回病人体内①诱导及流程一、动物细胞培养诱导多能干细胞获取方法优点运用

①诱导过程无须破坏胚胎②iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞,将它移植回病人体内后,理论上可以避免免疫排斥反应。①将特定基因或特定蛋白导入细胞②用小分子化合物诱导形成。①可治疗镰状细胞贫血症②在治疗阿尔兹海默病、心血管疾病等领域的研究也取得了新进展(3)诱导多能干细胞一、动物细胞培养(原因:iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞)例1、悬浮培养的动物细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累等而分裂受阻。生产上常用灌流式培养避免这些现象出现。灌流式培养是在细胞培养管内,一边不断注入新鲜培养基,一边将培养液的上清液不断移出。下列相关叙述正确的是(

)A.灌流式培养的细胞会贴壁生长,但不会出现接触抑制现象B.灌流是在细胞密度达到一定浓度或营养物质低于一定浓度时进行的C.灌流速率越高,营养物质利用越充分D.培养管通常放置在95%O2和5%CO2的环境中悬浮培养的动物细胞不出现贴壁生长现象灌流速率过高,可能会使营养物质不能得到充分利用95%空气和5%CO2的混合气体习题巩固

胚胎工程的理论基础考点一

考向2胚胎早期发育知识夯基

考向研析1.下列关于桑葚胚和囊胚的叙述,错误的是(

)A.桑葚胚的各细胞结构、功能基本相同B.囊胚期细胞分化是由遗传物质突变引起的C.囊胚期的细胞出现了细胞分化,但遗传物质未发生改变D.囊胚期内细胞团和滋养层细胞的差异不是DNA复制水平上的差异,而是转录水平上的差异囊胚期的细胞进行有丝分裂,遗传物质一般不变;内细胞团和滋养层细胞内遗传物质相同,蛋白质不同,是转录水平上的差异。例2、干细胞的成功培养是动物细胞培养领域的重大成就之一,干细胞有着广泛的应用前景。下列关于干细胞的叙述,正确的是(

)A.干细胞存在于早期胚胎、脊髓和脐带血等多种组织和器官中B.不同类型的干细胞,它们的分裂和分化潜能基本是相同的C.可以用成纤维细胞、B细胞、T细胞等细胞来制备iPS细胞D.由于科学技术飞速进步,干细胞在临床治疗方面已不存在任何问题骨髓它们的分化潜能是有差别的还面临一些问题,如存在导致肿瘤发生的风险习题巩固1动物细胞融合技术1.概念:指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。2.原理:细胞膜具有一定的流动性3.结果:形成杂交细胞4.诱导方法:与植物原生质体融合的方法相同物理法电融合法等化学法聚乙二醇(PEG)融合法生物法灭活病毒诱导法动物细胞融合特有细胞核的融合→具有原来两个或多个细胞的遗传信息。6.

意义:突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。至今,种间、属间、科间、甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得了成功。5.融合实质及完成的标志:二、动物细胞融合技术与单克隆抗体“灭活病毒”中“灭活”的具体含义是什么?灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么?灭活:指用物理或化学手段使病毒失去感染能力(不感染细胞),

但是并不破坏病毒的抗原结构(诱导细胞融合)。原理:病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞相互凝集,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。二、动物细胞融合技术与单克隆抗体植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞融合成功的标志主要用途意义遗传信息细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞物理法:电融合法、离心法;化学法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法PEG融合法、电融合法、▲灭活病毒诱导法再生出细胞壁细胞核的融合获得完整的杂种植株获得杂交细胞,主要用于制造单克隆抗体打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能具有原来两个或多个细胞的遗传信息二、动物细胞融合技术与单克隆抗体2单克隆抗体及其应用①方法:②缺点:(1)传统抗体的获得抗原产量低、特异性差纯度低、向动物体内反复注射某种抗原动物细胞融合动物细胞培养单克隆抗体一种B淋巴细胞(只分泌一种特异性抗体)骨髓瘤细胞(癌细胞)能在体外无限增殖杂交瘤细胞既能迅速大量增殖,又能产生专一抗体(2)大量制备单一抗体的思路:二、动物细胞融合技术与单克隆抗体从患骨髓瘤的小鼠体内取骨髓瘤细胞,培养多种已免疫B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合小鼠的脾脏中获取注射特定的抗原,从小鼠脾中获得能产生特定抗体的淋巴B细胞方法:电融合法、PEG融合法、灭活病毒诱导法等(3)制备过程:二、动物细胞融合技术与单克隆抗体2杂交瘤细胞(多种)13置于选择培养基上培养第一次筛选诱导融合后的细胞BBBB1-瘤瘤瘤瘤B2-瘤B3-瘤第一次筛选:用特定的选择培养基进行筛选,在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞才能生长。二、动物细胞融合技术与单克隆抗体【第一次筛选】获得杂交瘤细胞①细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基喋呤阻断。②B淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但不能分裂增殖。

③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径,但能不断分裂增殖。筛选出杂交瘤细胞方法?培养基中加入氨基嘌呤(HAT选择培养基)B淋巴细胞及同型融合细胞不能无限增殖,死亡骨髓瘤细胞及同型融合细胞不能合成DNA,死亡杂交瘤细胞能无限增殖,生长二、动物细胞融合技术与单克隆抗体方法:用培养液

稀释培养杂交瘤细胞(多种)每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞克隆化培养、抗体检测抗原—抗体特异性结合原理:抗体检测呈

阳性的杂交瘤细胞

多孔细胞培养板阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞,挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释,一般需进行3~4次,直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。阳性孔第二次筛选:获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞二、动物细胞融合技术与单克隆抗体单克隆抗体制备过程中两次筛选的比较项目第一次筛选第二次筛选筛选原因目的

筛选方法

筛选出杂交瘤细胞筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以经选择培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞用特定的选择培养基(HAT培养基)筛选:未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞才能生长。克隆培养、抗体检测:用多孔细胞培养板培养,在每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞的情况下进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选得到足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。诱导融合后得到的细胞中,除杂交瘤细胞之外,还有未融合的亲本细胞,也有融合的具有同种核的细胞二、动物细胞融合技术与单克隆抗体体外培养单克隆抗体体内或体外培养将抗体检测为阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔杂交瘤细胞在小鼠腹腔内培养较体外培养相比有何优点?

优点:缺点:规模小,产量少不需培养基,易于控制培养条件(如无需提供无菌环境等),操作简单,成本较低优点:可大规模培养,大量生产缺点:需要人为控制培养条件,成本相对较高二、动物细胞融合技术与单克隆抗体优点灵敏度高、特异性强、可大量制备准确地识别抗原的细微差异与特定抗原发生特异性结合应用①作为诊断试剂——最广泛的应用抗人绒毛促性腺激素单克隆抗体比原来诊断方法提前了10d左右,准确率在90﹪以上。诊断优点:具有准确、高效、简易、快速特点二、动物细胞融合技术与单克隆抗体②用于治疗疾病和运载药物(主要用于癌症治疗)如:单克隆抗体+药物=“生物导弹”优点:位置准确、疗效高、副作用小ADC抗体药物接头ADC被细胞吞噬②①⑤细胞凋亡单克隆抗体+接头+药物(如细胞毒素)=ADC瞄准装置爆炸装置发挥靶向运输作用发挥治疗效应。如杀伤靶细胞。其作用机理是通过单克隆抗体的靶向作用特异性地识别肿瘤细胞表面抗原,然后利用细胞本身具备的内吞作用使化学药物进入肿瘤细胞体内发生药力,从而达到杀死肿瘤细胞的目的。实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。二、动物细胞融合技术与单克隆抗体例1、下列关于动物细胞融合的说法,错误的是(

)A.动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程B.融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞C.灭活的病毒中“灭活”是指用物理或化学手段破坏它的抗原结构D.细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能这里的“灭活”是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力,但并不破坏其抗原结构习题巩固例2、下列有关制备单克隆抗体的叙述,错误的是(

)A.先用胃蛋白酶处理得到单个细胞,然后用诱导剂处理得到杂交瘤细胞B.两次筛选的目的分别是筛选出杂交瘤细胞和筛选出能产生特定抗体的杂

交瘤细胞C.采用的细胞工程技术包括动物细胞培养和动物细胞融合D.运用的生物学原理包括细胞增殖和细胞膜的流动性等需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理习题巩固1动物细胞核移植技术将动物的一个细胞的细胞核,移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。供体受体克隆动物1.概念:2.原理:动物细胞核的全能性3.生殖方式:无性生殖→保持优良性状4.类型:胚胎细胞核移植:体细胞核移植:细胞分化程度低,表现全能性容易细胞分化程度高,表现全能性十分困难动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植三、动物体细胞核移植技术和克隆动物胚胎细胞核移植体细胞核移植相对容易因为分化程度低,全能性容易表现因为分化程度高,全能性较难表现相对困难问题1:为什么非人灵长类动物体细胞核移植非常困难?原因一:供体的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态,这导致了胚胎发育率低。原因二:非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善。三、动物体细胞核移植技术和克隆动物采集卵母细胞,在体外培养到MⅡ期高产奶牛(供体)2)为何选MⅡ期的卵母细胞?原因:①卵母细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质;②卵母细胞体积大,易操作;③卵母细胞营养物质丰富。去核:显微

操作取体

细胞去核的卵母细胞供体细胞1)何为供体、受体?供体:提供细胞核的个体受体:MⅡ期(减数第二次分裂中期)卵母细胞MⅡ期细胞才具备与精子受精的能力2体细胞核移植的过程三、动物体细胞核移植技术和克隆动物3)卵母细胞为什么要“去核”?原因:保证核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自供体细胞。并防止细胞染色体的数量发生变化。4)“去核”的方法是什么?目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。采集卵母细胞,在体外培养到MⅡ期高产奶牛(供体)去核:显微

操作取体

细胞去核的卵母细胞供体细胞(也可以采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法)使DNA变性失活,达到去核的目的。没刺破卵母细胞膜,对卵母细胞伤害小。三、动物体细胞核移植技术和克隆动物5)“核”的实质是什么?(P52页)采集卵母细胞,在体外培养到MⅡ期高产奶牛(供体)去核:显微

操作取体

细胞去核的卵母细胞供体细胞纺锤体-染色体复合物去核时,由于MⅡ期卵母细胞核的位置靠近第一极体,用微型吸管一般一并吸出第一极体。第一极体次级卵母细胞三、动物体细胞核移植技术和克隆动物去核的卵母细胞供体细胞将供体

细胞注入去核的卵母

细胞的透明带6)将整个供体细胞注入卵母细胞中有何优点?优点:①对卵母细胞损伤较小;②保证供体细胞的细胞核不被破坏,操作方便。电融合法7)激活重构胚方法和目的是?重构胚早期胚胎用物理或化学方法(如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚胎,使其完成细胞分裂和发育进程。三、动物体细胞核移植技术和克隆动物8)动物体细胞核移植技术证明了?(原理)9)从遗传物质的角度分析,克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?②生物性状还受环境因素的影响。③克隆动物在个体发育过程中有可能发生基因突变、染色体变异等可遗传变异。三、动物体细胞核移植技术和克隆动物(代孕)母牛体内生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛克隆动物早期胚胎已分化的动物体细胞的细胞核具有全能性。不是对核供体动物进行100%的复制。①克隆动物遗传物质细胞核的DNA来自于供体动物的细胞核线粒体中的DNA供体细胞和受体卵母细胞采集卵母细胞,在体外培养到MⅡ期从供体高产奶牛身上取体细胞显微操作去核对体细胞进行培养去核的卵母细胞供体细胞电融合法将供体细胞注入去核的卵母细胞重构胚早期胚胎将胚胎移入受体(代孕)母牛体内生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛早期胚胎培养动物细胞培养胚胎移植动物细胞融合动物细胞核移植技术细胞核移植动物细胞培养细胞融合体细胞核移植用到的技术早期胚胎培养胚胎移植激活重构胚使其完成

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