突发公共卫生事件应急采样操作规范

突发公共卫生事件应急采样操作规范一、总则1.1编制目的为规范突发公共卫生事件（以下简称“突发事件”）应急采样工作，确保采样过程科学、规范、高效、安全，保障样本质量，为后续的实验室检测、流行病学调查和事件处置提供准确、可靠的技术依据，特制定本规范。1.2编制依据本规范依据《中华人民共和国传染病防治法》、《突发公共卫生事件应急条例》、《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《传染病病人或疑似传染病病人尸体解剖查验规定》以及国家卫生健康委员会、国家疾病预防控制机构发布的相关技术方案、指南和标准制定。1.3适用范围本规范适用于各级疾病预防控制机构、医疗机构及其他承担突发事件应急采样任务的机构和个人，在应对新发突发传染病、不明原因疾病、重大食物中毒、职业中毒、核与辐射事故以及其他严重影响公众健康的突发事件时所开展的现场采样活动。1.4基本原则依法依规原则：严格遵守国家法律法规和技术标准。安全第一原则：将采样人员、被采样人员和环境安全置于首位，落实生物安全、个人防护和环境消毒要求。科学规范原则：采用标准化的采样方法、器材和流程，确保样本的代表性、有效性和可追溯性。及时高效原则：快速响应，第一时间赶赴现场，在最佳时间窗内完成关键样本的采集。协同联动原则：与现场流行病学调查、医疗救治、环境处置等团队紧密配合，信息共享，行动协同。二、组织机构与职责2.1应急采样组织架构突发事件应急采样工作应在同级卫生健康行政部门的统一领导和突发事件应急指挥部的协调下，由疾病预防控制机构具体组织实施，必要时可调动医疗机构及其他相关机构的技术力量。指挥决策层：卫生健康行政部门及应急指挥部，负责采样工作的总体决策、资源调配和跨部门协调。技术管理层：疾病预防控制机构应急办公室或相关业务科室，负责制定具体采样计划、技术指导、质量控制和信息报告。现场执行层：应急采样队，负责具体采样任务的现场实施。2.2应急采样队组成与职责应急采样队应根据事件性质、规模和采样任务需求组建，一般应包括：队长（1名）：全面负责现场采样工作的组织、指挥与协调。评估现场风险，确定采样策略和个人防护等级。负责与现场指挥部及其他工作组（如流调组、消杀组）的沟通。审核采样记录，确保信息完整准确，并负责样本的初步包装和交接。采样人员（若干名）：严格按照操作规程完成各类样本的采集、包装和标识。负责自身及协助队友做好个人防护。填写《现场采样记录单》。参与现场简易消毒处理。信息记录员（1名，可由采样人员兼任）：详细记录采样地点、时间、对象、样本类型、数量、唯一标识码等关键信息。拍摄必要的现场影像资料。管理采样相关文书资料。后勤保障员（1名，可由其他人员兼任或由指挥部统一配备）：负责采样器材、防护物资、运输包装材料、现场消毒用品等的准备、清点和补充。负责采样车辆、通讯设备等的保障。协助处理医疗废物。2.3人员资质与培训采样人员应具备医学、检验学、公共卫生或相关专业背景，并经过系统的生物安全、采样技术和个人防护培训，考核合格。应定期组织应急采样演练和复训，确保人员熟练掌握技能，了解最新技术规范。采样人员应身体健康，无不适于现场工作的疾病，并按规定接种相关疫苗。三、采样前准备3.1信息接收与风险评估接到采样指令后，迅速核实事件基本情况：发生时间、地点、性质、可能病原、涉及人数、已采取的措施等。进行初步风险评估，确定：可能的病原体种类及其传播途径（空气、飞沫、接触、消化道、血液等）。采样现场的环境风险（密闭空间、污染程度等）。被采样对象的状况（确诊、疑似、重症、死亡等）。据此确定采样人员的防护级别（见第四章）和采样策略。3.2采样计划制定根据风险评估结果，制定详细的现场采样计划，内容包括：采样目的与样本类型（如病原学检测、血清学检测、环境监测等）。采样对象及数量（病例、密切接触者、环境样本、媒介生物等）。采样地点与路线。采样方法与时序。人员分工与防护要求。所需器材、试剂与运输条件清单。预计完成时间与样本运送安排。3.3物资与器材准备按照采样计划，准备齐全、足量的物资，并检查其有效性。物资类别主要内容检查要点个人防护装备根据防护级别配备：医用防护口罩（N95/KN95及以上）、防护面屏/护目镜、一次性工作帽、防护服、隔离衣、鞋套、双层手套（丁腈手套）、防水围裙等。型号合适，包装完好，在有效期内。采样器材病毒采样管（含保存液）、咽拭子、鼻拭子、血清分离管、抗凝管、粪便采集杯、痰液收集器、尿液收集杯、血液采集针、真空采血管、解剖器械（如需）、环境采样拭子、采样袋、自封袋等。无菌包装，型号匹配，数量充足。采样辅助工具手电筒、压舌板、标记笔、样本标签、防水标签纸、胶带、剪刀、镊子、冰袋、保温箱/车载冰箱、样本运输罐（UN2814或UN3373，B类包装）。功能完好，标签清晰，运输容器符合生物安全要求。消毒与清洁用品75%乙醇、含氯消毒剂（如84消毒液）、过氧化氢消毒湿巾、速干手消毒剂、医疗废物专用包装袋、利器盒、表面消毒喷雾器。浓度合格，足量，配比容器齐全。文书与通讯《突发公共卫生事件应急采样记录单》、《样本送检单》、知情同意书、现场地图、照相机/录音笔、对讲机、充电宝。表格设计规范，信息项完整，通讯设备畅通。3.4车辆与交通准备确保采样车辆状况良好，车内配备必要的消毒设备和医疗废物暂存容器。规划合理路线，了解交通管制情况，确保快速抵达。四、个人防护根据《医疗机构内新型冠状病毒感染预防与控制技术指南》等原则，结合现场风险评估，实施分级防护。4.1防护级别与适用场景防护级别核心装备适用场景一级防护工作服、一次性工作帽、一次性外科口罩、手套。一般性现场工作，无直接接触患者或污染环境的风险。二级防护一次性工作帽、医用防护口罩、防护面屏/护目镜、防护服或隔离衣、手套、鞋套。进入疑似或确诊患者留观室、隔离病区，或采集非侵入性样本（如环境样本）时。三级防护在二级防护基础上，增加全面型呼吸防护器或正压头套、防水围裙、双层手套。进行可能产生气溶胶的操作，如气管插管、支气管镜检查、尸体解剖、深部痰液诱导等。4.2穿脱防护用品流程穿戴顺序（在清洁区进行）：手卫生。戴一次性工作帽。戴医用防护口罩，做密合性检查。戴内层手套。穿防护服（确保完全覆盖内部衣物）。戴防护面屏/护目镜。穿鞋套。戴外层手套（套住防护服袖口）。必要时穿戴防水围裙、全面型呼吸防护器。脱卸顺序（在缓冲区/污染区边界进行，每一步骤后必须进行手卫生）：脱卸外层手套。手卫生。脱卸防护面屏/护目镜（捏住侧边或头带）。手卫生。脱卸防护服连同鞋套（从内向外向下翻卷，避免抖动）。手卫生。脱卸内层手套。手卫生。进入潜在污染区/半污染区，摘除医用防护口罩（避免触碰口罩正面）和工作帽。手卫生。进入清洁区。4.3注意事项穿戴完成后，应由队友相互检查，确保无暴露。脱卸过程是高风险环节，必须缓慢、谨慎，遵循“一步一手消”原则。所有一次性防护用品脱下后均按感染性医疗废物处理。防护用品被污染或破损，应立即撤离污染区，按流程脱卸并更换。五、现场采样操作5.1通用采样要求知情同意：在采样前，应向被采样对象或其监护人说明采样目的、方法、风险和意义，征得其书面或口头知情同意。对于无法表达同意的紧急情况，应记录说明。唯一标识：每个样本必须使用预先打印的、具有唯一编号的标签进行标识。标签信息应包括样本编号、被采样者姓名/代码、样本类型、采集日期和时间，并确保防水、防脱落。标签应直接贴在样本容器上，而非容器盖。无菌操作：所有侵入性采样必须严格执行无菌操作技术，防止样本污染和交叉感染。避免交叉污染：采集不同对象或不同部位样本时，必须更换手套。采样工具应为一次性使用，或确保彻底消毒。样本量充足：采集足量的样本，以满足可能进行的多种检测需求。及时处理：样本采集后，应根据其性质立即进行初步处理（如放入特定保存液、低温保存等），并尽快放入运输容器。5.2不同样本类型采集方法5.2.1呼吸道样本咽拭子：嘱被采样者头部微仰，张大嘴，发“啊”音。用压舌板轻压舌前2/3处。用聚酯纤维或人造丝头的拭子，快速、有力地擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，避免触碰舌部和颊黏膜。将拭子头浸入含病毒保存液的采样管中，在折断点处折断拭杆，旋紧管盖。鼻拭子：估计鼻孔到鼻咽的距离，将拭子以垂直面部方向插入鼻腔，直至有“触墙感”（约鼻尖到耳垂距离的一半）。轻轻旋转拭子3-5圈，停留10-15秒。同法采集另一侧鼻腔。将拭子浸入保存液，折断，封管。鼻咽抽吸物/深咳痰液：对于重症或无法配合的患者，可使用吸痰器经鼻或口采集下呼吸道分泌物。鼓励患者深咳，将痰液咳入无菌痰杯。此类样本气溶胶产生风险高，操作者需三级防护。5.2.2血液样本血清样本：用于抗体检测。采集静脉血3-5ml于不含抗凝剂的真空采血管中，室温倾斜静置30分钟至血液凝固，离心后分离血清，转移至外旋盖的冻存管中。全血/血浆样本：用于病原核酸检测或培养。采集静脉血2-5ml于EDTA或枸橼酸钠抗凝管中，轻轻颠倒混匀5-8次，避免溶血。5.2.3粪便样本采集新鲜自然排出的粪便3-5克（约花生米大小）或稀便3-5毫升于无菌粪便采集杯或含保存液的采样管中。避免混入尿液、水或土壤。5.2.4环境与物体表面样本涂抹法：用浸有采样液（如生理盐水、磷酸盐缓冲液）的棉拭子，在规定的采样面积（如5cm×5cm）内，以横竖往返均匀涂抹5次，并随之转动拭子。剪去手接触部分，将拭子头放入含采样液的试管中。贴膜法：使用无菌规格板（5cm×5cm）和专用采样膜，适用于平整表面。空气样本：使用空气采样器，如安德森撞击式采样器或液体冲击式采样器，按设备说明书操作。5.2.5尸体解剖样本（需经严格审批）在获得法定许可和家属同意后，由具备资质的病理或法医人员在符合生物安全三级实验室（BSL-3）或解剖中心的条件下进行。重点采集病变组织（如肺、肝、淋巴结等）、血液和分泌物。5.3采样记录现场必须填写详尽的《应急采样记录单》，内容至少包括：事件名称与编号。采样地点（具体到门牌号/坐标）。被采样对象信息（姓名、性别、年龄、身份证号/编号、临床诊断/分类、联系方式）。样本信息（唯一编号、类型、数量、采集时间、采集人）。样本保存方式与运输要求。采样现场情况简要描述。采样人员签名及日期。记录应字迹清晰、信息准确、不得涂改，若有修改需签注姓名和日期。六、样本包装、保存与运输6.1样本包装（三层包装系统）第一层（主容器）：样本本身的原始容器，如采样管、冻存管。必须密封良好，管盖旋紧，标签清晰。第二层（辅助容器）：防水、防漏的容器，如自封袋或50ml离心管。将主容器放入其中，并在内外放置足量吸水性材料（如纱布、纸巾）以吸收可能的泄漏。袋口密封。第三层（外层运输容器）：坚固、绝缘的运输箱（如UN3373规定的B类包装）。将辅助容器与样本送检单（置于防水袋中）一同放入。在容器内放置足够的冷藏或冷冻介质（如冰袋、干冰），确保样本在运输全程处于要求的温度范围内。运输箱外应贴有醒目的生物危险标识和“向上”标签。6.2样本保存样本采集后应尽快送检。如需暂存，应根据检测目的和病原特性，在规定温度下保存：用于病毒核酸检测的样本，通常可在2-8℃下保存不超过72小时，否则应置于-70℃或以下。用于细菌培养的样本应尽快送检，部分样本可室温短时保存。血清样本可在-20℃保存较长时间。所有保存温度必须有连续的温度监控记录。6.3样本运输运输资质：运送高致病性病原微生物样本，必须由单位向省级卫生健康行政部门申请，取得《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本准运证书》。运输人员：应经过专业培训，了解生物安全知识和应急处置程序。运输过程：专人专车，确保运输箱稳固，避免颠簸。运输车辆应具备必要的安保和温控条件。交接程序：送达实验室后，与接收人员共同核对样本数量、信息、包装完整性，并填写《样本交接记录单》，双方签字确认。七、现场消毒与医疗废物处理7.1采样现场消毒采样过程中发生样本溅洒或泄漏，应立即用吸附材料覆盖，然后用有效氯浓度不低于2000mg/L的含氯消毒剂从外围向中心喷洒，作用30分钟以上后清理。采样结束后，对采样区域可能污染的环境表面（如桌面、门把手）、设备和地面进行终末消毒。可使用有效氯500mg/L-1000mg/L的含氯消毒剂或75%乙醇擦拭或喷洒。采样人员脱卸防护用品的缓冲区地面和物品表面应作为污染区进行重点消毒。7.2医疗废物处理所有使用过的一次性采样器材、防护用品、吸附材料等，均视为感染性医疗废物。现场应设置专用的医疗废物包装袋和利器盒。利器（如采血针）必须放入防刺穿的利器盒中。医疗废物包装袋达3/4满时应有效封口，贴上“感染性废物”标签。离开现场前，将所有医疗废物密封包装，交由有资质的医疗废物集中处置单位处理，或运回本单位按规处理。严禁随意丢弃。详细记录医疗废物的种类、数量、交接人员和时间。八、质量控制与生物安全8.1质量控制过程控制：队长负责监督整个采样过程的规范性。样本质量：确保样本标识唯一、信息准确、采集规范、量足质优、保存运输条件符合要求。记录控制：确保所有记录及时、真实、完整、清晰、可追溯。人员考核：定期对采样人员进行技能考核和质量评估。8.2生物安全培训与演练：所有人员必须接受并通过生物安全培训。暴露处置：制定明确的锐器伤、黏膜或皮肤暴露于感染性物质后的应急处置预案，包括现场紧急处理、报告、风险评估、预防性用药和医学观察等流程。健康监测：采样任务结束后，对参与人员进行必要的健康监测。事故报告：发生任何生物安全意外事件，必须立即报告单位负责人和上级主管部门。九、采样后工作9.1信息报告与反馈现场采样工作结束后，队长应及时汇总情况，向本单位技术管理层和现场指挥部提交初步的《应急采样工作报告》。报告内容应包括：任务完成情况、样本采集清单、现场发现、存在