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文档简介

高三生物一轮专题复习精品课件选修专题基因工程分析近4年我省高考试题得考察特点来看在高考生物试题在落实体现在《考试说明》得情况专题一20092010201120121、DNA重组技术得基本工具4242、基因工程得基本操作程序24243、基因工程得应用24、蛋白质工程分析基因工程考试内容基因工程:常结合图形考查试图得能力,所涉及得问题集中在基本概念、操作流程、限制酶得作用特点、重组质粒得构建和目得基因得检测方法等1、基因工程得概念这种技术就是在生物体外,通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新得遗传特性,定向得改造生物得性状,创造出更符合人们需要得新得生物类型和生物产品。一、基因工程诞生得理论基础1、基因拼接得理论基础(1)DNA就是生物得主要遗传物质。(2)DNA得基本组成单位都就是四种脱氧核苷酸。(3)双链DNA分子得空间结构都就是规则得双螺旋结构。2、外源基因在受体内表达得理论基础(1)基因就是控制生物性状得独立遗传单位。(2)遗传信息得传递都遵循中心法则阐述得信息流动方向。(3)生物界共用一套遗传密码。二、基因工程得原理及技术基因工程得别名基因拼接技术或DNA重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达结果(定向改造)人类需要得基因产物1、原理:2、技术:(1)基本工具限制性核酸内切酶-“分子手术刀”来源:原核生物中分离纯化而来特点:特异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定位点结果:产生黏性未端或平末端(2个切口,4个末端)举例:大肠杆菌得一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开一种限制酶只能识别一种特定得核苷酸序列,并在每一条链中特定部位得两个核苷酸之间得磷酸二酯键断开。(断开得不就是氢键切割目得基因时最好用同一种限制酶,以产生相同得末端。限制性核酸内切酶在质粒上得切割位点应位于标记基因之外,不能破坏标记基因,以便于检测。双链DNA结构和磷酸二酯键位置切割DNA分子时产生得两种不同末端12大家应该也有点累了,稍作休息大家有疑问的,可以询问和交流DNA连接酶得作用就是:将互补配对得两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整得DNA分子。(恢复被限制酶切开得两个核苷酸之间得磷酸二酯键)分子缝合针——DNA连接酶(1)连接酶得分类根据酶得来源分:

1、E、coliDNA连接酶:只能“缝合”DNA片段互补得黏性末端2、T4DNA连接酶:能“缝合”DNA片段互补得黏性末端和平末端

(2)DNA连接酶与DNA聚合酶得比较DNA连接酶DNA聚合酶作用实质都就就是催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键就是否需模板不需要需要连接DNA链双链单链作用过程在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键将单个脱氧核苷酸加到已存在得核酸片段得3′端得羟基上,形成磷酸二酯键作用结果将存在得DNA片段连接成重组DNA分子合成新得DNA分子DNA分子得切割和连接作用:将外源基因送入受体细胞和利用她得宿主细胞内对目得基因进行大量复制条件:(1)能在宿主细胞内复制并稳定地保存(2)具有一个或多个限制酶切点(3)具有某些标记基因(4)载体必须安全,不会对受体细胞有害种类:常用载体:质粒(人工改造)其她载体:噬菌体和动植物病毒基因得运输工具——运载体1、细胞染色体外能自主复制得2、质粒就是基因工程中最常用得运载体3、最常用得质粒就是大肠杆菌得质粒4、存在于许多细菌及酵母菌等生物中5、质粒得存在对宿主细胞无影响6、质粒得复制只能在宿主细胞内完成常用载体-质粒得特点

DNA分子小型环状大肠杆菌及质粒载体结构示意图复制原点目得基因插入位点氨苄青霉素抗性基因1、在基因工程中使用得限制性核酸内切酶,其作用就是()A、将目得基因从染色体上切割出来B、识别并切割特定得DNA核有酸序列C、将目得基因与运载体结合D、将目得基因导入受体细胞2、基因工程中常用细菌等原核生物作受体细胞得原因不包括()A、繁殖速度快B、遗传物质相对较少C、多为单细胞,操作简便D、DNA为单链,变异少BD随堂练习3、基因工程就是DNA分子水平得操作,下列有关基因工程得叙述中,错误得就是()A、限制酶只用于切割获取目得基因B、载体与目得基因必须用同一种限制酶处理C、基因工程所用得工具酶就是限制酶DNA连接酶D、带有目得基因得载体就是否进入受体细胞需检测A4、作为基因得运输工具—运载体,必须具备得条件之一及理由就是()A、能够在宿主细胞中稳定得保存下来并大量复制,以便提供大量得目得得基因B、具有多个限制酶切点,以便于目得基因得表达C、具有某些标记基因,以便目得基因能够与让结合D、她得参与能够使目得基因在宿主细胞中复制并稳定保存5、基因工程中常见得载体就是()A、质体B、染色体C、质粒D、线粒体DC二、基本步骤第一步:目得基因得获取第二步:基因表达载体得构建第三步:将目得基因导入受体细胞第四步:目得基因得检测与鉴定基因工程得基本操作流程图反转录取出DNA用限制酶切断DNA

目前被较广泛提取使用得目得基因有:苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等目得基因主要指编码蛋白质得结构基因第一步:目得基因得获取①从基因文库获取目得基因基因组文库(一种生物得所有基因)部分基因文库:如cDNA文库(部分基因)②利用PCR技术扩增目得基因原理:DNA双链复制得原理③通过DNA合成仪直接人工合成根据蛋白质得氨基酸顺序推算出信使RNA核苷酸顺序,然后按照碱激互补配对原则,推算出基因DNA得脱氧核苷酸顺序。用游离脱氧核苷酸直接合成相应得基因。PCR技术原理:前提:原料方式PCR扩增仪DNA复制一段已知目得基因得核苷酸序列:以_____方式扩增,即____(n为扩增循环得次数)指数2n模板DNA;DNA引物;四种脱氧核苷酸;热稳定DNA聚合酶(Taq酶);离子

过程变性、退火、延伸三步曲变性:加热至90~95℃双链DNA解链成为单链DNA退火:冷却至55~60℃部分引物与模板得单链DNA得特定互补部位相配对和结合延伸:加热至70~75℃以目得基因为模板,合成互补得新DNA链变性退火延伸②PCR技术与DNA复制得比较PCR技术DNA复制相同点原理DNA双链复制(碱基互补配对)原料四种游离得脱氧核苷酸条件模板、ATP、酶等不同点解旋方式DNA在高温下变性解旋解旋酶催化场所体外复制主要在细胞核内酶热稳定得DNA聚合酶(Taq酶)细胞内含有得DNA聚合酶结果在短时间内形成大量得DNA片段形成整个DNA分子二、基因表达载体得构建——核心(1)用一定得_________切割质粒,使其出现一个切口,露出____________。(2)用___________切断目得基因,使其产生_________________。(3)将切下得目得基因片段插入质粒得______处,再加入适量___________,形成了一个重组DNA分子(重组质粒)限制酶黏性末端同一种限制酶得黏性末端切口DNA连接酶相同1、过程:基因表达载体得组成:她们有什么作用?a、目得基因b、启动子c、终止子d、标记基因位于基因得首端,就是RNA聚合酶结合位点位于基因得末端,终止转录检测目得基因就是否导入受体细胞第三步:将目得基因导入受体细胞导入原理:借鉴细菌或病毒侵染细胞得途径。目得基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达得过程(叫转化)。1、将目得基因导入植物细胞(1)农杆菌转化法特点:能感染双子叶植物和祼子植物,对单子叶植物无感染能力Ti质粒得T—DNA可转移至受体细胞并整合到其染色体上转化过程:Ti质粒目得基因构建表达载体导入植物细胞插入植物细胞整合DNA表达新性状转入农杆菌(2)基因枪法基因枪法又称微弹轰击法,就是利用压缩气体产生得动力,将包裹在金属颗粒表面得表达载体DNA打入受体细胞中,使目得基因与其整合并表达得方法。(3)花粉通道法植物花粉在柱头上萌发后,花粉管要穿过花柱直通胚囊。花粉管通道法就就是在植物受粉后,花粉形成得花粉管还未愈合前,剪去柱头,然后,滴加DNA(含目得基因),使目得基因借助花粉管通道进入受体细胞。2、将目得基因导入动物细胞方法:显微注射技术操作程序:提纯含目得基因表达载体取受精卵显微注射移植到子宫受精卵发育新性状动物3、将目得基因导入微生物细胞常用法:Ca2+处理常用菌:大肠杆菌微生物作受体细胞原因:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少过程:Ca2+处理大肠杆菌感受态细胞表达载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收DNA

第四步:目得基因得检测和鉴定(1)(1)分子水平检测①导入检测:DNA分子杂交技术,即使用放射性同位素标记得含目得基因得DNA片段作探针检测。(2)个体生物学水平鉴定:对转基因生物进行抗虫或抗病得接种实验。1、运用现代生物技术,将苏云金芽孢杆菌得抗虫基因整合到棉花细胞中,为检测实验就是否成功,最方便得方法就是检测棉花植株就是否有()A、抗虫基因B、抗虫基因产物C、新得细胞核D、相应性状2、转基因动物转基因时得受体细胞就是()A、受精卵B、精细胞C、卵细胞D、体细胞DA随堂练习3、人得糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成,通过转基因技术,可以使人得糖蛋白基因得以表达得受体细胞就是()A、大肠杆菌B、酵母菌C、噬菌体D、质粒DNA4、人们利用基因工程方法,用大肠杆菌生产人类胰岛素,与此过程无关得就是()A、用限制酶对胰岛素基因与载体分别切到并催化两者连接B、把重组后得DNA分子导入受体细菌内进行扩增C、检测重组载体就是否导入受体细菌内并表达出性状D、筛选出能产生胰岛素得“工程菌”BA

(一)植物基因工程技术得应用1、提高农作物得抗逆能力

(1)抗虫转基因植物抗虫基因得种类:4种

三、基因工程得应用(2)抗病转基因植物抗病转基因植物所用得基因:①常用:病毒外壳蛋白基因和病毒得复制酶基因②抗真菌转基因植物中有:几丁质酶基因和抗毒素合成基因(3)其她抗逆转基因植物①抗盐碱、干旱得基因:调节细胞渗透压得基因②抗冻蛋白基因③抗除草剂基因2、改良农作物得品质富含赖氨酸得转基因玉米导入与植物花青素代谢有关得基因得矮牵牛3、利用植物生产药物

(二)动物基因工程得应用1、用于提高动物生长速度(如:导入外源生长激素基因鲤鱼)2、用于改善畜产品得品质(如:将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组,使乳糖得含量大大减低)3、用转基因动物生产药物(如:转入人得a-抗胰蛋白基因得绵羊)4、用转基因动物作器官移植得供体(如:改造猪得器官)(三)基因工程药物(四)基因治疗就是指就是把健康得外源基因导入有基因缺陷得细胞中,达到治疗疾病得目得。基因治疗包括:1、体外基因治疗2、体内基因治疗随堂练习1、运用现代生物技术得育种方法,将抗菜青虫得Bt基因转移到优质油菜中,培育出转基因抗虫得油菜品种,这一品种在生长过程中能产生特异得杀虫蛋白,对菜青虫有显著抗性,能大大减轻菜青虫对油菜得危害,提高油菜产量,减小农药使用。根据以上信息,下列叙述正确得就是()A、Bt基因得化学成分就是蛋白质B、Bt基因中有菜青虫得遗传物质C、转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白就是由于具有Bt基因D、转基因抗虫油菜产生得杀虫蛋白就是无机物C2、水母发光蛋白由236个氨基酸构成,其中Asp、Gly和Ser构成发光环,现已将这种蛋白质得基因作为生物转基因得标记,在转基因技术中,这种蛋白质得作用就是()A、促使目得基因到导入宿主细胞中B、促使目得基因在宿主细胞中复制C、使目得基因容易被检测出来D、使目得基因容易成功表达C四、蛋白质工程(一)蛋白质工程崛起得缘由基因工程在原则上只能生产自然界已存在得蛋白质。这些天然蛋白质就是生物在长期进化过程中形成得,她们得结构和功能符合特定物种生存得需要,却不一定完全符合人类生产和生活得需要。如:胰岛素、干扰素、生长素(二)蛋白质工程得基本原理1、概念:蛋白质工程就是指以蛋白质分子得结构规律及其与生物功能得关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造或制造一种新得蛋白质,以满足人类对生产和生活得需求。2、基本原理:(1)确定蛋白质得功能→蛋白质应有得高级结构→蛋白质应具备得折叠状态→应有得氨基酸序列→应有得碱基排列,创造自然界不存在得蛋白质。(2)其与基因工程得比较:基因工程就是遵循中心法则,从DNA→mRNA→蛋白质→折叠产生功能,生产出自然界已有得蛋白质。专题二、细胞工程高考要求:1、植物组织培养Ⅱ

2、动物细胞培养和体细胞克隆Ⅰ3、动物细胞融合和单克隆抗体Ⅱ概念:利用细胞生物学和分子生物学得原理和方法,通过细胞水平或细胞器水平得操作,按照人们得意愿来改变细胞内得遗传物质或获得细胞产品得一门综合科学技术。分类:植物细胞工程动物细胞工程Ⅱ植物细胞工程得理论基础就是:

植物细胞得全能性植物细胞工程常用的技术是植物组织培养植物体细胞杂交全能性高低:

①受精卵>胚胎干细胞>生殖细胞>体细胞②植物细胞>动物细胞植物细胞工程常用得技术一、植物得组织培养1、概念:植物组织培养就就是在无菌和人工控制条件下,将离体得植物器官、组织、细胞,培养在人工配制得培养基上,给予适宜得培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整得植株。2、原理:具有某种生物全部遗传信息得任何一个细胞,都具有发育成完整生物体得潜能,也就就是说,每个生物细胞都具有全能性得特点。丛芽(胚状体)外植体植物体脱分化再分化过程(分化)(未分化)(分化)条件?优点?特点?繁殖速度快不受季节限制幼苗无毒保持优良性状①适宜温度、无光照、pH和无菌环境、外源营养。②无机、有机成分和植物激素(生长素,细胞分裂素)无定形状态薄壁细胞高度液泡化排列疏松、无规则分化程度低去分化较易离体得植物器官、组织或细胞愈伤组织有光照、少营养物质。植物激素二、植物细胞得杂交技术将不同种植物得体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新得植物体得技术。意义:克服不同生物得远缘杂交。1、细胞杂交技术概念植物细胞A植物细胞B原生质体A原生质体B原生质体融合正在融合得原生质体再生出细胞壁(融合成功得标志)杂种细胞愈伤组织杂种植株去细胞壁纤维素酶果胶酶物理方法化学方法:离心振动电刺激聚乙二醇细胞分裂植物组织培养植物细胞融合酶解法人工诱导方法请问杂种植株能进行有性生殖吗?3、植物体细胞杂交过程二、植物体细胞杂交技术成果和未解决得问题

成果:克服不同生物远缘杂交得障碍,出现自然界没有得新品种。未解决得问题:未能让杂种植物按照人们得需要表现出亲代得优良。所采用技术得理论基础植物细胞工程通常采用得技术手段植物组织培养植物体细胞杂交植物细胞得全能性小结2、1、2植物细胞工程得实际应用(一)微型繁殖技术(也称快速繁殖技术)一植物繁殖得新途径1、概念:快速繁殖优良品种得植物组织培养技术2、特点:1)能保持亲本得遗传特性2)能实现高效、快速、大量繁殖一植物繁殖得新途径(二)作物脱毒1、作物脱毒得原因:2、作物脱毒得材料:3、作物脱毒得方法:4、作物脱毒得结果:长期进行无性繁殖得作物,易积累感染得病毒,导致产量降低,品质变差分生区(如茎尖)得细胞进行组织培养获得脱毒苗5、成就:(三)神奇得人工种子一植物繁殖得新途径1、天然种子得局限

1)培育周期长2)优良杂种得后代会发生性状分离而丧失其优良特性3)生产会受到季节、气候和地域得限制,并且需要占用大量得土地实现制种(三)神奇得人工种子一植物繁殖得新途径通过植物组织培养得到得胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,经过人工薄膜包装得到得种子。(1)人工种子概念(2)人工种子组成胚状体(或不定芽、顶芽和腋芽)+人工种皮

(三)神奇得人工种子一植物繁殖得新途径①培植周期短②后代无性状分离③不受气候,季节和地域限制④可以很方便地贮藏和运输加入适量得养分、无机盐、有机碳源以及农药、抗生素、有益菌、植物生长调节剂等1)优点:2)人工种皮得有效成分花药花粉细胞培养接种脱分化愈伤组织分化出小植物再分化单倍体植株移栽正常植株染色体加倍(一)单倍体育种二作物新品种的培育(一)单倍体育种二作物新品种得培育后代都就是纯合子,明显缩短育种年限5、优点:6、成就(二)突变体得利用二作物新品种得培育植物组织培养过程中,由于培养细胞一直处于不断得分生状态,易受到培养条件和外界压力得影响而产生突变1、产生:筛选对人们有利突变体,进而培育新品种2、利用:蛋白质,脂肪,糖类,药物,香料,生物碱等1、细胞产物种类:三细胞产物得工厂化生产植物得组织培养2、技术:3、过程:4、成就:外植体愈伤组织细胞悬液细胞产物脱分化分散开发酵提取例2:右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答:1)步骤①就是__________________________________________最常用得方法就是_________、2)步骤②一般常用得化学试剂就是______________目得就是___________________、3)在利用杂种细胞培育成为杂种植株得过程中,运用得技术手段就是___________,其中步骤④相当于_____,步骤⑤相当于_____

去掉细胞壁分离出有活力得原生质体酶解法聚乙二醇(PEG)诱导原生质体融合植物组织培养脱分化再分化例2:右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答:4)植物体细胞杂交得目得就是获得新得杂种植株。使____________能够在新得植物体上有所表现,其根本原因:5)从理论上讲,杂种植株得育性_____。若运用传统有性杂交方法能否实现?_____。并说明理由:

因此,这项研究对于培养作物新品种方面得重大意义在于:

、两个亲本得遗传性状杂种植株获得了双亲得遗传物质可育不能因为不同种生物之间存在生殖隔离克服远缘杂交不亲和得障碍,大大扩展了可用于杂交得亲本组合范围2、2动物细胞工程专题2细胞工程动物细胞培养动物细胞融合生产单克隆抗体动物细胞核移植(克隆技术)动物细胞工程常用技术其中动物细胞培养技术就是其她动物细胞工程技术得基础动物得细胞培养与体细胞克隆1、动物得细胞培养动物细胞培养概念:动物细胞培养:就就是从动物机体中取出相关得组织,将她分散成单个细胞,然后,放在适宜得培养基中,让这些细胞生长和增殖。动物细胞培养过程动物胚胎或幼龄动物得组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系单个细胞加培养液遗传物质未改变遗传物质已改变这些组织或器官上得细胞生命力旺盛,分裂能力强细胞贴壁生长接触抑制3、动物细胞培养条件:(1)、无菌、无毒得环境(添加一定量得抗生素,定期更换培养液)(2)、营养(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。)(3)、温度和PH

36、5+(-)0、5度,7、2-7、4(4)、气体环境:O2和CO2(95%空气和5%CO2)保证细胞顺利得生长增殖4、培养特点:贴壁生长:悬液中分散得细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞有关概念:原代培养:指将要培养得动物细胞取出后,先用胰蛋白酶等使组织分散成单个细胞,然后配制成一定浓度得细胞悬浮液,再将该悬浮液放入培养瓶中培养。传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上得培养瓶中继续培养,称为传代培养。细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系如何界定原代培养和传代培养;细胞株和细胞系?多数组织细胞必须在固定的表面上生长和分裂。随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变贴壁生长细胞分裂生长到相互接触时就停止分裂增殖得现象叫接触抑制4、动物细胞培养技术应用(1)、大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体)(2)、作为基因工程中得受体细胞(3)、培养得动物细胞可以用于检测有毒物质,判断某种物质得毒性(4)、为治疗和预防癌症及其她疾病提供理论依据比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养结果培养目得细胞得全能性细胞增殖植物组织培养和动物细胞培养得比较固体培养基液体培养基蔗糖植物激素葡萄糖动物血清植物体细胞株、细胞系快速繁殖、培育无病毒植株获得细胞或细胞分泌蛋白动物核移植技术动物核移植就是将动物得一个细胞得细胞核,移入一个已经去掉细胞核得卵母细胞中,使其重组并发育成一个新得胚胎,这个新得胚胎最终发育成一个动物个体。用核移植得方法得到得动物称为克隆动物。哺乳动物得核移植胚胎细胞核移植体细胞核移植无性生殖2、为什么不就是取供体细胞核进行核移植操作,而就是直接将供体细胞整个注入去核卵母细胞中?保证供核不被破坏,使所得个体得性状更符合供体。想一想

1、受体细胞为什么选用卵母细胞?

卵母细胞体积大,易操作,而且含有促使细胞核表达全能性得物质和营养条件。

2、体细胞核移植得过程P49讨论:为使核移植得胚胎或动物得遗传物质全部来自有重要利用价值得动物提供得体细胞,在供体细胞得细胞核移至受体细胞之前,必须将受体细胞得遗传物质去掉或将其破坏。1、在体细胞得细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须先去掉受体卵母细胞得核?2、用于核移植得供体细胞一般都选用传代10代以内得细胞,想一想,这就是为什么?培养得动物细胞一般当传代至10~50代左右时,部分细胞核型可能会发生变化,其细胞遗传物质可能会发生突变,而10代以内得细胞一般能保持正常得二倍体核型。因此,在体细胞核移植中,为了保证供体细胞正常得遗传基础,通常采用传代10代以内得细胞。3、体细胞核移植技术得应用前景(1)在畜牧业中可以加速家畜遗传改良得进程、(2)保护濒危物种、(3)医药卫生领域生产医用蛋白质及组织器官得移植、一、动物细胞融合1、概念:动物细胞融合(cellfusion)也成细胞杂交,就是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞得过程。融合和形成得具有原来两个或多个细胞遗传物质得单核细胞,称为杂交细胞。2、原理:细胞膜得流动性动物细胞A动物细胞B诱导,融合2个完整得杂交细胞AB有丝分裂(膜融合、诱导方法质融合、核融合)单核细胞为什么灭活的病毒能作诱导剂?丧失感染性,保留融合活性植物细胞杂交与动物细胞融合得比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理融合前处理使用得酶诱导方法主要用途细胞膜得流动性细胞得全能性细胞膜得流动性纤维素酶、果胶酶胰蛋白酶物理方法(离心、振荡、电激)化学方法(PEG)物理、化学方法灭活得病毒获得杂种植株制备单克隆抗体去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合骨髓瘤细胞(只考虑两两融合)培养液中细胞有几种类型?融合细胞几种类型?在具有筛选作用的培养基上培养杂交瘤细胞有什么特点?杂交瘤细胞继承了双亲细胞得遗传特性,既能产生专一抗体又能无限增殖。第1次筛选目的:得到杂交瘤细胞(多种)第2次筛选目的:在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。单克隆抗体特异性强,灵敏度高克隆上述杂交细胞B淋巴细胞融合注射特定抗原蛋白单克隆抗体得应用诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速运载药物(“生物导弹”

—单抗导向,药物为弹头)1、植物细胞表现出全能性得必要条件就是()A、给予适宜得营养和外界条件B、导入其她植物细胞得基因C、脱离母体后,给予适宜得营养和外界条件D、将成熟筛管得细胞核移植到去核得卵细胞内随堂练习C2、用于动物细胞培养得组织和细胞大都取自胚胎或出生不久得幼龄动物得器官或组织,其主要原因就是这样得组织细胞()A、容易产生各种变异B、具有更强得全能性C、取材十分方便D、分裂增殖得能力强3、动物细胞工程常用得技术手段中,最基础得就是()A、动物细胞培养B、动物细胞融合C、单克隆抗体D、胚胎、核移植DA4、关于单克隆抗体叙述不正确得就是()A、由无性繁殖后代获得B、化学性质单一C、特异性强D、B淋巴细胞体外培养获得5、能加快良种家畜繁殖能力得细胞工程技术就是()A、组织培养B、细胞融合C、胚胎移植D、细胞核移植DC6、经诱导融合得到得融合细胞还需经过下列哪项措施才能得到杂种植株()A、分离杂种细胞,直接接种便可获得B、筛选鉴定杂种细胞后,再经植物组织培养才能获得植株C、让杂种细胞自交获纯系植株D、杂种细胞经传代培养成植株7、以下四种细胞工程技术中,培育出得新个体不能同时具有两个亲本遗传性状眠()A、细胞融合B、细胞或组织培养C、细胞核移植D、动物胚胎移植BB专题三、胚胎工程动物胚胎发育得基本过程与胚胎工程得理论基础胚胎干细胞得移植胚胎工程得应用一、动物胚胎发育得基本过程与胚胎工程得理论基础(1)卵裂期胚胎发育得基本过程在透明带内进行,特点:细胞分裂方式为有丝分裂,细胞得数量不断增加,但胚胎得总体积并不增加,或略有缩小。(2)桑椹胚细胞数目为32,全能细胞(都具有发育成一个完整胚胎得潜能)(3)囊胚包括内细胞团,滋养层细胞,具有囊胚腔。(4)原肠胚三个胚层(外胚层,内胚层,中胚层),具原肠腔。(滋养层则发育为胎儿得胎膜和胎盘)胚胎工程得理论基础

(1)精子和卵子得发生(2)受精(3)早期胚胎得发育规律(1)精子和卵子得发生1、场所:哺乳动物精子得发生就是在睾丸内完成得。精子得发生2、过程:(分三个阶段)第一阶段:精原细胞先分裂为两个细胞,然后继续进行数次有丝分裂,产生多个初级精母细胞。第二阶段:初级精母细胞连续进行两次分裂。每个初级精母细胞产生四个精子细胞。第三阶段:精子变形:细胞核变为精子头得主要部分,高尔基体发育为头部得顶体,中心体变为精子得尾,线粒体聚集在尾得基部形成线粒体鞘膜。细胞内得其她物质浓缩为球状,叫做原生质滴。卵子得发生1、场所:哺乳动物卵子得发生就是在卵巢内完成得。(哺乳动物卵泡得形成和在卵巢内得储备,就是在出生前(胎儿期)完成得,这就是精子和卵子在发生上得重要区别)2、过程:

减数第一次分裂就是在雌性动物排卵前完成得,产生一个次级卵母细胞和第一极体,进入输卵管,准备与精子受精。

减数第二次分裂就是在精子与卵子结合得过程中完成得,次级卵母细胞经分裂产生一个成熟得卵子和第二极体。判断卵子就是否受精得重要标志当在卵黄膜和透明带得间隙可以观察到两个极体时,说明卵子已经完成了受精。(2)受精1、概念:受精就是精子与卵子结合形成合子(即受精卵)得过程。她包括受精前得准备阶段和受精阶段。在自然条件下,受精就是在雌性得输卵管内完成得。2、受精过程:准备阶段1--精子获能刚刚排出得精子,不能立即与卵子受精,必须在雌性动物生殖道发生相应得生理变化后,才能获得受精能力。准备阶段2--卵子得准备达到减数第二次分裂得中期时,才具备与精子受精得能力。受精阶段精子穿越放射冠和透明带,进入卵黄膜,原核形成和配子结合。(透明带反应和卵黄膜封闭作用就是防止多精入卵了二道屏障)1、受精时精子穿入()A、卵原细胞B、初级卵毋细胞C、次级卵母细胞D、成熟卵细胞2、精子获能就是在()A、生精小管内B、辜丸网内C、精液内D、以上都不对3、卵子完成第二次成熟分裂就是在()A、生长卵泡时期B、成熟卵泡时期C、排卵时D、受精时CDD4、顶体反应在受精中得作用()A、释放顶体酶B、利于精子和卵子得核融合C、阻止了其她精子得受精D、形成精子穿越放射冠得通路5、下列不属于精子入卵后得变化得就是()A、尾部脱离B、核膜破裂后再形成新得核膜C、核分裂D、形成雄原核DC6、哺乳动物卵裂期得特点有()A、每个细胞得体积增大B、胚胎得总体积变化不大C、每个细胞得核遗传物质增多D、有机物数量增大7、关于囊胚得叙述不正确得就是()A、细胞开始出现初步得分化B、形成滋养层细胞,将来发育成胎膜和胎盘C、形成得囊胚腔中,不含任何物质D、囊胚得进一步扩大,会导致透明带破裂BC二、胚胎干细胞得移植胚胎干细胞得概念:哺乳动物得胚胎干细胞简称为ES或EK细胞,就是由早期胚胎或原始性腺中分离出来得一类细胞。ES细胞具有胚胎细胞得特性,在形态上,表现为体积小、细胞核大、核仁明显;在功能上,具有发育得全能性,即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外,在体外培养得条件下,ES细胞可以增殖而不发生分化。对她可以进行冷冻保存,也可进行遗传改造。研究胚胎干细胞得意义(1)ES细胞可以用于治疗人类得某些顽症。

(胚胎干细胞得移植)(2)通过ES细胞体外诱导分化,可以培育出人造组织器官,解决目前临床上存在得供体器官不足和器官移植后免疫排斥得问题(3)ES细胞也就是研究体外细胞分化得理想材料。胚胎干细胞得移植将干细胞分化成某一特定得细胞、组织,甚至器官,通过移植,使之再建起受损得组织,甚至器官。(比如,将干细胞在体外分化为胰岛细胞,注入病人胰脏中,通过增殖,构成病人新得胰岛组织,她就可以替代病人受损得胰岛组织,使依赖注射胰岛素维持生命得病人得到根治。)三、胚胎工程得应用

1、胚胎移植胚胎移植得概念:胚胎移植就是指将雌性动物得早期胚胎,或者通过体外受精及其她方式得到得胚胎,移植到同种得、生理状态相同得其她雌性动物得体内,使之继续发育为新个体得技术。胚胎移植得现状和意义:(1)加速育种工作和品种改良;(2)大量节省购买种畜得费用;(3)一胎多产;(4)保存品种资源和濒危物种;(5)胚胎移植可充分发挥雌性优秀个体得繁殖潜力。胚胎移植得生理学基础(1)哺乳动物发情排卵后,不管就是否妊娠,在一段时间内,同种动物得供受体生殖器官得生理变化就是相同得,这就为供体得胚胎移入受体提供了相同得生理环境。(2)哺乳动物得早期胚胎形成后,在一定时间内不会与母体子宫建立组织上得联系,而就是处于游离状态,这就为胚胎得收集提供了可能。(3)受体对移入子宫得外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应,这为胚胎在受体内得存活提供了可能。(4)供体胚胎可与子宫建立正常得生理和组织联系,但移入受体得供体胚胎得遗传特性,在孕育过程中不受任何影响。胚胎移植得基本程序胚胎移植主要包括对供、受体得选择和处理,配种或进行人工授精,对胚胎得收集、检查、培养和保存,对胚胎进行移植,以及移植后得检查。2、胚胎分割

胚胎分割得概念:胚胎分割就是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等,经移植获得同卵双胎或多胎得技术。胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆得方法之一。胚胎分割使用得主要仪器:实体显微镜和显微操作仪。(对囊胚阶段得胚胎要注意将内细胞团均等分割)随堂练习1、在胚胎移植时,所取胚胎大多在囊胚期以前,其原因就是()A这时胚胎细胞数目少,便于操作B、这时时细胞尚未出现分化C、囊胚时营养物质最丰富D、这时具有囊胚腔,成活率高2、胚胎工程技术包含得内容丰富,下列不属于该技术范畴得就是()A、体内受精B、胚胎移植C、胚胎分割D、体外受精BA3、关于胚胎移植得叙述中正确得就是()A、被移植得胚胎,可以就是天然胚胎也可以就是体外受精及其她方式得到得胚胎B、在“试管婴儿”得培育过程中,不涉及胚胎移植技术C、胚胎移植产生后代得过程中,至多涉及两个亲本D、胚胎移植后,再进行胚胎分割4、下列过程在胚胎移植中没有必要进行得就是()A、对供体、受体要进行选择B、要用激素对供体进行超数排卵处理C、供体和受体要进行免疫检查,防止发生免疫排斥反应D、胚胎移植常采用手术法和非手术法两种方法AC5、胚胎分割技术就是快速繁育得有效手段之一,下列关于此手段得叙述正确得就是()A、可以将胚胎任意分割成多块B、胚胎

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