CN119451577A 用于处理含蛋白质的组合物的方法 （雀巢产品有限公司）

2024.09.13PCT/EP2023/0590242023.04.05WO2023/194480EN2023.10.12本发明涉及一种用于处理含蛋白质的组合其中该蛋白质包含乳蛋白质并且所述乳蛋白质与转谷氨酰胺酶接触以获得含交联蛋白质的组得或通过所述方法获得的含交联蛋白质的组合2a)提供含蛋白质的组合物，其中所述含蛋白质的组合物的所述蛋白质包含乳蛋白质，b)使所述含蛋白质的组合物与至少一种转谷氨酰胺酶接触以获得含交联蛋白质的组2.根据权利要求1所述的用于处理含蛋白质的组合物的方法，其中所述含蛋白质的组3.根据权利要求1或2所述的用于处理含蛋白b)之前向所述含蛋白质的组合物中添加至少4.根据前述权利要求中任一项所述的用于处理含蛋白质的5.根据前述权利要求中任一项所述的用于处b)中使所述转谷氨酰胺酶与所述含蛋白质的组合物在40℃至68℃的温度下反应20分钟至46.根据前述权利要求中任一项所述的用于处理含8.根据权利要求7所述的含交联蛋白质的组合物，其中所述含交联蛋白质的组合物的9.根据权利要求7或8所述的含交联蛋白质的组合物通过根据权利要求1至6中任一项所述的方法获得或通过根据权利要求1至6中任一项所述10.根据权利要求7至9中任一项所述的含交联蛋白质的组合物，所述含交联蛋白质的组合物包含分子量为34kDa至38kDa的蛋白质和/或分子量为52kDa至56kDa的蛋白质和/或11.用于制备乳制品或其替代物的方法，其中所述乳制品或其所述替代物的所述蛋白a)根据权利要求1至6中任一项所述的方法处理含蛋白质的组合物以获得含交联蛋白质的组合物或提供根据权利要求7至10中任一项所述的含交联b)将所述含交联蛋白质的组合物与钙或其盐混312.根据权利要求11所述的用于制备乳制品或其替代物的方法，其中在步骤b)中将所述含交联蛋白质的组合物进一步与至少一种13.根据权利要求11或12中任一项所述的用于制备乳制品或其替代物的方法，其中在步骤b)中将所述含交联蛋白质的组合物进一步与至少一种脂肪组分和/或至少一种糖组分并且其中所述乳制品或其所述替代物的所述乳蛋白质包含至少90重量％的β一乳球蛋白并15.根据权利要求14所述的乳制品或其替代物，其中所述乳制品或其所述替代物的所16.根据权利要求14或15所述的乳制品或其替代物，其能够通过根据权利要求11至1317.根据权利要求11至13中任一项所述的用于制备乳制品或其替代物的方法或根据权18.根据权利要求11至13或17中任一项所述的用于制备乳制品或其替代物的方法或根19.根据权利要求11至13中任一项或权利要求17至18中任一项所述的用于制备乳制品20.根据权利要求11至13中任一项或权利要求17至19中任一项所述的用于制备乳制品量为34kDa至38kDa的蛋白质和/或分子量为52kDa至56kDa的蛋白质和/或分子量为70kDa至4[0006]一方面，用β一乳球蛋白作为主要或唯一的乳蛋白质源制备的乳制品或其替代物(特别是乳制饮料或其替代物)表现出稀的质地和差是乳制饮料或其替代物)的质地是不令人满意的，因为它们不能表现出与基于常规乳的乳5[0011]不能将本说明书中对现有技术文献中的任何参照视为承认此类现有技术为众所[0016]b)使含蛋白质的组合物与至少一种转谷氨酰胺酶接触以获得含交联蛋白质的组[0019]a)根据本发明的第一方面的方法处理含蛋白质的组合物以获得含交联蛋白质的组合物或提供根据本发明的第二方面的含交联[0026]已经观察到β乳球蛋白的交联允许β乳球蛋白在用于制备乳制品或其替代物(诸如乳制饮料或其替代物)时赋予改善的质地，6[0030]图2示出未处理的BLG样品(参见实施例7)的差示扫描量热法测量。Y轴对应于焓[0031]图3示出交联的BLG样品(参见实施例7)的差示扫描量热法测量。Y轴对应于焓[0032]图4示出在80℃下热处理1小时后获得的具有胶凝质地的比较含蛋白质的组合物A[0033]图5是示出用快速粘度分析仪对比较乳A进行UHT热处理之后的稳定性特性的照[0034]图6示出测量实施例2的本发明乳的蛋白质分子量的LDSpage。泳道9对应于实施=胰蛋白酶(20.1kDa)，c＝碳酸酐酶(30kDa)，d＝卵清蛋白(45kDa)，e＝牛血清白蛋白宿主细胞)中以天然不产生该蛋白质的水平7如，重组宿主细胞可以产生不存在于天然(非重组)形式的宿主细胞中的多核苷酸或蛋白酸的示例是本领域已知的(参见例如，Malyshev等人，2014.Nature509:385；Li等人，8框架中，含蛋白质的组合物的乳蛋白质包含至少90重量％的β一乳球蛋白，优选至少95重地，β乳球蛋白的低聚物中的β乳球蛋白通过β乳球蛋白的谷氨酰胺氨基酸残基的γ羧蛋白质的组合物的蛋白质包括乳蛋白质。含蛋白质的组合物可具有至少2重量％的乳蛋白质，特别是β乳球蛋白。在优选的实施方案中，含蛋白质的组合物可具有2重量％至30重量优选2重量％至25重量更优选6重量％至21重量最优选9重量％至15重量％的白质的组合物的乳蛋白质包含至少90重量优选至少95重量更优选至少98重量％的[0058]在实施方案中，含蛋白质的组合物的非转谷氨酰胺酶蛋白质可包含至少90重9量的量添加。浓缩乳蛋白质成分可包含60重量％至100重量优选75重量％至98重量%,含蛋白质的组合物可具有2重量％至30重量优选2重量％至25重量更优选6重量％至提供足够的底物而有助于优化与转谷氨酰胺酶的酶[0064]该方法还包括使含蛋白质的组合物与至少一种转谷氨酰胺酶接触以获得含交联球蛋白)中存在的赖氨酸氨基酸残基的游离胺基团之间共价键的生成的酶家族(ECγ羧酰胺基团与赖氨酸氨基酸残基的游离胺基团之间的这些共价键的形成被称为交联。交联可以是分子内的，即在相同蛋白质的谷氨酰胺氨基酸残基和赖氨酸氨基酸残基之间。业化的转谷氨酰胺酶BDFPROBND8。以使转谷氨酰胺酶与含蛋白质的组合物在40℃至68℃、优选48℃至65℃的温度下反应1小物在40℃至68℃、优选48℃至65℃的温度下反应1小时至2小时。这些时间和温度条件有助中乳蛋白质与转谷氨酰胺酶的重量比为20:1至1000:1，优选20:1至500:1，更优选25:1至脂肪组分。特别地，含蛋白质的组合物和含交联蛋白质的组合物可包含0.5重量％至7重量优选1重量％至5重量更优选1重量％至3重量％的脂肪。在优选的实施方案中含交联蛋白质粉末的非转谷氨酰胺酶蛋白质可包含至少90重量优选至少95重量更交联蛋白质粉末可包含20重量％至80重量优选30重量％至50重量％的乳蛋白质，特别骤b)之后，不立即将含交联蛋白质的组合物在70℃至95℃、优选80℃至95℃的温度下热处别是β乳球蛋白)与转谷氨酰胺酶的交联足以显著改善含蛋白质的组合物的热稳定性，特别是当暴露于高温时。在转谷氨酰胺酶处理之后不需要诱导乳蛋白质的受控变性的热处但仍然确保了含蛋白质的组合物的良好的热稳[0083]在实施方案中，含交联蛋白质的组合物包含蛋白质(特别是分子量为34kDa至优选54kDa的β一乳球蛋白的低聚物)，和/或蛋白质(特别是分子量为70kDa至74kDa、优选[0086]在优选的实施方案中，含交联蛋白质的组合物的乳蛋白质可仅由β一乳球蛋白组胺氨基酸残基的γ羧酰胺基团与赖氨酸氨基酸残基的游离胺基团之间的共价键，特别是蛋白)的谷氨酰胺氨基酸残基的γ一羧酰胺基团与赖氨酸氨基酸残基的游离胺基团之间的[0091]包含所述交联的β一乳球蛋白的本发明的含交联蛋白质的组合物具有改善的热稳[0093]本发明的第一方面的含蛋白质的组合物和含交联蛋白质的组合物的特征可应用量的三倍的β乳球蛋白的低聚物)，和/或蛋白质(特别是分子量为β乳球蛋白分子量的四[0099]在实施方案中，含交联蛋白质的组合物包含蛋白质(特别是分子量为34kDa至优选54kDa的β一乳球蛋白的低聚物)，和/或蛋白质(特别是分子量为70kDa至74kDa、优选[0103]在实施方案中，乳制品或其替代物的非转谷氨酰胺酶蛋白质可包含至少90重[0108]该方法包括根据本发明的第一方面的方法处理含蛋白质的组合物以获得含交联[0111]含交联蛋白质的组合物可以是液体或粉末。如果含交联释以达到目标乳蛋白质含量。特别地，在稀释后，含交联蛋白质的组合物可具有至少2重℃至80℃、优选50℃至75℃,更优选55℃至70℃的温度下进行。质(特别是β乳球蛋白)与转谷氨酰胺酶的交联足以显著改善含蛋白质的组合物和所得乳倍的β乳球蛋白的低聚物)，和/或蛋白质(特别是分子量为β乳球蛋白分子量的三倍的β[0131]在实施方案中，乳制品或其替代物包含分子量为16kDa至180kDa、优选16kDa至[0134]乳制品或其替代物可以是如本发明第三方面中提供的乳制品或其替代物。特别[0139]在实施方案中，乳制品或其替代物的非转谷氨酰胺酶蛋白质可包含至少90重基酸残基的γ羧酰胺基团与赖氨酸氨基酸残基的游离胺基团之间的共价键，特别是通过白)的谷氨酰胺氨基酸残基的γ一羧酰胺基团与赖氨酸氨基酸残基的游离胺基团之间的共倍的β乳球蛋白的低聚物)，和/或蛋白质(特别是分子量为β乳球蛋白分子量的三倍的β[0150]在实施方案中，乳制品或其替代物包含分子量为16kDa至180kDa、优选16kDa至[0152]本领域的技术人员将理解，他们可自由地合并本文所公开的本发明的所有特[0157]用水稀释由92重量％的β一乳球蛋白组成的β一乳球蛋白分离物(即Lacprodan8[0159]使用实施例1中获得的含交联蛋白质的组合物制备根据本发明的乳(下文中称为糖水似的配方制备。然而，35重量％的实施例1的含交联蛋白质的组合物被3.5重量％的糖水有利于减少游离钙离子与蛋白质分子的相互作用。这将导致在钙的存在下增强的热稳定[0187]对实施例1的含交联蛋白质的组合物(下文称为交联的BLG)并且对未处理的含蛋[0189]评估交联的BLG和未处理的BLG样品。使用差示扫描量热计DSC3+(Mettler[0196]因此，差示扫描量热法数据倾向于证实β一乳球蛋白的交联改善了它们的热稳定[0207]现有技术文献D1＝MarianaBattaglinvillas一boa等人，“Theeffectoflactoglobulinantigenicity”,internationaldairyjournal,Elsevierapplied[0208]在本发明实施例中评估了如现有技术文献D1中公开的在转谷氨酰胺酶处理之前[0210]用水稀释由92重量％的β一乳球蛋白组成的β一乳球蛋白分离物(即Lacprodan"80℃下热处理1小时。糖水