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文档简介
饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定酶联免疫吸附法2018-12-25发布2019-03-25实施湖南省市场监督管理局发布前言 Ⅱ 12规范性引用文件 1 4试剂与材料 5仪器与设备 2 27试样和阳性添加试料的制备 8提取与测定 29结果计算 2 211灵敏度、准确度、精密度 3工Ⅱ本标准按GB/T1.1—2009给出的规则起草。请注意本标准的某些内容可能涉及专利，本标准的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由湖南省畜牧水产局提出并归口。本标准起草单位：湖南省兽药饲料监察所、湖南鑫广安农牧股份有限公司。本标准主要起草人：李裕、肖安东、欧阳龙、陈立祥、宋跃君、袁旭鹏、陈罡、徐丽枚、黄勇、陈启友、谭美英、江小云、曹峰、刘芬、李艳平、周汝顺、雷加、周玉洁、江燕、邓钧红、魏唯。本标准规定了饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的酶联免疫吸附测定方法的原理、试剂与材料、仪器与设备、采样、试样和阳性添加试料的制备、提取与测定、结果计算、结果判断、灵敏度、准确度、精密度。本标准适用于我省植物性饲料原料、配合饲料、浓缩饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的快速检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。通过抗原抗体反应，特异性结合的酶标记物将底物转化为有色产物。酶标仪测定其吸光度，外标法定量。除另有说明外，所用试剂均为分析纯。实验用水应符合GB/T6682二级水的规定。4.1脱氧雪腐镰刀菌烯醇对照品：含量≥98.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。4.2脱氧雪腐镰刀菌烯醇对照溶液：取适量脱氧雪腐镰刀菌烯醇对照品，用水充分溶解后定容，使最终浓度为20μg/mL。置棕色瓶内4℃避光保存，保存期不超过15d。试剂盒由下列部分组成：不同厂家试剂盒产品组成或名称可能不同。25仪器与设备5.2天平：感量0.01g和感量0.00001g。5.3离心机：转速≥5000r/min。7试样和阳性添加试料的制备试样制备按GB/T20195的规定执行。9.1百分吸光度值以公式(1.1)表示：9.2以标准溶液中脱氧雪腐镰刀菌烯醇浓度(ng/mL)的自然对数为X轴，百分吸光度值为Y轴，绘制标10.1实验有效性判定标准曲线应线性良好，且R²≥0.9900。阳性添加试料回收率应为(60.0～130.0)%。供试试料检测结果低于定量限时，可判为未检出。当结果高于定量限时，建议用确证法确认。11灵敏度、准确度、精密度本方法在饲料中的定量限为100μg/kg。本方法在饲料中添加脱氧雪腐镰刀菌烯醇浓度为
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