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文档简介
实验一可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定一、实验原理可溶性还原糖+蛋白质+脂肪+斐林试剂双缩脲试剂砖红色沉淀苏丹Ⅲ染液苏丹Ⅳ染液橘黄色红色紫色颜色反应水浴加热可溶性还原糖:葡萄糖、果糖、麦芽糖(蔗糖、淀粉都没有还原性)
二、几种重要的试剂斐林试剂甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)乙液(0.05g/mL的CuSO4溶液)现配现用等量混合均匀双缩脲试剂A液(0.1g/mL的NaOH溶液)B液(0.01g/mL的CuSO4溶液)现配现用先加A液再加B液四、实验方法与步骤1、可溶性还原糖的鉴定(1)制备组织样液:苹果洗净、去皮、切块→取5g加少许石英砂研磨→加5mL水再研磨→漏斗垫纱布后过滤,得到样液(2)鉴定样液:取2mL样液于试管中→注入2mL刚配制的斐林试剂,振荡混合(淡蓝色)→水浴煮沸2min左右,观察溶液颜色变化(先变为棕色,再变为砖红色)2、脂肪的鉴定(1)切片制作(2)染色:在花生子叶切片上滴2~3滴苏丹Ⅲ染液→2~3min中后,吸去染液→滴体积分数为50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精,再滴1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片(3)镜检鉴定:在低倍物镜下观察,找到花生子叶切片的最薄处,移至视野中央→转动转换器,换用高倍物镜观察(脂肪滴:橘黄色的圆形小颗粒)3、蛋白质的鉴定(1)制备组织样液:浸泡黄豆1~2d→去皮、切成薄片,加少许石英砂及5mL水研磨→漏斗垫纱布后过滤,得到样液(用蛋清要稀释10倍以上,否则实验后黏住试管壁不易洗净)(2)鉴定样液:取2mL样液于试管Ⅰ中→加入
2mL双缩脲试剂A液摇匀(造成一个碱性环境)→加入双缩脲试剂B液
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