第1章 绪论医学形态

第1章绪论医学形态学实验（组织学与胚胎学）大连医科大学任翔目录组织学研究基本方法1组织学和胚胎学实验的学习方法2几种常用的组织（细胞）化学方法3组织学和胚胎学实验的学习方法1.光学显微镜的结构1. 目镜（eyepiece）；2. 视度调节器（oxyopteradjustor）；3. 目镜筒调节板（eyepiecesleeveregulatingplate）；4. 双目镜筒（binocularcylinder）；5. 物镜转换器（revolvingnosepiece）；6. 物镜（objective）；7. 镜臂（arm）8. 标本夹（exampleclamp）；9. 载物台（stage）；10. 粗调旋钮（coarseadjustmentknob）；11. 细调旋钮（fineadjustmentknob）；12. 孔径光阑（aperturediaphragm）；13. 聚光器（condenser）；14. 标本夹移动旋钮（exampleclamp

adjustmentknob）；15. 光源（sourcesoflight）；16. 镜座（base）；17. 电源开关（mainsswitch）；18. 光亮调节旋钮（lightness

adjustmentknob）组织学和胚胎学实验的学习方法2.光学显微镜的使用（1）将显微镜置于操作者正前方。（2）对准光源调节反光镜，使视野中的光线明亮均匀。若使用电光源显微镜，则插上电源，打开开关,调节至光亮度适合即可。（3）将切片标本平放固定在镜台标本夹上，注意有盖玻片的一面朝上。（4）调焦距、调节瞳距。（5）观察切片：先低倍、后高倍。组织学和胚胎学实验的学习方法3.切片观察

养成严格按照肉眼、低倍镜、高倍镜、油镜的顺序系统观察切片标本的习惯。应重视低倍镜下的观察，了解组织切片的全貌、层次、部位关系；再用高倍镜观察局部的放大结构。注意养成从整体到局部、从一般到特殊的观察习惯。组织学和胚胎学实验的学习方法4.胚胎学实验中应注意的问题（1）胚层来源（2）动态变化（3）时间概念（4）循序渐进（5）器官发生过程中相互诱导的意义目录1组织学研究基本方法2几种常用的组织（细胞）化学方法3组织学和胚胎学实验的学习方法组织学研究基本方法1.光学显微镜-HE染色HE染色流程图：HE染色结果观察：1. 细胞核（nucleus）； 2. 细胞质（cytoplasm）组织学研究基本方法2.电子显微镜光学显微镜与TEM的结构及成像原理对比：组织学研究基本方法2.电子显微镜TEM与SEM成像结果对比：目录1几种常用的组织（细胞）化学方法23组织学和胚胎学实验的学习方法组织学研究基本方法几种常用的组织（细胞）化学方法（一）过碘酸希夫反应（PAS）显示糖原和其他多糖反应原理：糖分子上1，2-乙二醇被强氧化剂过碘酸氧化后形成醛基，此醛基再与无色的品红硫酸复合物（Schiff试剂）结合，形成紫红色反应产物。结果观察：↙多糖（杯状细胞）polysaccharide（gobletcell）几种常用的组织（细胞）化学方法（二）酶组织化学方法1.二氨基联苯胺（DAB）法显示过氧化物酶反应原理：细胞内的过氧化物酶氧化孵育液中的底物二氨基联苯胺，转移2个电子给过氧化氢而产生水和氧化物，被氧化的联苯胺呈蓝色或棕色，因而可根据颜色反应判断组织内酶的有无与多少。结果观察：↙辣根过氧化物酶（horseradish

peroxidase，HRP）几种常用的组织（细胞）化学方法（二）酶组织化学方法2.四氮唑盐法显示琥珀酸脱氢酶反应原理：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶，氧化底物琥珀酸钠，所产生的氢离子为四氮唑盐捕获，还原为深色不溶的蓝色甲簪沉淀。而死亡细胞无此功能，则不显色。结果观察：1. 内毛细胞（inner

haircell）；2. 死亡外毛细胞（diedouterhaircell）；3. 外毛细胞（outerhaircell）几种常用的组织（细胞）化学方法（二）酶组织化学方法3.钙-钴法显示碱性磷酸酶反应原理：在碱性环境（pH9.2～9.4）中，碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，ALP）将磷酸盐的底物（如β-甘油磷酸钠，α-萘酚磷酸钠）分解，产生的磷酸离子被孵育液中的钙离子捕获生成磷酸钙沉淀。因磷酸钙不能显色，需加入硝酸钴，用钴离子置换钙离子，形成磷酸钴沉淀后用硫化铵处理，形成棕黑色硫化钴颗粒沉淀，从而显示酶活性部位，硫化钴沉淀的多少（阳性反应强度）与碱性磷酸酶含量成正比。几种常用的组织（细胞）化学方法（二）酶组织化学方法结果观察：反应通式简式：小肠绒毛吸收细胞呈深棕色，为碱性磷酸酶呈阳性反应。几种常用的组织（细胞）化学方法（三）脂类的显示方法1.苏丹混合染色法显示中性脂肪反应原理：苏丹混合染色法是一种物理学方法，由于苏丹混合染料溶于中性脂肪而显色。结果观察：1. 脂滴（lipiddroplet）； 2. 细胞核（nucleus）几种常用的组织（细胞）化学方法（三）脂类的显示方法2.脂类的异丙醇油红O染色反应原理：油红O属于偶氮染料，是很强的脂溶剂和染脂剂，易与三酰甘油结合呈小脂滴状。脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类，且溶解度较大，当组织切片置入染液时，染料则离开染液而溶于组织内的脂质（如脂滴）中，使组织内的脂滴呈橘红色。结果观察：几种常用的组织（细胞）化学方法（四）核酸（DNA）的显示方法1.福尔根反应显示DNA反应原理：先用弱酸（1mol/LHCl）水解细胞核中DNA，打开嘌呤碱基和脱氧核糖之间的连接键，释放醛基，然后与希夫试剂结合。当与标本接触后，无色品红即与醛基结合形成紫红色化合物沉淀，此即为DNA。结果观察：几种常用的组织（细胞）化学方法（四）核酸（DNA）的显示方法2.DAPI染色显示DNA反应原理：DAPI为4′，6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐（4′，6-diamidino-2-phenylindole），是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，可与双链DNA小槽，特别是DNA碱基结合，结合后荧光强度增加20倍，荧光显微镜下观察，根据荧光的强度可以确定DNA的量。结果观察：DAPI显示细胞核呈蓝色几种常用的组织（细胞）化学方法