临床流式细胞检验技师考试试卷及答案

临床流式细胞检验技师考试试卷及答案临床流式细胞检验技师考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.流式细胞仪检测的前向散射光（FSC）主要反映细胞的______。2.常用红色荧光染料包括PE-Cy7、PerCP-Cy5.5和______。3.红细胞裂解常用试剂是______（或ACK裂解液）。4.流式激光光源常见488nm氩离子激光和______nm红光激光。5.检测细胞内抗原需先进行______处理（增加膜通透性）。6.流式数据横坐标通常表示荧光强度，纵坐标表示______。7.CD3阳性细胞代表______淋巴细胞。8.流式校准常用______微球（校准荧光强度）。9.细胞凋亡检测常用AnnexinV和______（PI）。10.流式样本制备后应在______小时内检测（避免活性下降）。二、单项选择题（每题2分，共20分）1.488nm激发、发射波长最长的荧光染料是？A.FITCB.PEC.APCD.PerCP2.侧向散射光（SSC）主要反映细胞的？A.大小B.内部结构复杂度C.活性D.荧光强度3.B淋巴细胞表面标志是？A.CD3B.CD19C.CD4D.CD84.红细胞裂解后保留的主要细胞是？A.红细胞B.白细胞C.血小板D.死细胞5.导致“粘连细胞”的常见原因是？A.样本未混匀B.裂解过度C.染色不足D.激光功率高6.G0/G1期细胞DNA含量是？A.2nB.4nC.2n-4nD.>4n7.AnnexinV主要结合凋亡细胞的？A.膜外侧磷脂酰丝氨酸B.细胞核DNAC.线粒体电位D.表面抗原8.同型对照的作用是？A.校准仪器B.排除非特异性染色C.计数细胞D.检测死细胞9.不适合直接检测的样本是？A.外周血单个核细胞B.骨髓细胞C.尿液D.未裂解红细胞全血10.T细胞亚群检测不包括的对照是？A.空白对照B.同型对照C.阳性对照D.阴性对照三、多项选择题（每题2分，共20分）1.流式细胞仪核心部件包括？A.液流系统B.光学系统C.电子系统D.计算机分析系统2.细胞表面抗原标记方法有？A.直接免疫荧光法B.间接免疫荧光法C.桥联法D.生物素-亲和素法3.T细胞表面标志包括？A.CD3B.CD4C.CD8D.CD164.细胞凋亡检测方法有？A.AnnexinV/PI双染B.TUNEL法C.线粒体电位检测D.细胞周期分析5.流式样本制备关键步骤包括？A.样本采集B.红细胞裂解C.荧光染色D.固定破膜（如需）6.可被488nm激光激发的染料是？A.FITCB.PEC.APCD.PerCP7.流式质控内容包括？A.仪器校准B.荧光强度校准C.同型对照D.阳性对照8.骨髓流式检测应用包括？A.白血病免疫分型B.淋巴瘤诊断C.MRD检测D.免疫缺陷筛查9.S期细胞特点是？A.DNA合成活跃B.DNA含量2n-4nC.分裂期D.无DNA合成10.影响流式结果的因素有？A.样本溶血B.染色不足C.仪器未校准D.同型对照不当四、判断题（每题2分，共20分）1.FSC越强，细胞体积越大。（对/错）2.PE-Cy7可被488nm激光激发。（对/错）3.细胞内抗原检测无需固定破膜。（对/错）4.同型对照需与实验抗体种属、亚型一致。（对/错）5.PI是DNA特异性染料。（对/错）6.AnnexinV⁺PI⁻是坏死细胞。（对/错）7.激光光源越多，可检测荧光参数越多。（对/错）8.全血可直接流式检测。（对/错）9.CD16是NK细胞主要标志。（对/错）10.MRD检测是白血病监测关键手段。（对/错）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述流式细胞仪基本工作原理。2.红细胞裂解的注意事项有哪些？3.同型对照的设置目的及方法是什么？4.AnnexinV/PI双染法检测凋亡的原理及结果判断？六、讨论题（每题5分，共10分）1.讨论流式细胞仪在白血病免疫分型中的应用价值。2.讨论流式检测常见误差来源及控制方法。---参考答案一、填空题答案1.大小2.APC（别藻蓝蛋白）3.氯化铵溶液4.633/6355.固定破膜（通透化）6.细胞数7.T8.荧光校准9.碘化丙啶10.24二、单项选择题答案1.C2.B3.B4.B5.A6.A7.A8.B9.D10.A三、多项选择题答案1.ABCD2.ABCD3.ABC4.ABC5.ABCD6.ABD7.ABCD8.ABCD9.AB10.ABCD四、判断题答案1.对2.对3.错4.对5.对6.错7.对8.错9.对10.对五、简答题答案1.流式原理：液流系统将单个细胞依次通过激光照射区，激光激发荧光染料产生信号，同时检测FSC（大小）、SSC（内部结构）；光学系统收集信号经电子系统转换为电信号，计算机分析呈现直方图/散点图，实现细胞定量分析（或分选）。2.红细胞裂解注意事项：①选合适裂解液（避免损伤白细胞）；②控制时间（5-10分钟，防白细胞破裂）；③及时离心（1500rpm×5min）弃上清；④PBS洗涤2-3次（去残留裂解液）；⑤白细胞少则减少裂解液用量；⑥避免剧烈振荡（防细胞粘连）。3.同型对照目的及方法：目的是排除抗体非特异性结合。方法：①选与实验抗体同一种属、亚型的无关抗体；②相同荧光标记；③处理流程与实验一致；④以同型对照阳性率<2%为合格，确定阳性阈值。4.AnnexinV/PI双染原理及结果：原理：凋亡早期细胞PS外翻，AnnexinV特异性结合；PI不能进入活细胞/早期凋亡细胞，可进入坏死细胞。结果：①AnnexinV⁻PI⁻=活细胞；②AnnexinV⁺PI⁻=早期凋亡；③AnnexinV⁺PI⁺=晚期凋亡/坏死；④AnnexinV⁻PI⁺=机械坏死。六、讨论题答案1.白血病免疫分型应用价值：①快速区分AML/ALL，通过抗原（CD34、CD13、CD19等）明确细胞来源；②判断分化阶段（原始/成熟细胞），指导治疗；③检测MRD（灵敏度10⁻⁴-10⁻⁵），早期预测复发；④鉴别复发与髓外造血；⑤结合形态学/遗传学提高诊断准确性，是白血病诊断监测核心工具。2.常见误差及