第52讲　动物细胞工程-2026版一轮复习

第52讲动物细胞工程课标内容(1)阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。(2)阐明动物细胞核移植一般是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的过程。(3)阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段，使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。(4)概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。(5)简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。考点一动物细胞培养1.动物细胞培养原理：细胞增殖(1)地位动物细胞工程常用的技术有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合等。其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。(2)培养条件一般用液体培养基(3)培养过程(1)区分原代培养和传代培养的关键是看用胰蛋白酶处理的对象和是否分瓶。①分瓶前，第一次用胰蛋白酶对动物组织进行处理后的培养是原代培养。②第二次用胰蛋白酶处理，使细胞从瓶壁上脱离下来，分瓶后的细胞培养为传代培养。(2)细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。2.干细胞培养及其应用我用夸克网盘分享了「与您分享-国家、地方、行业、团体标准」，点击链接即可保存。打开「夸克APP」，无需下载在线播放视频，畅享原画5倍速，支持电视投屏。链接：/s/45a9f612fe59提取码：t9EX联系qq:1328313560我的道客巴巴：/634cd7bd0a3f5a7311db139533c20794

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(1)营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制。(2023·海南卷，7A)(×)提示会发生接触抑制。(2)进行动物细胞培养时，血清应经过高温处理后加入培养基。(2022·湖北卷，7C)(×)提示高温会使血清含有的促进细胞生长和增殖所需要的营养物质失活，而使培养的动物细胞生长缓慢等。(3)培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳。(2022·江苏卷，14B)(√)动物细胞培养和植物组织培养的比较考向1结合动物细胞培养，考查社会观念1.(2024·西安高新一中质检)如图为实验小鼠皮肤组织进行细胞培养的过程，下列叙述正确的是()A.动物细胞培养体现了动物细胞的全能性B.乙过程对皮肤组织可用胃蛋白酶处理C.丙过程为原代培养，遗传物质一定不变D.丁过程中某些细胞可能会无限增殖答案D解析动物细胞培养没有体现动物细胞的全能性，A错误；乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理，B错误；丙过程属于原代培养，此过程的细胞大部分能保持正常的二倍体核型，有些细胞的遗传物质也可能发生改变，C错误；丁过程属于传代培养，此过程少数细胞会发生突变，朝着癌细胞方向发展，可能会无限增殖，D正确。考向2结合干细胞培养及其应用，考查生命观念、社会责任2.(2024·山东烟台模拟)科研人员利用如图所示的流程，将小鼠多能干细胞(PSC)诱导成为精子，并使其成功与卵细胞受精，得到正常后代，这项研究给男性无精症导致的不孕不育带来了福音。下列分析不合理的是()A.PSC诱导形成精子的过程中，会发生细胞染色体数目的变化B.步骤④只能加入一个分化出的精子，以避免多个精子和卵细胞融合C.步骤⑤受精卵在体外培养时需提供95%空气和5%CO2的混合气体环境D.上述流程利用了动物细胞培养、体外受精和胚胎移植等生物技术答案B解析小鼠多能干细胞(PSC)诱导成为精子，并成功与卵细胞受精，得到正常后代(染色体数目与体细胞相同)，诱导形成精子的过程中，会发生减数分裂，会发生细胞染色体数目的减半，A正确；为保证受精的成功，步骤④可加入多个分化出的精子，卵细胞受精后会发生相应的变化避免多精入卵，B错误；动物细胞培养需要一定的气体环境，将其置于95%空气和5%的CO2环境中，C正确；题述流程利用了动物细胞培养、体外受精和胚胎移植等生物技术，D正确。3.(2024·福州一中模拟)干眼症是由泪液分泌减少导致的眼睛干涩的病症。将有关基因导入已分化的体细胞获得诱导多能干细胞(iPS细胞)，进而培养得到眼结膜组织，可分泌泪液成分“黏液素”，有望治疗干眼症。下列相关说法错误的是()A.导入的基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力B.利用iPS细胞获得眼结膜组织时应加入分化诱导因子C.iPS细胞核移植比体细胞核移植更容易表现全能性D.利用ES细胞治疗人类疾病的前景优于iPS细胞答案D解析根据题干，导入的基因能促使已分化的体细胞成为诱导多能干细胞(iPS细胞)，体细胞无分裂能力，而iPS细胞是一类有分裂能力的细胞，故导入的基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力，A正确；iPS细胞可分化为多种细胞，加入分化诱导因子才能获得相应的组织或器官，B正确；iPS细胞分裂能力强，分化程度低，所以iPS细胞核移植比体细胞核移植更容易表现全能性，C正确；iPS细胞不使用胚胎细胞或卵细胞，只需对体细胞进行操作及适当的培养即可，没有伦理学的问题，还可以避免免疫排斥，故利用iPS细胞治疗人类疾病的前景优于ES细胞，D错误。考点二动物细胞融合技术与单克隆抗体1.动物细胞融合技术2.单克隆抗体及其应用制备过程原理：细胞膜的流动性和细胞增殖①获取小鼠经免疫的B淋巴细胞的部位：脾。②两次筛选的目的：第一次是在诱导融合之后，利用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞。第二次是对上述杂交瘤细胞进行筛选，利用96孔板培养，采用专一抗体检测的方法筛选出能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞。③杂交瘤细胞的抗体检测和克隆化培养：融合后的细胞经选择培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。1.单克隆抗体的制备中需要给小鼠注射特定的抗原蛋白，其目的是什么？提示刺激机体发生免疫应答，从而产生特定的B淋巴细胞。2.单克隆抗体被广泛用作诊断试剂的原因是什么？提示单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备。3.请根据以下信息，设计一方法(不考虑机械方法)，从培养液中筛选出杂交瘤细胞，并写出其依据的原理。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。小鼠骨髓瘤细胞中尽管只有D途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加入聚乙二醇促融，获得杂交细胞。提示为了筛选出杂交瘤细胞，除去其他细胞，可向培养液中加入氨基嘌呤，收集能无限增殖的细胞，因为加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，而人的淋巴细胞及其彼此融合的细胞不能无限增殖，但人的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂交细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA且无限增殖。考向围绕动物细胞融合技术与单克隆抗体，考查科学思维1.(2024·江苏泰州模拟)人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA病毒，可诱发细胞癌变。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程如图所示。下列叙述错误的是()A.在HAT培养基上存活的杂交瘤细胞既能无限增殖又可以分泌抗体B.单克隆抗体的特点是能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备C.可用HPV衣壳蛋白检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞D.单克隆抗体制备过程涉及的生物学原理有细胞增殖和细胞膜的选择透过性答案D解析单克隆抗体的制备过程主要运用的细胞工程技术包括动物细胞培养和动物细胞融合，原理依次是细胞增殖、细胞膜的流动性，D错误。2.(2024·广东珠海调研)下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述错误的是()A.图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原B.利用PEG融合法、灭活病毒诱导法和电融合法等方法可诱导细胞融合获得乙C.用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长D.丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁答案C解析用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合的具有同种核的细胞和未融合的细胞均不能生长，只有杂交瘤细胞能生长，C错误。3.(2024·江西临川一中)抗体药物偶联物(ADC)是采用特定技术将具有生物活性的小分子药物连接到单克隆抗体上，实现对肿瘤细胞精准的选择性杀伤。ADC的结构及其发挥作用的机理如下图，有关叙述错误的是()A.ADC实现精准杀伤肿瘤细胞的基础是抗体与抗原特异性结合B.该肿瘤细胞死亡是在ADC诱导下细胞自动死亡的过程C.将特定抗原注射到小鼠体内，可以从小鼠血清中获得单克隆抗体D.对特定抗原筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养可获得单克隆抗体答案C解析由于单克隆抗体的特异性强，能特异性识别抗原，因此可以把抗肿瘤细胞的单克隆抗体与药物等相结合，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到肿瘤细胞，故ADC实现精准杀伤肿瘤细胞的基础是抗体与抗原特异性结合，A正确；ADC进入细胞后，溶酶体使其裂解，释放药物，导致细胞凋亡，肿瘤细胞凋亡是细胞自动死亡的过程，B正确；将特定抗原注射到小鼠体内，可以从小鼠血清中获得抗体，获得的抗体可能有多种，不是单克隆抗体，C错误；对特定抗原筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养可获得单克隆抗体，该种细胞的特点是既能迅速大量增殖，又能产生所需抗体，D正确。考点三动物体细胞核移植技术和克隆动物1.动物细胞核移植技术动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易；而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。2.体细胞核移植的过程3.体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题1.通过体细胞核移植方法生产的克隆动物，不是对体细胞供体动物进行了100%的复制，原因是___________________________________________________________________________________________________________________________。此外，动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系。提示克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但线粒体中的DNA来自受体卵母细胞2.某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请，其培育过程可选用如下技术路线。(1)探究“三亲婴儿”的性状表现与三个亲本的关系并分析原因。提示①因基因型与母亲(卵母细胞核供体)和父亲(精子细胞核供体)的核基因有关，大多数性状由母亲和父亲共同决定。②少数性状(受质基因控制的性状)与捐献者(卵母细胞细胞质供体)相同。(2)所谓的“三亲婴儿”中遗传学上的母亲应是哪一个？该技术主要是为了避免什么疾病？提示“三亲婴儿”中遗传学上的母亲应是提供卵母细胞核的个体。该技术主要是为了避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代。(3)据图分析，该技术涉及了哪些技术操作？提示该技术涉及动物细胞培养、体外受精、细胞核移植、胚胎移植等操作。(4)动物细胞核移植技术的理论基础(原理)是什么？提示动物细胞核的全能性。考向结合动物体细胞核移植技术，考查实践能力1.(2024·北京海淀模拟)科研人员用电融合的方法诱导母羊的乳腺上皮细胞与另一只羊的去核卵母细胞融合，然后将重构胚移植到代孕母羊的体内，最终培育出了克隆羊多莉。下表是科学家获得的部分实验数据，下列相关叙述，不合理的是()实验组别序号①②核供体细胞6岁母羊的乳腺上皮细胞发育到第9天的早期胚胎细胞融合成功细胞数277385早期发育成功胚胎数2990移植后成功怀孕母羊数/代孕母羊数1/1314/27出生并成活羔羊数1(多莉)4A.两组羔羊性状主要与核供体母羊相同B.②组比①组成功率高，可能因为胚胎细胞分化程度低C.本实验涉及细胞培养、核移植和胚胎分割技术D.克隆技术应用于人类，可能存在一定的伦理风险答案C解析由于遗传物质主要在细胞核内，所以两组羔羊性状主要与核供体母羊相同，A正确；动物胚胎细胞分化程度低、易恢复全能性，故②组比①组成功率高，B正确；本实验涉及细胞核移植、动物细胞培养，不涉及胚胎分割技术，C错误；我国禁止对人类克隆的原因是克隆人一旦成功，将严重威胁着人类社会的稳定，打破原有的人际关系，可能引发一系列社会伦理、道德和法律问题，D正确。2.(2024·广东茂名调研)如图为体细胞克隆猴“中中”和“华华”的培育流程，为建立人类疾病的动物模型、研究疾病机理带来光明前景。下列叙述正确的是()A.过程①将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，体现细胞膜的选择透过性B.过程②在培养基中加入的动物血清含有激发成纤维细胞核全能性表达的物质C.进行同期发情处理，可降低代孕母猴对“中中”“华华”的免疫排斥反应D.与模型小鼠相比，模型猴更适合于研究人类疾病的发病机理、研发诊治药物答案D解析过程①将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，未体现细胞膜的选择透过性，A错误；在培养基中加入一定量动物血清的作用是模拟内环境和补充未知的缺少的营养物质，激发成纤维细胞核的全能性表达的物质是卵母细胞细胞质中的物质，B错误；进行同期发情处理，目的是为胚胎移入受体提供相同的生理环境，C错误；猴子与人类的亲缘关系比小鼠近，与模型小鼠相比，模型猴更适合于研究人类疾病的发病机理、研发诊治药物，D正确。1.(2023·北京卷，12)甲状旁腺激素(PTH)水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，有关制备过程的叙述错误的是()A.需要使用动物细胞培养技术B.需要制备用PTH免疫的小鼠C.利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞D.筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞答案D解析单克隆抗体制备过程中需要对骨髓瘤细胞等进行培养，即需要使用动物细胞培养技术，A正确；该操作的目的是制备单克隆抗体用于快速检测PTH，故应用PTH刺激小鼠，使其产生相应的B细胞，B正确；抗原与抗体的结合具有特异性，可利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞，C正确；由于一种B细胞经分化形成浆细胞后通常只能产生一种抗体，故筛选出的单个杂交瘤细胞无法分泌多种抗体，D错误。2.(2022·北京卷，11)将黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠(Mc)。据此分析，下列叙述错误的是()A.获得Mc的生物技术属于核移植B.Mc表皮中有两种基因型的细胞C.注射入的细胞会分化成Mc的多种组织D.将接受注射的囊胚均分为二，可发育成两只幼鼠答案A解析获得Mc的生物技术并未利用核移植技术，A错误；接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠，说明Mc表皮中有两种基因型的细胞，B正确；内细胞团能发育成胎儿的各种组织，注射的细胞来自黑色小鼠的内细胞团，会分化成Mc的多种组织，C正确；利用胚胎分割技术将接受注射的囊胚均分为二，可发育成两只幼鼠，D正确。3.(2023·海南卷，7)某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是()A.营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制B.获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异C.XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化D.若某濒危哺乳动物仅存在雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育答案A解析传代培养的胚胎干细胞增殖到贴满瓶壁时会发生接触抑制，A错误；据题干“将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞”可知，该过程中发生了染色体数目变异，B正确；XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞过程中，细胞的形态、结构和生理功能发生了变化，即发生了细胞分化，C正确；若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可以通过去除胚胎干细胞的Y染色体等一系列处理获得有功能的卵母细胞，用于繁殖后代，D正确。4.(2022·辽宁卷，24)某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中，需要表达N蛋白胞外段，制备相应的单克隆抗体，增加其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。Ⅰ.N蛋白胞外段抗原制备，流程如图1(1)构建重组慢病毒质粒时，选用氨苄青霉素抗性基因作为标记基因，目的是____________________________。用脂质体将重组慢病毒质粒与辅助质粒导入病毒包装细胞，质粒被包在脂质体________(填“双分子层中”或“两层磷脂分子之间”)。(2)质粒在包装细胞内组装出由________组成的慢病毒，用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、纯化N蛋白胞外段。Ⅱ.N蛋白胞外段单克隆抗体制备，流程如图2(3)用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用酶处理，制成细胞悬液，置于含有混合气体的中培养，离心收集小鼠的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞进行融合。(4)用选择培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行培养。用技术检测每孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，经体外扩大培养，收集，提取单克隆抗体。(5)利用N蛋白胞外段抗体与药物结合，形成，实现特异性治疗。答案(1)用于筛选病毒包装细胞双分子层中(2)核酸和蛋白质(3)胰蛋白二氧化碳培养箱(4)单独抗原—抗体杂交细胞培养液(5)ADC(抗体—药物偶联物)解析(1)构建重组慢病毒质粒时，选用氨苄青霉素抗性基因作为标记基因，目的是在含有氨苄青霉素的培养基中可以筛选出病毒包装细胞。脂质体是一种人工膜，在水中磷脂分子亲水头部插入水中，脂质体疏水尾部伸向空气，搅动后形成双层脂分子的球形脂质体，用脂质体将重组慢病毒质粒与辅助质粒导入病毒包装细胞，质粒被包在脂质体双分子层中。(2)质粒在包装细胞内组装出由核酸和蛋白质组成的慢病毒，用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、纯化N蛋白胞外段。(3)小鼠脾组织用胰蛋白酶处理，使其分散，制成细胞悬液，置于含有混合气体(95%空气和5%二氧化碳)的二氧化碳培养箱中培养。(4)用选择培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，每个孔尽量只接种一个杂交瘤细胞，进行单独培养，利用抗原—抗体杂交法筛选，经体外扩大培养，收集细胞培养液，提取单克隆抗体。(5)利用N蛋白胞外段抗体与药物结合，形成ADC(抗体—药物偶联物)，实现特异性治疗。限时强化练(时间：30分钟)【对点强化】考点一动物细胞培养1.(2024·江苏盐城质检)下图为肾脏上皮细胞培养过程示意图，下列叙述错误的是()A.甲→乙过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B.丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中进行原代培养C.丙和丁过程均会出现细胞贴壁和接触抑制现象D.丁过程是传代培养的细胞，该过程体现了动物细胞的全能性答案D解析甲→乙过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理获得单细胞，A正确；由题图分析可知，丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中进行原代培养，B正确；丙过程为原代培养，丁过程为传代培养，都会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象，C正确；丁过程为传代培养，属于细胞培养，不能体现动物细胞的全能性，D错误。2.(2024·辽宁大连检测)科学家将c－Myc、Klf4、Sox2和Oct－3/4这四个关键基因转入高度分化的小鼠成纤维细胞内，细胞在一定条件下转变成iPS细胞。在适当条件诱导下，iPS细胞可以定向分化成各种细胞。下列叙述错误的是()A.图示过程运用了转基因技术和动物细胞培养技术B.iPS细胞分化成各种组织细胞过程中DNA序列不变C.iPS细胞的分裂、分化能力比造血干细胞弱D.小鼠成纤维细胞转变成iPS细胞与植物组织培养的脱分化过程类似答案C解析据图分析，将四个关键基因转入高度分化的小鼠成纤维细胞，在一定条件下转变成iPS细胞，iPS细胞分化成多种细胞，运用了转基因技术和动物细胞培养技术，A正确；细胞分化的实质是基因的选择性表达，使得细胞内信使RNA和蛋白质改变，但DNA不变，B正确；iPS细胞可以分化为多种组织细胞，造血干细胞只能分化为各种血细胞或免疫细胞，故iPS的分裂、分化能力比造血干细胞强，C错误；小鼠成纤维细胞转变成iPS细胞过程中，细胞恢复分裂、分化能力，与植物组织培养的脱分化过程类似，D正确。考点二动物细胞融合技术与单克隆抗体3.(2024·成都七中诊断)骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT－)，在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。如图为杂交瘤细胞制备示意图，下列相关叙述错误的是()A.可用灭活的仙台病毒和聚乙二醇诱导细胞融合B.培养液中的细胞两两融合后都能在HAT培养液中生长C.杂交瘤细胞需经过HAT培养液筛选后才能用于生产D.细胞膜的流动性是细胞融合的基础答案B解析两两融合的细胞包括B淋巴细胞与B淋巴细胞融合的具有同种核的细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合的具有同种核的细胞、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞，骨髓瘤细胞虽然能无限增殖，但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，B淋巴细胞虽然有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，但不能无限增殖，所以在HAT培养液中，两两融合的具有同种核的细胞都无法生长，只有杂交瘤细胞才能生长，B错误。4.(2024·重庆一中质检)在单克隆抗体制备中，关于杂交瘤细胞制备的叙述，正确的是()A.可利用电融合等物理方法直接诱导两个细胞的融合B.可利用细胞中染色体的数目和形态筛选出杂交瘤细胞C.利用了细胞膜的流动性和基因重组等原理D.用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体答案A解析单克隆抗体制备中可利用电融合等物理方法直接诱导两个细胞的融合，A正确；因为观察细胞染色体需要对细胞解离等处理，细胞会死亡，所以不能通过观察染色体的数目和形态来筛选杂交瘤细胞，B错误；利用了细胞膜的流动性和细胞增殖等原理，C错误；用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞需要在专一抗体检测和克隆化培养后才能用于生产单克隆抗体，D错误。5.(2024·河北衡水模拟)H—Y抗原存在于雄性个体细胞的表面，决定性腺向雄性方向发育。可在牛早期胚胎培养液中添加H—Y单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是()A.培养液中添加H—Y单克隆抗体能促进牛早期胚胎发育成雄性C.该单抗制备过程中通常将分离出的T淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合C.囊胚期性别鉴定后获得的雄性胚胎可进行胚胎移植D.用H—Y抗原免疫母牛也可以获得相应抗体答案D解析培养液中添加H—Y单克隆抗体，可以和H—Y抗原特异性结合，但不能促进牛早期胚胎发育成雄性，A错误；制备单克隆抗体所用的杂交瘤细胞，是(免疫过的)B淋巴细胞和能无限增殖的骨髓瘤细胞融合形成的，B错误；囊胚期性别鉴定后获得的雌性胚胎可进行胚胎移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药，C错误；抗原是能够引起机体产生特异性免疫反应的物质，用H—Y抗原免疫母牛，使其体内发生体液免疫反应，产生相应的浆细胞，进而获得相应抗体，D正确。6.(2024·沈阳二中质检)一系列实验证明细胞膜具有流动性，荧光抗体免疫标记实验就是其中的一个典型例子。如图表示人、鼠细胞融合的过程，研究中分别将带有绿色荧光、能与人体细胞膜上HLA抗原特异性结合的抗体和带有红色荧光、能与小鼠细胞膜上H2抗原特异性结合的抗体放入细胞培养液中，对人、鼠细胞进行标记。下列有关该实验的叙述，错误的是()A.要使实验现象明显，可以适当提高细胞培养液的温度B.选取不同生物细胞进行融合是因为不同生物细胞表面抗原差异较大C.实验表明不同种生物细胞可以杂交，而同种生物细胞不能进行融合D.实验结果可以证明细胞膜上的蛋白质分子可以运动答案C解析细胞膜的流动性与温度有关，因此为了使实验现象明显，可适当提高细胞培养液的温度，A正确；由于采用了免疫荧光标记法，而同种生物细胞膜上的蛋白质相似程度很大，因而难以找到特异性蛋白，采用异种生物细胞可以达到这一目的，B正确；由于不同细胞的细胞膜结构基本相似，因而同种或不同种生物细胞均可以相互融合，C错误；细胞膜融合实验表明了细胞膜的磷脂分子与大多数蛋白质分子均是可以运动的，D正确。7.(2024·江苏连云港模拟)关于图示的单克隆抗体制备过程，下列说法错误的是()A.过程①中注射的抗原能与产生的单克隆抗体特异结合B.过程②得到的三种类型的细胞均不能在HAT培养液中增殖C.过程③采用抗原—抗体反应进行特定杂交瘤细胞的筛选D.过程④获得的全部杂交瘤细胞都只能产生同一种抗体答案B解析生产的单克隆抗体要经过抗原(与过程①的抗原相同)筛选得到，因此过程①中注射的抗原能与产生的单克隆抗体特异结合，A正确；过程②得到的三种类型的细胞都是杂交瘤细胞，产生的抗体类型有差异，但都能在HAT培养液中增殖，B错误；过程③采用特定抗原进行杂交瘤细胞的筛选，原理是抗原—抗体反应，C正确；过程④为克隆化培养，该过程获得的全部杂交瘤细胞都只能产生同一种抗体，D正确。考点三动物体细胞核移植技术和克隆动物8.(2024·福建厦门质检)下图表示改造哺乳动物遗传特性的两种途径。下列叙述错误的是()A.将外源基因导入受体细胞使用了显微注射法B.获得动物1的受体细胞是受精卵C.获得动物2的过程体现了受体细胞具有全能性D.动物1和2的获得过程均运用了胚胎移植技术答案C解析受体细胞为动物细胞时，将外源基因导入受体细胞使用了显微注射法，A正确；转基因动物的获得需将目的基因导入受精卵，故获得动物1的受体细胞是受精卵，因为受精卵的全能性高，B正确；获得动物2采用了核移植技术，其原理是动物细胞的细胞核具有全能性，C错误；两种动物的获得均运用了胚胎移植技术，D正确。9.(2024·江苏南通模拟)2018年1月国际顶尖学术期刊《Cell》杂志报道，我国科学家以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体成功克隆两只猕猴，其成为全球首例体细胞克隆灵长类动物。下列相关叙述错误的是()A.这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性B.研究中需要使用MⅡ期卵母细胞作为核移植的受体C.培育出的两只雌性猕猴的基因组成几乎完全相同D.克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供了可能答案A解析因为克隆的两只猕猴是以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体发育而来的，该过程经过了细胞核移植，只能说明分化的动物体细胞的细胞核具有全能性，A错误。【综合提升】10.(2024·湖北武昌模拟)某科研小组一直致力于良种家畜的培育工作，目前从国外引进优质肉牛，通过克隆技术快速繁殖。请回答：(1)获得克隆动物的方式属于生殖。研制克隆动物的生物学原理是___________________________________________________________________。(2)利用体细胞核移植技术克隆优质肉牛的实验流程如图，对供体细胞进行培养时，要用酶处理健康动物的组织，使细胞分散成单个细胞。诱导重组细胞分裂常用的化学物质有，图中①②所涉及的实验技术名称是①，②________________________。(3)最终得到的克隆动物是否与优质肉牛遗传物质完全一样？(填“是”或“否”)，理由是_____________________________________________________________________________________________________________________。(4)请提出体细胞核移植技术的应用前景：_________________________________________________________________________________________________。答案(1)无性已分化动物体细胞的细胞核有全能性(2)胰蛋白酶、胶原蛋白Ca2＋载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等显微操作去核法胚胎移植技术(3)否克隆动物的细胞核遗传物质来自核供体动物优质肉牛，细胞质遗传物质来自去核卵母细胞供体母牛(4)保护濒危动物；转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产许多珍贵的医用蛋白；在治疗人类疾病时，转基因克隆动物细胞、组织、器官可以用于异种移植解析(1)获得克隆动物的方式属于无性生殖；研制克隆动物的生物学原理是已分化动物体细胞的细胞核有全能性。(2)利用体细胞核移植技术克隆优质肉牛的实验在对供体细胞进行培养时，要用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理健康动物的组织，使细胞分散成单个细胞；诱导重组细胞分裂常用的化学物质有Ca2＋载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等；图中①②所涉及的实验技术名称是①显微操作去核法，②胚胎移植技术。(3)克隆动物的细胞核遗传物质来自核供体动物优质肉牛，细胞质遗传物质来自去核卵母细胞供体母牛，所以最终得到的克隆动物与优质肉牛遗传物质不完全一样。(4)体细胞核移植技术还能用于保护濒危动物；转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产许多珍贵的医用蛋白；在治疗人类疾病时，转基因克隆动物细胞、组织、器官可以用于异种移植。11.(2024·河南天一大联考)生物靶向治疗是目前治疗恶性肿瘤的重要研究方向。肿瘤一般处于细胞外间隙的深部，使用高效的细胞毒素药物进行