医学26年：流式细胞术结果解读 查房课件

1流式细胞术结果解读的前置准备演讲人2026-05-01

流式细胞术结果解读的前置准备01不同临床标本的流式结果解读要点02流式结果解读的常见误区03目录

医学26年：流式细胞术结果解读查房课件各位主治医师、进修医师、规培医师，今天我们血液科教学查房的核心主题，就是近期3例诊断存疑病例共同暴露的问题——流式细胞术结果的规范解读。我行医26年，从当年流式细胞术刚引入国内、仅能做简单淋巴细胞亚群分群，到现在覆盖血液系统疾病诊断、免疫功能评估、微小残留病监测、实体瘤循环肿瘤细胞检测等多个场景，前前后后看过超过12000份流式结果，最深的体会就是：流式的上机染色、仪器出图都有标准化流程，难度不大，但结果解读最考验临床功底，差之毫厘就会谬以千里。今天我们就从解读前置准备、分场景解读要点、常见误区、核心原则几个维度，系统梳理流式结果解读的规范，帮大家建立正确的临床思维。01ONE流式细胞术结果解读的前置准备

流式细胞术结果解读的前置准备拿到一份流式结果，第一步不是直接看异常，而是先确认结果本身的可靠性，这是所有解读的基础。

1解读前必须完成三级质控核查1.1样本质量核查首先要确认标本的采集时间、处理时间和细胞活性。我上周刚碰到一例锁骨上淋巴结穿刺的病例，临床周六穿刺，标本置4℃冰箱放置18小时后周日才上机，结果淋巴细胞活性仅28%，大量细胞碎片，年轻医生把碎片的非特异性染色当成了异常B细胞群，差点报了淋巴瘤侵犯。常规来说，骨髓、穿刺活检标本必须6小时内处理上机，外周血标本不能超过12小时，细胞活性低于70%的结果必须标注不合格，建议重采，不能勉强发报告。

1解读前必须完成三级质控核查1.2染色与仪器质控核查其次要确认同型对照设置正确、荧光补偿调节到位，仪器每日质控在控。我刚工作那会，有一例疑似急性B淋巴细胞白血病的病例，因为荧光补偿偏倚，导致CD34出现假阳性，当时差点按高危ALL安排化疗，后来复查才发现是补偿调节错误，虚惊一场。每次解读前必须先看补偿：不同荧光通道的阴性群是不是对齐在同一对数线上，有没有异常拖尾，这是最基础也最容易被忽略的细节。

1解读前必须完成三级质控核查1.3抗体panel匹配性核查还要确认检测的抗体组合符合临床需求，比如怀疑浆细胞疾病，有没有做胞浆轻链染色；怀疑淋巴瘤，有没有覆盖全套分化抗原和轻链检测，抗体不全的结果不能直接判读，必须说明局限性。

2规范圈门的核心逻辑很多年轻医生解读结果，第一步就错在圈门，我再强调一遍规范的圈门顺序：

2规范圈门的核心逻辑2.1第一步：去除干扰因素先做FSC-A/SSC圈出整体细胞群，再用FSC-A/FSC-H去除细胞黏连体，最后用活细胞染料（PI/DAPI）圈出活细胞，很多年轻医生跳过这一步直接分析染色结果，很容易把细胞碎片或黏连细胞当成异常细胞。

2规范圈门的核心逻辑2.2核心分群：CD45/SSC分群对于骨髓和组织标本，必须先用CD45/SSC把细胞分成不同亚群：淋巴细胞CD45高表达、SSC低；单核细胞CD45中表达、SSC中等；粒细胞CD45中低表达、SSC高；原始/幼稚细胞CD45低表达、SSC低；红细胞、细胞碎片CD45阴性，这个分群是找到异常细胞的基础，我现在看结果还是会先看这张图。

2规范圈门的核心逻辑2.3异常细胞群的识别原则只要在点图上出现独立于正常细胞的异常分群，不管比例多少，都要单独提取出来分析。我10年前曾经碰到过一例体检发现M蛋白升高的患者，骨髓涂片没有看到异常浆细胞，流式里只有0.4%的异常表型浆细胞，最后骨髓活检确诊了早期多发性骨髓瘤，早发现早干预，患者现在还在维持治疗，状态很好，所以不要因为比例低就忽略异常分群。完成前置的质控核查和规范圈门后，我们接下来结合不同临床场景，具体说一下不同标本的解读要点，这也是临床工作中最常用的核心内容。02ONE不同临床标本的流式结果解读要点

1骨髓标本：血液系统疾病诊断的核心标本1.1急性白血病免疫分型解读核心是识别原始细胞的系列来源，确定白血病的免疫分型：比如B-ALL通常表现为CD19、CD10、TdT、CD34共表达的异常原始B细胞；AML则表现为CD33、CD13、MPO阳性的原始髓系细胞，这里要注意弱表达的标记，不要漏诊双表型白血病，我去年碰到一例，年轻医生只看到了B系标记，没注意到髓系标记的弱表达，最后修正为双表型白血病，调整了治疗方案，对患者预后的影响很大。

1骨髓标本：血液系统疾病诊断的核心标本1.2淋巴瘤骨髓侵犯与微小残留病解读核心是识别克隆性细胞，对于B细胞来源，重点看κ/λ轻链限制性：正常B细胞κ/λ比例约2:1，如果λ/κ>2或者κ/λ>10，就可以判定为克隆性B细胞，哪怕比例只有0.1%，也要提示骨髓侵犯。我去年有一例随访的滤泡性淋巴瘤患者，PET-CT没有发现异常代谢病灶，但是流式发现骨髓里0.3%的λ限制性B细胞，提示早期复发，提前干预后很快得到控制，比影像学发现复发早了整整6个月。

1骨髓标本：血液系统疾病诊断的核心标本1.3浆细胞疾病的解读正常浆细胞的免疫表型是CD38强阳性、CD138阳性、CD19阳性、CD45弱阳性；异常克隆性浆细胞通常表现为CD19阴性、CD56阳性、CD45阴性、轻链限制性，这个表型差异是诊断多发性骨髓瘤、意义未明的单克隆丙种球蛋白血症的核心。

2淋巴结与体表肿物穿刺标本2.1反应性增生与恶性克隆的鉴别核心就是轻链限制性：反应性增生的B细胞是多克隆，κ/λ比例在正常范围，T细胞也是多克隆性；恶性淋巴瘤的B细胞是单克隆，有明确的轻链限制性，同时伴随异常表型，比如CD5异常表达、CD20缺失等等。上个月我们有一例年轻患者，EB病毒感染后颈部淋巴结肿大，年轻医生看到淋巴细胞比例升高就怀疑淋巴瘤，我看了流式，κλ比例完全正常，就是EB病毒诱导的反应性增生，随访了2个月淋巴结完全消退了，避免了不必要的进一步创伤性检查。

2淋巴结与体表肿物穿刺标本2.2少见类型淋巴瘤的表型识别要牢记常见特殊类型淋巴瘤的特征性表型：套细胞淋巴瘤是CD19⁺CD5⁺CD23⁻，边缘区淋巴瘤是CD19⁺CD5⁻CD10⁻，经典型霍奇金淋巴瘤的RS细胞通常CD30⁺CD15⁺CD45⁻，这些特征性表型是病理诊断之外最重要的辅助诊断依据。

3脑脊液、胸腹水等体液标本3.1中枢神经系统受累的识别脑脊液标本细胞量少，只要发现有异常表型的克隆性细胞，哪怕只有几个，都要提示淋巴瘤/白血病中枢侵犯，不要因为比例低就忽略。

3脑脊液、胸腹水等体液标本3.2胸腹水标本要注意排除干扰反应性间皮细胞会出现非特异染色，不要把反应性增生的间皮细胞当成恶性肿瘤细胞，间皮细胞通常表达CD146、钙网膜蛋白，可以和上皮来源肿瘤、淋巴细胞肿瘤鉴别。讲完不同标本的解读要点，我们再来说说临床工作中最容易掉进去的误区，这些也是我行医26年自己踩过坑、也见过很多年轻医生踩坑的地方，给大家提个醒。03ONE流式结果解读的常见误区

1忽略标本质量导致的误判1.1抗原降解导致假阴性很多抗原比如CD10、TdT对存放时间和温度很敏感，标本放置超过6小时，抗原就会降解，表达减弱，导致假阴性，所以不合格的标本一定要要求重新采集，不能勉强发报告。

1忽略标本质量导致的误判1.2杂质细胞干扰导致假阳性比如外周血里大量有核红细胞，或者标本里的血小板聚集，很容易被圈进原始细胞门里，导致假阳性，解读的时候一定要注意结合CD45染色区分不同细胞群。

2圈门不规范导致的误判2.1正常生理变异误判为异常正常骨髓里本身就存在不到1%的CD34阳性干祖细胞，不要随便把这些细胞当成异常原始细胞，诊断白血病一定要看表型是不是异常，不是只要CD34阳性就是恶性细胞。

2圈门不规范导致的误判2.2检测方法错误导致轻链误判很多年轻医生检测浆细胞轻链，只染膜轻链，实际上正常和异常浆细胞的轻链主要表达在胞浆，膜轻链染色很容易出现假的限制性结果，所以浆细胞疾病必须做胞浆轻链染色，这个错误我在院学会诊里碰到过不下十次，很多单位都容易忽略这个细节。

3脱离临床孤立解读结果这是最常见的错误，流式结果永远要结合临床信息综合判断。比如异基因造血干细胞移植后的患者，因为移植物抗宿主病，体内会出现大量的T细胞克隆性增殖，不要看到T细胞亚群异常就诊断T细胞淋巴瘤，一定要结合移植病史、临床症状综合判断。我之前会诊过一例移植后2年的患者，外院怀疑T细胞淋巴瘤，我看了流式，虽然T细胞有寡克隆扩增，但是结合患者慢性GVHD的病史，考虑反应性增生，随访了3年，患者都状态稳定，没有进展。还有病毒感染的时候，比如EB病毒、巨细胞病毒感染，都会出现CD8阳性T细胞的大量扩增，不要看到细胞比例异常就误诊为T细胞淋巴瘤。梳理完以上所有内容，我们最后再对今天的内容做一个总结：

3脱离临床孤立解读结果今天我们从流式结果解读的前置质控准备、规范圈门逻辑，到不同临床标本、不同疾病场景的解读要点，再到临床常见的误读误区，系统梳理了流式细胞