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文档简介

15I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由内蒙古大学、内蒙古自治区农牧业技术推广中本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC11奶绵羊常规及性控冷冻精液生产技术规程GB/T31581牛性控冷冻精液生产技术NY/T3186羊冷冻精液生产技术规程3.13.23.33.4经特殊方法处理并超低温冷冻后在液氮中（-196℃)长期保存的精液。2精子密度测定仪检测鲜精密度，合格鲜精精子密度≥8×108个活力检查按照GB20557要求执行，后加TrisA至总体积的一半稀释，水浴10min。TrisA稀释中，在4℃低温柜中平衡2h，加冷藏的TrisB液至总体积7.3性控精液分离、稀释3评估合格的精液使用TrisA液按体积1:1等温稀释后，置于18℃~20℃的环境下保存、待用。精子分离步骤按照GB/T31581要求执行。分离精子收集液中每毫升添加0分离后的精子收集液在4℃条件下平衡90min，然后4℃、850g离心20min，去除上清液，用含7,4精液分装与标识冻程序设置为：4℃~-10℃时降温速率5℃/min；-10℃~-100℃时降温速率60℃/min；干净，剪掉没有海绵塞一端封口，用推针推动海9.2解冻后合格标准精子畸形率≤20%。检测方法按照GB205545A.1试剂纯度要求Tris27.1g、柠檬酸14g、果糖10g、M19920素各10000IU，加超纯水至1000mL，调节溶液pH值到TrisA液90mL、甘油10mL，磁力搅拌混6细管冷冻精液标识由5个部分组成，每部分之间空开2个字符位置，排列顺序由棉塞端到封口端依第一部分以公司缩写代号为准；第二部分“性控标记”标识：“N-Sexed”为常规冻精，“Sexed-X”为雌性，“Sexed-Y”为雄性；第三部分品种代号以GB20557为依据；第四部分公羊号取该奶绵羊FDZYN-SexedEF27荧光显微镜、烘片机、多聚赖氨酸粘附性载玻片、HSOF、PBS、4%多聚甲醛、F加入适量的PBS重悬精子，并向其中加入4%多聚甲醛对精子进行固定，固定约30用超纯水缓慢洗涤玻片，放烘片机上干燥，并用PBS与甘油的荧光显微镜下观察，共计数至少200个精子来统计冻后精子顶体完整率，若精子头部均染成明亮的C=C1/S×100%…………………C1——顶体完整的精子数，单位为个;8解冻冻精于1.5mL离心管中，向管中加1mLHSOF并混匀，1500

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