《微生物检验技术培训课程》课件-病毒概述

病毒概述VIRUSES-OVERVIEWOFVIRUSES什么是病毒？是一类体积微小、结构简单。只含有一种核酸类型。严格细胞内寄生。以复制方式增值的非细胞型微生物。病毒目录CONTENTS三病毒的实验室诊断二病毒的感染病毒的基本性状与分类一一、病毒的基本性状与分类病毒的基本性状与分类病毒体：完整的成熟病毒颗粒，具有典型的形态结构，并有感染性。（一）病毒的大小测量单位：纳米表示1nm=1/1000μm1cm=10000μm=10000000nm，1μm=1000nm各种病毒体大小差别悬殊，最大的病毒约300nm，如牛痘病毒；最小的病毒约20nm，如脊髓灰质炎病毒。测量方法：电子显微镜观察法（一）病毒的大小葡萄球菌(1000nm）C

牛痘病毒300×250nmABDEFG立克次体450nm衣原体390nmA.大肠杆菌噬菌体(65×95nm)B.腺病毒（70nm)C.脊髓灰质炎病毒（20-30nm）D.乙脑病毒(40nm)E.蛋白分子（10nm)F.流感病毒(100nm)G.烟草花叶病毒（二）病毒的形态大多数人类和动物病毒为球形或近似球形蝌蚪形——如：噬菌体子弹形——如：狂犬病病毒砖块形——如：痘类病毒丝状或杆状——多见于植物病毒砖块形（痘病毒）子弹形（狂犬病病毒）杆状（烟草花叶病病毒）（三）病毒的结构与化学组成核心衣壳包膜包膜病毒基本结构（核衣壳）核心衣壳裸病毒特殊结构(包膜)（三）病毒的结构与化学组成1.核心：核酸+蛋白质核酸：病毒基因组，DNA或RNA。决定病毒各种特性。具有感染性。感染力弱，宿主范围广。蛋白质：多为功能蛋白质，助力病毒增殖。核心（三）病毒的结构与化学组成2.衣壳：核心外的一层蛋白质。由一定数量的壳粒组成。电镜下，壳粒之间对称排列：螺旋对称形、20面体立体对称形、复合对称形。衣壳（三）病毒的结构与化学组成壳粒20面体立体对称复合对称螺旋对称（三）病毒的结构与化学组成2.衣壳：作用：保护病毒核酸。与宿主细胞表面受体结合，参与感染过程。具有抗原性,诱发免疫应答。衣壳（三）病毒的结构与化学组成3.特殊结构：包膜（脂类、糖类、蛋白质）包膜是病毒以出芽方式向细胞外释放时，穿过宿主细胞的核膜或细胞膜而获得的。包膜刺突胞膜子粒与病毒入侵有关，宿主细胞胞膜具有抗原性，包膜中的脂类对脂溶剂敏感。（三）病毒的结构与化学组成核心+衣壳——裸露病毒核心+衣壳+包膜——包膜病毒（四）病毒的分类根据遗传物质不同分为：DNA病毒RNA病毒蛋白质病毒（朊病毒）病毒寄生生物体不同分为：植物病毒动物病毒细菌病毒二、病毒的感染二、病毒的感染病毒感染的类型病毒的致病机制23病毒的感染途径和方式1（一）病毒的感染途径和方式1.水平传播呼吸道消化道昆虫叮咬动物咬伤接触传播血液及血制品感染病毒侵入机体的五大重要门户病毒在人群不同个体间的传播。（一）病毒的感染途径和方式病毒通过胎盘或产道，由母亲传给胎儿的方式。例如：风疹病毒、乙肝病毒、艾滋病病毒等。2.垂直传播（二）病毒感染的类型机体获得特异性免疫向外播散病毒隐性感染显性感染急性感染持续性感染慢性感染——如慢性乙型肝炎慢发感染——如艾滋病潜伏感染——如水痘-带状疱疹（三）病毒的致病机制1.病毒感染对宿主细胞的直接作用2.免疫应答导致的病理损伤细胞膜改变：可引起细胞融合、出现新抗原包涵体形成：协助诊断细胞转化234杀细胞效应：多见于无包膜病毒1诱导机体发生体液免疫应答和细胞免疫应答，可造成组织细胞损伤。三、病毒的实验室诊断三、病毒的实验室诊断病毒的鉴定病毒感染的快速诊断方法23病毒的分离1（一）病毒的分离培养用于细胞培养的细胞瓶组织细胞培养：将离体的活组织块或分散的活细胞培养，在病毒学检测中用于病毒的培养鉴定、病毒学实验研究及病毒疫苗的生产。1.组织细胞培养：最广泛、最常用。（一）病毒的分离培养2.动物接种：最原始，对实验动物要求严格。常用实验动物：小白鼠、豚鼠及家兔等。（一）病毒的分离培养3.鸡胚培养：安全，可用于疫苗制备，用于分离流感病毒、腮腺炎病毒、疱疹病毒等。特点：来源容易、便宜、操作简便、易于消毒、组织分化程度低、病毒较易增殖。选用9-12天鸡胚，接种尿囊腔、羊膜腔。（二）病毒的鉴定正常细胞(梭形)→CPE(变圆/坏死/溶解/脱落)细胞形态的改变：细胞病变效应（CPE）、多核巨细胞、包涵体1.病毒在培养细胞中增殖的鉴定指标（二）病毒的鉴定2.红细胞吸附试验：某些病毒感染细胞后在细胞表面表达血凝素，能吸附某些脊椎动物的红细胞，称为红细胞吸附（血凝试验）。血凝试验（HA）标本（病毒）＋RBC（鸡、人等）→血凝现象。血凝抑制试验(HI)标本（病毒）＋血凝素抗体＋RBC→血凝消失。血凝反应强度示意图（二）病毒的鉴定3.病毒感染性及病毒数量测定空斑LD50、TCID50中和试验LD50、TCID50空斑形成单位（PFU）测定234血凝试验1感染复数5（三）病毒感染的快速诊断方法1.形态学检查法电镜和免疫电镜检查流感病毒狂犬病毒直接观察病毒的大小、形态（三）病毒感染的快速诊断方法狂犬病毒包涵体直接观察较大的病毒体。观察包涵体——某些病毒感染宿主细胞后在细胞质或细胞核内出现包涵体，包涵体对病毒感染诊断有一定价值。普通光学显微镜检查（三）病毒感染的快速诊断方法2.血清学诊断法免疫印迹法（WB）酶联免疫吸附试验（ELASA）免疫层析技术原理：抗原抗体特异性结合。用于培养困难或培养时间较长的病毒检测。早期诊断：血清中的IgM