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中国兽医协会发布I请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。1鸽痘病毒荧光PCR检测方法属于痘病毒科(Poxviridae)禽痘病毒属(Fowlpoxvirus)成员,为双链DNA病毒,主要感染鸽科属于痘病毒科(Poxviridae)禽痘病毒属(Fowlpoxvirus)成员,为双链DNA病毒,主要感染鸡、鸽、火鸡等禽类,可通过蚊、蜱等节肢动物媒介或直接接触传播,引4缩略语FPV:禽痘病毒(FowlpoxvirPGPV:鸽痘病毒(Pigeonpoxvirus)5.1组织样品2免坏死或继发感染区域)和口腔及呼吸道黏膜处白喉样假膜病变组织,不少于1g组织,将样品放入病毒保存液中,低温保存(4℃保存1个月以内,-805.2拭子样品毒保存液中,剪去露出部分,盖紧离心管盖,低温保存(4℃保6.2高速冷冻离心机:离心力12000PGPV4b基因(P4b)重组质粒且浓度>1×103copies/μL,基因片段序列见附3样品制备和核酸提取参照GB19489规定,在相应等级的生物安全柜中进行操作。操作人员应佩戴9检测步骤9.1核酸提取按照商品化病毒DNA提取试剂盒说明书进行操作,提取病毒DNA,并保存于-4PGPV荧光PCR引物和探针序列见表A.1。P4bROX-CCCGTGCGTCTTCGTAGTAGTAAACCAAA.2鸽痘P4b基因片段参考序列(GenBankAccessionNo.ON375849.1)GTCATGAGTTGATGTAATTTCATCTATATTGATAATTGTATTTTTTTGTTAAACTCCTTTACATATATCGGGTTTTGGTTTACTACTACGAAGACGCACGGGCCGTTGTTGTTTG5体积(μL)2×荧光PCR预混反
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