DB53T 1127-2022 姜荷花组培苗生产技术规程

ICS65.020.20CCSB61532022-08-12发布云南省市场监督管理局发布DB53/T1127—2022I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由玉溪市农业科学院提出。本文件由云南省花卉标准化技术委员会（YNTC08）归口。本文件起草单位：玉溪市农业科学院。本文件主要起草人：李晓亮、张钟、张军云、段永华、杨进成、郭春平、刘泽胤、王刚、张玉荣、邓成忠、蔡述江、李军萍、姚万福、桂宝菊、左丽娟。DB53/T1127—20221姜荷花组培苗生产技术规程本文件规定了姜荷花（Curcumaalismatifolia）组培苗生产的外植体的采集和处理、初代培养、成苗培养、炼苗和移栽、栽后管理、出苗、包装、标识与运输。本文件适用于品种权明晰、获得品种权人繁育许可的姜荷花组培苗生产。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T1276农药安全使用规范总则NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1姜荷花Curcuma姜科姜黄属的多年生草本植物，是原产于泰国清迈一带的一种热带宿根花卉。4缩略语下列缩略语适用于本文件。MS：是培养基发明人Murashige和Skoog名字的缩写，是植物组织培养中常用的基本培养基。6-BA：6-苄氨基腺嘌呤，6-Benzylaminopurine。NAA：萘乙酸，Naphthylaceticacid。5外植体的采集和处理5.1选择选择生长健壮、无病虫害的姜荷花球茎或球茎上新生长约1.5cm～5.0cm的小芽。5.2采集晴天中午，于球茎刚刚开始萌芽或刚萌发出新生小芽时进行外植体采集。采集前2周停止浇水、施药、施肥。DB53/T1127—202225.3预处理5.3.1清除球茎或球茎上新生小芽附着的基质或土壤，并洗净。5.3.2从小芽与球茎粘连处切断分离出小芽，切除小芽上离球茎顶部1.0cm以上的部分，剥离1层小芽球茎顶部的外苞叶，并洗净。5.3.3切除球茎的根系及离球茎顶部1.0cm以上的部分，削去球茎上约0.5cm的外周层，剥离球茎顶部的外苞叶2层～3层，并洗净。5.4灭菌5.4.1将球茎或小芽放入0.2%的高锰酸钾（KMnO4）溶液浸泡3min～6min。5.4.2切除球茎或小芽上的褐色表层，清水冲洗1次～2次。5.4.3在超净工作台上，先用75%酒精浸泡消毒球茎30s～60s，再用2.0%～3.0%升汞（HgCl2）溶液浸泡灭菌20min～30min，用无菌水清洗2次～3次，最后用无菌滤纸吸干球茎的表面水分。5.4.4在超净工作台上，先用75%酒精浸泡消毒小芽30s～60s，再用0.1%～0.2%升汞（HgCl2）溶液浸泡灭菌8min～15min，用无菌水清洗2次～3次，最后用无菌滤纸吸干小芽的表面水分。6初代培养6.1培养基6.1.1初代培养的培养基MS+6-BA（1.0～2.0）mg/L+NAA（0.2～0.5）mg/L+白砂糖（25～30）g/L+琼脂粉（强度1200g/cm2）（5.5～5.8）g/L，pH值5.8～6.0。6.1.2MS基本培养基MS基本培养基的组分及含量参见附录A。6.1.3MS、6-BA和NAA母液MS、6-BA和NAA的母液配制参照NY/T2306执行。6.2培养室条件温度25℃±2℃,相对湿度30%～45%，光照强度2000Lx～3000Lx，光照时间12h/d。6.3培养将灭菌好的球茎或小芽接种入6.1.1的初代培养基中培养35d～50d1.5cm～5.0cm时，初代培养完成。7成苗培养7.1培养基7.1.1成苗培养的培养基DB53/T1127—20223MS+6-BA（0.4～0.8）mg/L+NAA0.01mg/L+白砂糖（25～30）g/L+琼脂粉（强度1200g/cm25.5~5.8）g/L，pH值5.8～6.0。7.1.2MS基本培养基MS基本培养基的组分及含量参见附录A。7.1.3MS、6-BA和NAA母液MS、6-BA和NAA的母液配制参照NY/T2306执行。7.2培养室条件见6.2。7.3操作要求7.3.1将初代培养获得的健壮、正常的芽（若芽长﹥2.0cm，则切除小芽上离球茎顶部1.0cm以上部分）接种入7.1.1的培养基中进行成苗培养30d～40d。7.3.2切除苗的根系及离球茎顶部1.0cm以上部分，并剥离球茎外苞叶1层～2层。7.3.3当球茎最大横径≤1.0cm时，将球茎从顶部中间纵切成两个半球茎，当球茎最大横径﹥1.0cm时，从球茎顶部中间纵切成四个半球茎。7.3.4将半球茎接种入7.1.1的培养基中进行成苗培养30d～40d。7.3.5如需增殖，可在不同继代周期重复7.3.2至7.3.4的操作，继代周期为30d～40d，继代的代数控制在30代以内，增殖系数达4.27～9.70。7.3.6如需成苗，通过7.3.4的培养后，每个半球茎可分化形成1株～5株的完整种苗。8炼苗和移栽8.1炼苗选择生长健壮、根系发育良好、苗高2.5cm～4.0cm、根系长0.5cm～1.0cm的瓶苗，连瓶子一起置瓶苗于温室或大棚内的环境中炼苗15d～20d，移栽前1d打开瓶苗的瓶盖。8.2移栽8.2.1基质8.2.2方法8.2.2.1从瓶内取出种苗，不损伤根系，于清水中洗去培养基。8.2.2.2洗净后按植株的株高、叶片数、生根量的整齐度分类。8.2.2.3将同一类别的种苗放入杀菌剂液浸泡30s后，按1株/孔移栽入穴盘基质中，再将穴盘置于温室或大棚内的苗床上。8.2.2.4用塑料薄膜覆盖穴盘。9栽后管理DB53/T1127—202249.1温度适宜温度为20℃~30℃。9.2湿度控制基质含水量为60%左右。温室或大棚内的空气相对湿度白天控制在45%～75%，夜间控制在40%~78%。9.3光照移栽后，用遮阴网遮光，使遮光率达70%～80%，7d后逐步增加光照，15d～20d后为全光照。9.4施肥揭膜后即可开始施肥，宜每次以复合肥（氮磷钾的含量为17:17:17）配成浓度为0.1%～0.2%的水溶液进行浇施。9.5病虫害防治参照附录B进行姜荷花组培苗的主要病虫害防治，农药使用应符合NY/T1276的规定。10.1瓶苗植株生长健壮，株高达2.5cm～4.0cm，叶片数达3片～6片，生根量达3条～5条时出苗。10.2穴盘苗根系发育良好，植株生长健壮，无病虫害，无明显药害和机械损伤，高度达8cm～10cm，叶片数达4片～6片时出苗。11包装、标识与运输11.1包装11.1.1瓶苗包装将瓶苗放入泡沫箱内，瓶子间相互贴紧，泡沫箱外再用适宜大小的纸箱包装。高温时期宜在泡沫箱内放置冰袋或采取控温装置。11.1.2穴盘苗包装将穴盘苗放入适宜大小的纸箱内包装，各层穴盘中间的四周设立适宜大小的隔层。高温时期可在纸箱内放置冰袋或采取控温装置。11.2标识应标识品名、类型、数量、生产者信息、出苗日期、发货时间、收货者信息、注意事项等。11.3运输DB53/T1127—20225勿倒置装车和搬运，运输途中要避免日晒、雨淋、激烈颠簸，运输车厢内保持温度为10℃~25℃,宜在3d～5d内抵达目的地。DB53/T1127—20226（资料性）MS基本培养基的组分及含量MS基本培养基的组分及含量见表A.1。表A.1MS基本培养基的组分及含量NHNOKNOMgSOOKHPOOOMnSOOHBONaMoOOOONaFeSOODB53/T1127—20227