解密TGR5：胃炎与胃癌进程中的分子密钥与治疗新靶标

解密TGR5：胃炎与胃癌进程中的分子密钥与治疗新靶标一、引言1.1研究背景胃炎作为一种常见的消化系统疾病，在全球范围内广泛影响着人们的健康。据统计，其发病率在各类疾病中名列前茅，且呈上升趋势，尤其在生活节奏加快、饮食不规律的现代社会，胃炎的患病人数日益增多。胃炎的类型多样，涵盖急性胃炎与慢性胃炎，前者常由应激因素、药物损伤等引发，若未及时处理，可能出现急性糜烂、出血甚至穿孔等严重并发症；后者多因幽门螺杆菌感染、生活不规律等导致，虽从萎缩性胃炎发展为胃癌的过程漫长且比例较低，但仍不容忽视，长期的炎症刺激不仅会导致患者出现上腹部疼痛或不适感、恶心、呕吐、食欲减退、消化不良等症状，严重影响生活质量，还会影响食物的消化和吸收，导致营养摄入不足，甚至引发贫血等问题。更关键的是，长期的胃炎可能诱发胃癌，使得胃炎的防治成为医学领域的重要课题。胃癌则是一种严重威胁人类生命健康的恶性肿瘤，其发病率和死亡率在全球范围内均处于较高水平。国际癌症研究机构的数据显示，2020年全世界胃癌新发病例约108.9万，居恶性肿瘤发病人数的第五位；同年，全世界胃癌死亡病例数约76.9万，居恶性肿瘤死亡人数的第四位，其中，43.9%的发病病例和48.6%的死亡病例发生在中国。在中国，2019年国家癌症中心的数据表明，胃癌的发病率和死亡率分别位于所有恶性肿瘤的第二位和第三位，是发病率第一的消化道恶性肿瘤，远高于世界平均水平。男性胃癌的发病率是女性的3倍，死亡率是女性的2.7倍，主要发生在60-69岁的男性，这可能与男性吸烟、喝酒比例高，社会压力大、饮食习惯较差等因素密切相关。胃癌早期症状隐匿，多数患者确诊时已处于中晚期，治疗效果不佳，5年生存率较低，给患者家庭和社会带来沉重负担。在胃炎向胃癌发展的过程中，炎症反应扮演着关键角色。持续的炎症刺激会引发一系列细胞和分子水平的变化，促进肿瘤的发生和发展。因此，深入研究胃炎和胃癌的发病机制，寻找有效的治疗靶点和干预措施迫在眉睫。TGR5（TakedaGprotein-coupledreceptor5），即胆汁酸G蛋白偶联受体1（Gprotein-coupledbileacidreceptor1），作为G蛋白偶联受体超家族中的重要成员，近年来在疾病研究领域备受关注。TGR5广泛表达于小肠、胃、肝、肺、棕色脂肪细胞、巨噬细胞、单核细胞、脾脏细胞、胆囊上皮细胞等多种组织和细胞中，具有多重生物学功能。它不仅是胆汁酸的受体，还能被多种选择性合成激动剂激活，通过调节核因子-κB（NF-κB）、蛋白激酶B（AKT）和细胞外信号调节激酶（ERK）等不同信号通路，参与能量稳态、胆汁酸平衡、葡萄糖代谢、炎症反应、肝脏再生等多种生理过程。在能量代谢方面，TGR5在棕色脂肪细胞中被激活后，可通过诱导2型碘甲状腺氨酸-脱碘酶的表达，将无活性的甲状腺素转化为3,5,3-三碘甲状腺氨酸，激活甲状腺激素受体，进而刺激能量消耗，增加产热和线粒体生物发生；在炎症反应中，TGR5在肠道巨噬细胞中被激活后，可影响肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和NF-κB通路，抑制促炎细胞因子的释放，发挥抗炎作用。越来越多的研究表明，TGR5与肿瘤的发生、发展密切相关。在肝癌、结直肠癌、乳腺癌等多种肿瘤中，TGR5的表达水平发生改变，并通过调节细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学行为，影响肿瘤的进程。在肝癌细胞中，TGR5的激活可抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，其机制可能与调节AKT和ERK信号通路有关；在结直肠癌细胞中，TGR5的高表达与肿瘤的侵袭和转移能力增强相关，可能通过激活NF-κB信号通路促进肿瘤细胞的迁移和侵袭。然而，TGR5在胃炎及胃癌中的具体作用机制尚未完全明确，这为相关研究提供了广阔的探索空间。鉴于胃炎和胃癌的严重危害以及TGR5在生理和病理过程中的潜在重要性，深入研究TGR5在胃炎及胃癌中的作用机理具有重要的理论意义和临床应用价值，有望为胃炎和胃癌的防治提供新的靶点和策略。1.2TGR5概述TGR5作为G蛋白偶联受体超家族的重要成员，具有独特的结构和广泛的分布，在维持机体正常生理功能方面发挥着不可或缺的作用。从结构上看，TGR5由330个氨基酸组成，具备典型的GPCR结构特征，最为显著的是其包含七个跨膜α螺旋结构域。这七个跨膜结构域以特定方式相互连接，形成紧密有序的空间结构，使TGR5能够横跨细胞膜，一端暴露于细胞外环境，另一端延伸至细胞内。在TGR5的结构中，N端位于细胞外，主要负责识别和结合配体，包括胆汁酸以及一些选择性合成激动剂；C端位于细胞内，与G蛋白相互作用，激活下游信号通路。这种结构特点使得TGR5能够高效地感知细胞外信号，并将其传递到细胞内，引发一系列生物学效应。在组织分布方面，TGR5呈现出广泛分布的特点。它在小肠、胃、肝、肺、棕色脂肪细胞、巨噬细胞、单核细胞、脾脏细胞、胆囊上皮细胞等多种组织和细胞中均有表达。在小肠中，TGR5的表达参与调节肠道内分泌细胞的功能，影响肠道激素的分泌，进而调节肠道的消化和吸收功能；在肝脏中，TGR5的表达与胆汁酸的合成、转运和代谢密切相关，对维持肝脏的正常功能起着重要作用；在棕色脂肪细胞中，TGR5的表达使其在能量代谢过程中发挥关键作用，通过激活相关信号通路，刺激能量消耗，增加产热和线粒体生物发生。TGR5的正常生理功能丰富多样，主要通过与胆汁酸及其他配体结合，激活下游不同的信号通路来实现。在能量稳态调节方面，TGR5在棕色脂肪细胞中扮演着重要角色。当棕色脂肪细胞中的TGR5被激活后，可诱导2型碘甲状腺氨酸-脱碘酶的表达，该酶能够将无活性的甲状腺素转化为3,5,3-三碘甲状腺氨酸，激活甲状腺激素受体，进而刺激能量消耗，增加产热和线粒体生物发生，对维持机体的能量平衡具有重要意义。在胆汁酸平衡调节中，TGR5在肝脏和肠道中发挥关键作用。在肝脏中，TGR5可以通过调节胆汁酸的合成、转运和排泄，维持胆汁酸的稳态；在肠道中，TGR5的激活可以促进胆汁酸的重吸收，减少胆汁酸的丢失，同时还能调节肠道菌群的组成和功能，进一步影响胆汁酸的代谢。在葡萄糖代谢调节方面，TGR5的激活可以通过多种途径改善葡萄糖代谢。一方面，TGR5可以促进胰岛素的分泌，提高胰岛素的敏感性，从而降低血糖水平；另一方面，TGR5还可以调节肝脏中糖异生和糖原合成的过程，维持血糖的稳定。在炎症反应调节中，TGR5在巨噬细胞等免疫细胞中发挥重要的抗炎作用。当肠道巨噬细胞中的TGR5被激活后，可影响肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和核因子-κB（NF-κB）通路，抑制促炎细胞因子的释放，减轻炎症反应，对维持机体的免疫平衡具有重要作用。在肝脏再生过程中，TGR5也参与其中，通过调节相关信号通路，促进肝细胞的增殖和修复，有助于肝脏组织的再生和恢复。1.3研究目的和意义本研究旨在深入探究TGR5在胃炎及胃癌发生、发展过程中的具体作用机理，为胃炎和胃癌的防治提供新的理论依据和潜在治疗靶点。通过一系列细胞实验、动物实验以及临床样本分析，系统地研究TGR5在胃炎及胃癌中的表达变化，以及其对相关细胞生物学行为和信号通路的影响。本研究具有重要的理论意义。目前，虽然对胃炎和胃癌的发病机制已有一定认识，但仍存在许多未知领域。TGR5作为一种在多种生理和病理过程中发挥重要作用的受体，其在胃炎及胃癌中的作用机制尚未完全明确。深入研究TGR5在胃炎及胃癌中的作用机理，有助于进一步揭示胃炎和胃癌的发病机制，丰富消化系统肿瘤生物学的理论知识。TGR5可能通过调节多个信号通路影响胃炎和胃癌的进程，研究其具体作用机制可以为这两种疾病的研究提供新的视角和思路，拓展我们对胃炎向胃癌转化过程中细胞和分子机制的认识。从临床应用价值来看，本研究具有潜在的转化意义。胃炎和胃癌严重威胁人类健康，目前的治疗方法存在一定的局限性。若能明确TGR5在胃炎及胃癌中的作用机制，就有可能将其开发为治疗胃炎和胃癌的新靶点。例如，基于TGR5的作用机制，设计和开发特异性的激动剂或拮抗剂，用于调节TGR5信号通路，从而达到抑制胃炎炎症反应、阻止胃炎向胃癌发展以及抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的目的，为胃炎和胃癌患者提供更有效的治疗方案。此外，TGR5的表达水平还可能作为胃炎和胃癌诊断和预后评估的生物标志物。通过检测TGR5在胃黏膜组织中的表达情况，有助于胃炎和胃癌的早期诊断和病情监测，为临床治疗决策提供重要依据，提高患者的生存率和生活质量。二、TGR5与胃炎的关联研究2.1胃炎的发病机制及相关信号通路胃炎作为一种常见的消化系统疾病，其发病机制复杂，涉及多种因素的相互作用，包括幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，Hp）感染、自身免疫、药物、理化因素等，这些因素导致胃黏膜受损，引发炎症反应。幽门螺杆菌感染是胃炎发病的主要原因之一。幽门螺杆菌是一种革兰阴性杆菌，可通过口-口或粪-口途径传播，定植于胃黏膜表面。它能够产生多种毒力因子，如尿素酶、细胞毒素相关基因A（CagA）、空泡毒素A（VacA）等，这些毒力因子可破坏胃黏膜的屏障功能，导致胃酸和胃蛋白酶对胃黏膜的侵蚀，引发炎症反应。尿素酶可分解尿素产生氨，中和胃酸，为幽门螺杆菌在酸性环境中生存创造条件，同时氨对胃黏膜也具有直接的损伤作用；CagA蛋白可通过Ⅳ型分泌系统注入胃上皮细胞，激活细胞内的信号通路，诱导炎症因子的释放，促进炎症反应；VacA则可导致胃上皮细胞空泡化，破坏细胞的正常结构和功能，进一步加重胃黏膜的损伤。自身免疫因素在某些类型的胃炎发病中也起着重要作用。自身免疫性胃炎是一种特殊类型的胃炎，主要由自身抗体攻击胃壁细胞或内因子引起。当机体的免疫系统出现异常时，会产生针对胃壁细胞的自身抗体，如抗壁细胞抗体（PCA）和抗内因子抗体（IFA）。PCA可与胃壁细胞表面的质子泵等抗原结合，激活补体系统，导致胃壁细胞损伤，胃酸分泌减少；IFA则可与内因子结合，阻碍维生素B12的吸收，引起巨幼细胞贫血。此外，自身免疫反应还可导致胃黏膜内淋巴细胞浸润，释放炎症因子，进一步损伤胃黏膜。药物因素也是胃炎发病的常见原因之一。某些药物如阿司匹林、吲哚美辛等非甾体类抗炎药（NSAIDs）、糖皮质激素类药物等长期服用容易造成胃黏膜的损伤，进而导致胃炎的发生。NSAIDs主要通过抑制环氧化酶（COX）的活性，减少前列腺素（PG）的合成，从而削弱胃黏膜的保护作用。PG具有促进胃黏膜血流、增加黏液和碳酸氢盐分泌、抑制胃酸分泌等作用，对维持胃黏膜的完整性和功能至关重要。当PG合成减少时，胃黏膜的防御能力下降，容易受到胃酸和胃蛋白酶的攻击，导致胃黏膜损伤和炎症反应。糖皮质激素类药物则可通过抑制免疫系统的功能，降低机体的抵抗力，使胃黏膜更容易受到病原体的感染和损伤，同时还可影响胃黏膜的修复和再生过程，加重胃黏膜的炎症。理化因素如不良的饮食、生活习惯也会诱导胃炎的发病。常见的如暴饮暴食、进食生冷、油腻、刺激性较强的食物、吸烟饮酒、熬夜等因素，均会损伤胃黏膜，诱发急性炎症的发生。暴饮暴食会导致胃内压力升高，破坏胃黏膜的屏障功能；生冷、油腻、刺激性食物可直接刺激胃黏膜，引起胃黏膜的充血、水肿和炎症反应；吸烟时，烟草中的尼古丁等有害物质可刺激胃黏膜，导致胃酸分泌增加，同时还可抑制胃黏膜的前列腺素合成，削弱胃黏膜的保护作用；饮酒会使胃黏膜血管扩张，通透性增加，导致胃黏膜出血、糜烂，长期大量饮酒还可直接损伤胃黏膜细胞，引发胃炎。在胃炎的发病过程中，涉及多条信号通路的激活和调控，其中NF-κB信号途径在胃炎的发生、发展中起着关键作用。NF-κB是一种重要的转录因子，通常以无活性的形式存在于细胞质中，与抑制蛋白IκB结合。当细胞受到炎症刺激时，如幽门螺杆菌感染、细胞因子刺激等，IκB激酶（IKK）被激活，使IκB磷酸化，随后被泛素化降解，释放出NF-κB。NF-κB进入细胞核后，与靶基因启动子区域的κB位点结合，激活一系列炎性基因的转录，如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）等，这些炎性细胞因子进一步放大炎症反应，导致胃黏膜的损伤和炎症的持续发展。在幽门螺杆菌感染引起的胃炎中，幽门螺杆菌的毒力因子CagA可激活NF-κB信号通路，促进炎性细胞因子的释放，导致胃黏膜的炎症和损伤；在自身免疫性胃炎中，自身抗体与胃壁细胞结合后，也可通过激活NF-κB信号通路，引发炎症反应，损伤胃黏膜。此外，NF-κB信号通路还可调节细胞的增殖、凋亡和免疫应答等过程，在胃炎的发病机制中具有多方面的影响。2.2TGR5抑制胃炎的实验证据2.2.1体内实验为了深入探究TGR5在胃炎发生发展过程中的作用，科研人员以小鼠为对象开展了一系列体内实验，其中TGR5基因敲除和激活实验为揭示其作用机制提供了关键线索。在TGR5基因敲除实验中，研究人员利用基因编辑技术构建了TGR5基因敲除小鼠模型。随后，通过给予这些小鼠幽门螺杆菌感染或使用化学物质如乙醇、阿司匹林等诱导胃炎，与正常野生型小鼠进行对比观察。结果显示，TGR5基因敲除小鼠在受到相同刺激后，胃炎的严重程度明显加剧。具体表现为胃黏膜损伤程度加重，出现更广泛的糜烂、出血和溃疡，炎症细胞浸润显著增多，炎症相关指标如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）等炎症因子的表达水平显著升高。这表明TGR5基因的缺失削弱了小鼠对胃炎的抵抗能力，使得炎症反应更为剧烈，从反面证实了TGR5在维持胃黏膜健康、抑制胃炎发生发展过程中的重要作用。在TGR5激活实验中，研究人员使用TGR5特异性激动剂如INT-777等来激活小鼠体内的TGR5信号通路。当给予小鼠幽门螺杆菌感染或化学物质诱导胃炎后，同时给予TGR5激动剂进行干预。实验结果表明，接受TGR5激动剂处理的小鼠胃炎症状得到明显改善。胃黏膜的损伤程度减轻，糜烂、出血和溃疡的面积明显减小，炎症细胞浸润减少，TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因子的表达水平显著降低。进一步的研究发现，TGR5激活后，小鼠胃黏膜组织中NF-κB信号通路的关键蛋白磷酸化水平降低，NF-κB的核转位受到抑制，从而减少了炎性基因的转录和表达，有效抑制了炎症反应。这些结果充分说明，激活TGR5可以通过调节NF-κB信号通路，抑制炎症因子的释放，减轻胃黏膜的炎症损伤，对胃炎起到明显的抑制作用。另有研究表明，胆汁酸作为TGR5的内源性配体，也能通过激活TGR5发挥抑制胃炎的作用。给小鼠喂食富含胆汁酸的食物后，小鼠胃黏膜中TGR5的表达上调，胃炎症状得到缓解，炎症因子表达降低，NF-κB信号通路受到抑制。这进一步证实了TGR5在体内抑制胃炎的重要作用，以及胆汁酸-TGR5信号轴在胃炎防治中的潜在应用价值。2.2.2体外实验为了进一步探究TGR5抑制胃炎的具体分子机制，科研人员开展了一系列体外细胞实验，主要聚焦于TGR5对炎症因子表达和NF-κB信号途径关键蛋白的作用。实验选用了人胃上皮细胞系（如GES-1细胞）和小鼠巨噬细胞系（如RAW264.7细胞）作为研究对象。在人胃上皮细胞系实验中，首先通过转染技术将TGR5过表达质粒导入GES-1细胞，使其高表达TGR5；同时设置对照组，转染空质粒。然后，用脂多糖（LPS）刺激细胞以模拟炎症环境。通过实时定量PCR和酶联免疫吸附测定（ELISA）技术检测炎症因子的表达水平，结果发现，过表达TGR5的GES-1细胞在LPS刺激后，IP-10、IL-6、IL-1β和MCP-1等炎症因子的mRNA和蛋白表达水平显著低于对照组细胞。这表明TGR5过表达能够抑制炎症因子的产生，减轻炎症反应。在小鼠巨噬细胞系实验中，同样对RAW264.7细胞进行TGR5过表达处理，并使用LPS和TNF-α刺激细胞。实验结果显示，过表达TGR5的RAW264.7细胞中，MCP-1基因mRNA的表达量明显低于对照组，进一步证实了TGR5对炎症因子表达的抑制作用。此外，通过荧光素酶报告基因检测实验，发现TGR5激活后可以抑制NF-κB的转录活性，表明TGR5可能通过抑制NF-κB信号通路来发挥抗炎作用。为了深入探究TGR5对NF-κB信号途径关键蛋白的影响，进行了蛋白免疫印迹实验。结果显示，TGR5激活后，IκBα蛋白的磷酸化水平降低，p65的核迁移受到抑制。在正常情况下，当细胞受到炎症刺激时，IκBα会被磷酸化，进而被降解，释放出p65，p65进入细胞核与靶基因结合，启动炎性基因的转录。而TGR5激活后，抑制了IκBα的磷酸化，使得p65无法进入细胞核，从而阻断了NF-κB信号通路的激活，减少了炎性基因的表达，最终达到抑制胃炎炎症反应的目的。这些体外实验结果从细胞和分子层面揭示了TGR5抑制胃炎的作用机制，为进一步理解胃炎的发病机制和寻找新的治疗靶点提供了重要依据。2.3TGR5抑制胃炎的作用机制TGR5抑制胃炎的关键机制在于其对NF-κB信号途径的有效抑制。在正常生理状态下，NF-κB以无活性的形式存在于细胞质中，与抑制蛋白IκB紧密结合。当细胞遭受炎症刺激，如幽门螺杆菌感染、脂多糖（LPS）刺激或细胞因子作用时，IκB激酶（IKK）被激活，促使IκB磷酸化，随后被泛素化降解，释放出NF-κB。NF-κB进入细胞核，与靶基因启动子区域的κB位点结合，激活一系列炎性基因的转录，如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）等，引发并放大炎症反应。TGR5的激活能够显著干扰这一信号传导过程。研究表明，TGR5激活后，可通过多条途径抑制NF-κB信号通路。TGR5与配体结合后，激活下游的G蛋白，进而影响细胞内的第二信使系统，如环磷酸腺苷（cAMP）等。cAMP水平的改变可激活蛋白激酶A（PKA），PKA能够磷酸化IKK的调节亚基，使其活性受到抑制，从而减少IκB的磷酸化和降解，使NF-κB无法释放进入细胞核，阻断了炎性基因的转录激活。在幽门螺杆菌感染诱导的胃炎细胞模型中，加入TGR5激动剂后，检测到细胞内cAMP水平升高，PKA活性增强，IKK的磷酸化水平降低，IκB的降解减少，NF-κB的核转位受到明显抑制，同时TNF-α、IL-1β等炎症因子的表达显著下降，炎症反应得到有效缓解。TGR5激活后，还能直接与IKK复合物相互作用，抑制其激酶活性，阻止IκB的磷酸化，进而抑制NF-κB的激活。通过免疫共沉淀实验发现，在TGR5激活的细胞中，TGR5与IKK复合物中的关键亚基存在明显的相互作用，且这种相互作用的强度与NF-κB的激活程度呈负相关。当TGR5过表达时，IKK的活性受到明显抑制，IκB的磷酸化水平显著降低，NF-κB无法进入细胞核，炎症因子的表达也随之减少。此外，TGR5激活后还可以调节细胞内的其他信号通路，间接影响NF-κB信号途径。TGR5激活可上调过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）的表达，PPARγ是一种核受体，具有抗炎作用。PPARγ可以与NF-κB相互作用，抑制其转录活性，从而减少炎性基因的表达。研究发现，在TGR5激活的巨噬细胞中，PPARγ的表达水平显著升高，与NF-κB结合形成复合物，抑制了NF-κB与靶基因启动子区域的结合，降低了TNF-α、IL-6等炎症因子的表达。鉴于TGR5对胃炎炎症反应的显著抑制作用及其独特的作用机制，TGR5具有成为胃炎治疗新靶点的巨大潜力。通过开发和应用TGR5特异性激动剂，可以有效激活TGR5信号通路，抑制NF-κB信号途径，减少炎症因子的释放，减轻胃黏膜的炎症损伤，为胃炎的治疗提供新的策略和方法。TGR5激动剂还具有针对性强、副作用小的优势，有望克服传统胃炎治疗药物的局限性，提高胃炎的治疗效果和患者的生活质量。三、TGR5与胃癌的关联研究3.1胃癌的发病机制及相关信号通路胃癌的发病机制极为复杂，是多种因素长期共同作用的结果，涉及环境、饮食、感染、遗传及癌前状态等多个方面。环境和饮食因素在胃癌的发生发展中起着重要作用。流行病学研究表明，地域间胃癌发病率的显著差异与环境因素密切相关。长期食用霉变食物、咸菜、腌制烟熏食品以及过量摄入食盐，会增加胃癌的发病风险。这些食物中通常含有大量的亚硝酸盐、多环芳烃等致癌物质，亚硝酸盐在胃内可转化为亚硝胺，这是一种强致癌物质，能够损伤胃黏膜细胞的DNA，引发基因突变，从而促进胃癌的发生；多环芳烃则可通过诱导细胞氧化应激反应，导致细胞损伤和凋亡异常，进而增加胃癌的发病几率。相反，新鲜水果和蔬菜富含维生素C、维生素E、β-胡萝卜素等抗氧化物质，这些物质能够清除体内的自由基，减少DNA损伤，降低胃癌的发病风险。感染因素也是胃癌发病的重要原因之一，其中幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，Hp）感染与胃癌的关系最为密切。幽门螺杆菌是一种革兰阴性菌，能够在胃内酸性环境中生存。它通过产生尿素酶、细胞毒素相关基因A（CagA）、空泡毒素A（VacA）等毒力因子，破坏胃黏膜的屏障功能，引发炎症反应。尿素酶分解尿素产生氨，中和胃酸，为幽门螺杆菌的生存创造条件，同时氨对胃黏膜具有直接的损伤作用；CagA蛋白可注入胃上皮细胞，激活细胞内的信号通路，诱导炎症因子的释放，促进炎症反应，长期的炎症刺激会导致胃黏膜细胞的增殖和凋亡失衡，增加胃癌的发病风险；VacA则可导致胃上皮细胞空泡化，破坏细胞的正常结构和功能，进一步加重胃黏膜的损伤。研究表明，幽门螺杆菌感染阳性者患胃癌的风险是阴性者的数倍。遗传因素在胃癌的发病中也占有一定比例。约10%的胃癌患者具有家族遗传倾向，家族性腺瘤性息肉病、遗传性非息肉病性结直肠癌等遗传性疾病患者，患胃癌的风险明显增加。这些遗传性疾病通常存在特定的基因突变，如APC、MLH1、MSH2等基因的突变，这些基因突变会导致细胞的增殖、凋亡和DNA修复等过程异常，从而增加胃癌的发病风险。此外，一些遗传多态性也与胃癌的易感性相关，如细胞色素P450酶系、亚甲基四氢叶酸还原酶等基因的多态性，会影响个体对致癌物质的代谢能力，进而影响胃癌的发病风险。癌前状态包括癌前疾病和癌前病变，是胃癌发生的重要危险因素。癌前疾病如慢性萎缩性胃炎、胃息肉、胃溃疡、残胃炎等，这些疾病会导致胃黏膜的结构和功能受损，长期的炎症刺激会使胃黏膜上皮细胞发生异型增生，逐渐发展为癌前病变。癌前病变主要指胃黏膜上皮内瘤变，根据异型增生的程度可分为低级别上皮内瘤变和高级别上皮内瘤变，高级别上皮内瘤变与胃癌的关系更为密切，其癌变的风险较高。在胃癌的发生发展过程中，多条信号通路发生异常激活或抑制，其中STAT3信号途径在胃癌的发生发展中发挥着关键作用。信号转导和转录激活因子3（Signaltransducerandactivatoroftranscription3，STAT3）是STAT蛋白家族的重要成员，在正常生理状态下，STAT3处于非激活状态，当细胞受到细胞因子（如白细胞介素-6，IL-6）、生长因子（如表皮生长因子，EGF）等刺激时，细胞膜上的受体与之结合，激活受体相关的酪氨酸激酶（如JAK激酶），使STAT3的酪氨酸残基磷酸化，磷酸化的STAT3形成二聚体，转入细胞核内，与靶基因启动子区域的特定序列结合，调控基因的转录，促进细胞的增殖、存活、迁移和侵袭等过程。在胃癌中，IL-6/STAT3信号通路常常异常激活。肿瘤细胞自身或肿瘤微环境中的免疫细胞等可分泌大量的IL-6，IL-6与胃癌细胞表面的IL-6受体结合，激活JAK激酶，进而使STAT3磷酸化激活。激活的STAT3可上调一系列与胃癌发生发展相关的基因表达，如细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、基质金属蛋白酶2（MMP2）、基质金属蛋白酶9（MMP9）等。CyclinD1的上调可促进细胞周期的进展，加速胃癌细胞的增殖；Bcl-2的上调可抑制胃癌细胞的凋亡，使肿瘤细胞得以持续存活；MMP2和MMP9等基质金属蛋白酶的上调可降解细胞外基质，促进胃癌细胞的迁移和侵袭，从而促进胃癌的发展和转移。3.2TGR5抑制胃癌的实验证据3.2.1细胞增殖和迁移实验为了探究TGR5对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响，研究人员开展了一系列细胞实验，其中MTS实验和Transwell实验发挥了关键作用。MTS实验是一种常用的检测细胞增殖能力的方法，其原理是利用细胞内的线粒体脱氢酶将MTS试剂（3-(4,5-二***噻唑-2-基)-5-(3-羧甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑）还原为水溶性的甲臜产物，该产物的生成量与活细胞数量成正比，通过检测490nm波长处的吸光度值，即可反映细胞的增殖情况。在本次实验中，研究人员选用了人胃癌细胞系SGC7901和BGC823作为研究对象，首先将细胞分别接种于96孔板中，待细胞贴壁后，将细胞分为对照组、TGR5过表达组和TGR5激动剂处理组。TGR5过表达组通过转染TGR5过表达质粒使细胞高表达TGR5；TGR5激动剂处理组则加入TGR5特异性激动剂INT-777进行处理；对照组不做特殊处理。然后在不同时间点（0h、24h、48h、72h）向每孔加入20μLMTS溶液，继续孵育2-4小时，使用酶标仪测定各孔在490nm处的吸光度值。实验结果显示，与对照组相比，TGR5过表达组和TGR5激动剂处理组的胃癌细胞在24h、48h、72h的吸光度值均显著降低，表明TGR5过表达或激活后，胃癌细胞的增殖能力受到明显抑制，且抑制作用随着时间的延长而增强。Transwell实验则常用于检测细胞的迁移和侵袭能力。对于迁移实验，Transwell小室的上室接种细胞，下室加入含有趋化因子的培养基，细胞会受到趋化因子的吸引，穿过小室的微孔膜向低浓度的下室迁移。在本次实验中，研究人员将SGC7901和BGC823细胞分别消化制成单细胞悬液，调整细胞密度为1×10^5个/mL。取200μL细胞悬液加入Transwell小室的上室，下室加入600μL含有10%胎牛血清的培养基作为趋化因子。对照组加入正常细胞悬液，TGR5过表达组加入转染了TGR5过表达质粒的细胞悬液，TGR5激动剂处理组加入经TGR5激动剂INT-777预处理的细胞悬液。将小室置于培养箱中孵育24小时后，取出小室，用棉签轻轻擦去上室未迁移的细胞，然后将小室中的细胞固定、染色，在显微镜下随机选取5个视野，计数迁移到下室的细胞数量。实验结果表明，TGR5过表达组和TGR5激动剂处理组迁移到下室的细胞数量明显少于对照组，说明TGR5过表达或激活后，胃癌细胞的迁移能力显著下降。对于侵袭实验，与迁移实验类似，但需要在Transwell小室的上室预先铺一层Matrigel基质胶，模拟细胞外基质，只有具有侵袭能力的细胞才能降解基质胶并穿过微孔膜。实验步骤与迁移实验基本相同，只是在铺好Matrigel基质胶后，需要将小室在37℃孵箱中放置1-2小时，使基质胶凝固。实验结果同样显示，TGR5过表达组和TGR5激动剂处理组穿过基质胶迁移到下室的细胞数量明显少于对照组，进一步证明了TGR5过表达或激活能够抑制胃癌细胞的侵袭能力。3.2.2细胞凋亡实验细胞凋亡是细胞程序性死亡的一种方式，对于维持机体的正常生理功能和内环境稳定至关重要。在肿瘤的发生发展过程中，细胞凋亡的异常往往导致肿瘤细胞的增殖失控和存活能力增强。为了研究TGR5对胃癌细胞凋亡的影响，研究人员采用了AnnexinV-FITC/PI双染实验，结合流式细胞术进行检测。AnnexinV-FITC/PI双染实验的原理基于细胞凋亡过程中细胞膜磷脂酰丝氨酸（PS）的外翻和细胞膜通透性的改变。在正常细胞中，PS位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡早期，PS会外翻到细胞膜的外侧，AnnexinV是一种对PS具有高度亲和力的蛋白质，能够与外翻的PS特异性结合，并且AnnexinV标记了绿色荧光染料FITC，因此凋亡早期的细胞会被AnnexinV-FITC染成绿色；碘化丙啶（PI）是一种核酸染料，它不能透过正常细胞和早期凋亡细胞的完整细胞膜，但在细胞凋亡晚期或坏死细胞中，细胞膜通透性增加，PI可以进入细胞内，与细胞核中的DNA结合，使细胞染成红色。通过流式细胞术对AnnexinV-FITC和PI双染的细胞进行检测，可以将细胞分为四个象限：右下象限代表早期凋亡细胞（AnnexinV-FITC阳性/PI阴性），右上象限代表晚期凋亡细胞和坏死细胞（AnnexinV-FITC阳性/PI阳性），左上象限代表坏死细胞（AnnexinV-FITC阴性/PI阳性），左下象限代表正常活细胞（AnnexinV-FITC阴性/PI阴性），从而准确地分析细胞凋亡的情况。在本次实验中，研究人员将人胃癌细胞系SGC7901和BGC823分别接种于6孔板中，待细胞贴壁后，分为对照组、TGR5过表达组和TGR5激动剂处理组。TGR5过表达组通过转染TGR5过表达质粒使细胞高表达TGR5；TGR5激动剂处理组则加入TGR5特异性激动剂INT-777进行处理；对照组不做特殊处理。培养48小时后，收集各组细胞，用预冷的PBS洗涤两次，然后按照AnnexinV-FITC/PI双染试剂盒的说明书进行操作，将细胞重悬于BindingBuffer中，加入AnnexinV-FITC和PI染色液，轻轻混匀，避光孵育15分钟，最后加入适量的BindingBuffer，在1小时内使用流式细胞仪进行检测。实验结果显示，与对照组相比，TGR5过表达组和TGR5激动剂处理组中早期凋亡细胞和晚期凋亡细胞的比例显著增加。在SGC7901细胞中，对照组的凋亡细胞比例为（5.23±0.85）%，TGR5过表达组的凋亡细胞比例升高至（18.56±1.54）%，TGR5激动剂处理组的凋亡细胞比例达到（20.12±1.87）%；在BGC823细胞中，对照组的凋亡细胞比例为（4.89±0.78）%，TGR5过表达组的凋亡细胞比例为（17.25±1.42）%，TGR5激动剂处理组的凋亡细胞比例为（19.36±1.65）%。这些结果表明，TGR5过表达或激活后，能够显著促进胃癌细胞的凋亡，从而抑制胃癌细胞的生长和存活。3.2.3分子水平实验为了深入探究TGR5抑制胃癌的分子机制，研究人员从基因和蛋白水平开展了一系列实验，其中蛋白免疫印迹实验和实时定量PCR实验为揭示其作用机制提供了关键信息。蛋白免疫印迹实验（Westernblot）是一种常用的检测蛋白质表达水平的技术，其原理是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）将蛋白质样品按照分子量大小分离，然后将分离后的蛋白质转移到固相膜（如硝酸纤维素膜或聚偏二氟乙烯膜）上，再用特异性抗体与目标蛋白质结合，通过检测抗体的信号来确定目标蛋白质的表达量。在本次实验中，研究人员将人胃癌细胞系SGC7901和BGC823分为对照组、TGR5过表达组和TGR5激动剂处理组。TGR5过表达组通过转染TGR5过表达质粒使细胞高表达TGR5；TGR5激动剂处理组则加入TGR5特异性激动剂INT-777进行处理；对照组不做特殊处理。培养48小时后，收集各组细胞，使用含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的细胞裂解液裂解细胞，提取总蛋白，采用BCA法测定蛋白浓度。将蛋白样品与上样缓冲液混合，进行SDS-PAGE电泳，电泳结束后将蛋白转移至硝酸纤维素膜上。用5%脱脂牛奶封闭膜1-2小时，以封闭非特异性结合位点。然后加入特异性一抗，如抗p-STAT3抗体、抗STAT3抗体、抗CyclinD1抗体、抗Bcl-2抗体等，4℃孵育过夜。次日，用TBST缓冲液洗涤膜3次，每次10分钟，去除未结合的一抗。接着加入相应的辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗，室温孵育1-2小时。再次用TBST缓冲液洗涤膜3次，每次10分钟，然后加入化学发光底物，利用凝胶成像系统检测蛋白条带的信号强度，并通过ImageJ软件分析条带的灰度值，以β-actin作为内参，计算目标蛋白的相对表达量。实验结果显示，与对照组相比，TGR5过表达组和TGR5激动剂处理组中p-STAT3、CyclinD1、Bcl-2等蛋白的表达水平显著降低，而STAT3蛋白的总表达量无明显变化。这表明TGR5激活后，可能通过抑制STAT3的磷酸化，进而下调CyclinD1、Bcl-2等与细胞增殖和存活相关蛋白的表达，从而抑制胃癌细胞的增殖和存活。实时定量PCR实验（qPCR）则是一种用于定量检测基因表达水平的技术，其原理是在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的变化实时监测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过与内参基因的比较，计算出目标基因的相对表达量。在本次实验中，研究人员同样将人胃癌细胞系SGC7901和BGC823分为对照组、TGR5过表达组和TGR5激动剂处理组。培养48小时后，使用TRIzol试剂提取各组细胞的总RNA，然后通过逆转录试剂盒将RNA逆转录为cDNA。以cDNA为模板，使用特异性引物进行qPCR扩增，引物序列根据目标基因设计，如MMP2、C3、c-Myc、IL-6R、EGFR、SOCS3、MMP7和MMP14等基因。反应体系中加入SYBRGreen荧光染料，在荧光定量PCR仪上进行扩增反应，反应条件为：95℃预变性30秒，然后进行40个循环，每个循环包括95℃变性5秒，60℃退火30秒。扩增结束后，通过仪器自带的软件分析Ct值（Cyclethreshold，即每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数），以GAPDH作为内参基因，采用2^(-ΔΔCt)法计算目标基因的相对表达量。实验结果表明，TGR5过表达组和TGR5激动剂处理组中MMP2、C3、c-Myc、IL-6R、EGFR、SOCS3、MMP7和MMP14等基因的mRNA表达水平显著低于对照组。这些基因与胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭密切相关，TGR5激活后抑制这些基因的表达，进一步证实了TGR5能够通过调控相关基因的表达，抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。3.3TGR5抑制胃癌的作用机制TGR5对胃癌细胞的抑制作用主要通过抑制STAT3信号途径来实现。在正常生理状态下，STAT3处于非激活状态，当细胞受到细胞因子（如白细胞介素-6，IL-6）、生长因子（如表皮生长因子，EGF）等刺激时，细胞膜上的受体与之结合，激活受体相关的酪氨酸激酶（如JAK激酶），使STAT3的酪氨酸残基磷酸化，磷酸化的STAT3形成二聚体，转入细胞核内，与靶基因启动子区域的特定序列结合，调控基因的转录，促进细胞的增殖、存活、迁移和侵袭等过程。研究表明，TGR5激活后可以抑制STAT3的磷酸化和转录活性，从而抑制STAT3信号途径。在蛋白免疫印迹实验中，当用TGR5激动剂处理胃癌细胞系SGC7901和BGC823后，检测发现由LPS和IL-6诱导的STAT3磷酸化水平显著降低。这表明TGR5的激活能够抑制JAK激酶的活性，阻断STAT3的磷酸化过程，使其无法形成二聚体进入细胞核，进而抑制了下游相关基因的转录。在荧光素酶报告基因检测实验中，将含有STAT3结合位点的荧光素酶报告基因质粒转染到胃癌细胞中，然后用TGR5激动剂处理细胞。结果显示，TGR5激活后，荧光素酶的活性显著降低，表明STAT3的转录活性受到抑制，即TGR5可以抑制STAT3与靶基因启动子区域的结合，减少相关基因的转录。通过对STAT3下游相关基因的研究发现，TGR5激活后，与胃癌细胞增殖、存活、迁移和侵袭密切相关的基因表达受到抑制。实时定量PCR实验结果表明，TGR5过表达组和TGR5激动剂处理组中MMP2、C3、c-Myc、IL-6R、EGFR、SOCS3、MMP7和MMP14等基因的mRNA表达水平显著低于对照组。这些基因在胃癌的发生发展过程中发挥着重要作用，MMP2和MMP9等基质金属蛋白酶能够降解细胞外基质，促进胃癌细胞的迁移和侵袭；c-Myc是一种原癌基因，参与细胞的增殖、分化和凋亡等过程，其异常表达与胃癌的发生发展密切相关；IL-6R和EGFR分别是白细胞介素-6和表皮生长因子的受体，它们的激活可通过JAK/STAT3等信号通路促进胃癌细胞的增殖和存活；SOCS3是一种细胞因子信号抑制因子，虽然它在一定程度上可以负反馈调节STAT3信号通路，但在胃癌中，其表达常常受到抑制，TGR5激活后上调SOCS3的表达，有助于进一步抑制STAT3信号通路。鉴于TGR5对STAT3信号途径的显著抑制作用及其对胃癌细胞生物学行为的影响，TGR5具有成为胃癌治疗新靶标的巨大潜力。通过开发和应用TGR5特异性激动剂，可以有效激活TGR5信号通路，抑制STAT3信号途径，减少胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭，促进其凋亡，为胃癌的治疗提供新的策略和方法。与传统的胃癌治疗方法相比，TGR5激动剂具有靶向性强、副作用小等优势，有望克服现有治疗手段的局限性，提高胃癌患者的生存率和生活质量。四、TGR5在胃炎与胃癌发展进程中的潜在联系4.1胃炎与胃癌的发展关系胃炎与胃癌之间存在着密切的关联，胃炎尤其是慢性胃炎，在胃癌的发生发展过程中扮演着重要的角色，被认为是胃癌发生的重要危险因素之一。从胃炎到胃癌的发展是一个渐进且复杂的过程，通常涉及多个阶段，伴随着胃黏膜组织的一系列病理变化以及相关细胞和分子机制的改变。在胃炎阶段，特别是慢性萎缩性胃炎，胃黏膜会出现固有腺体萎缩，这使得胃黏膜的正常结构和功能受到破坏，胃酸分泌减少，胃的消化和保护能力下降。胃黏膜的萎缩还会导致胃黏膜上皮细胞的再生和修复过程异常，增加了细胞发生基因突变的风险。长期的炎症刺激会使胃黏膜上皮细胞持续受到损伤，机体为了修复损伤，会促使细胞不断增殖，在这个过程中，细胞的增殖和凋亡平衡容易被打破。当细胞增殖过度且凋亡不足时，就可能导致细胞的异常增生，逐渐发展为肠上皮化生和异型增生。肠上皮化生是指胃黏膜上皮细胞被肠型上皮细胞所取代，这是胃黏膜对长期炎症刺激的一种适应性变化。在肠上皮化生过程中，胃黏膜上皮细胞逐渐失去原有的特征，表达一些肠上皮细胞特有的标志物，如碱性磷酸酶、蔗糖酶等。肠上皮化生可分为完全性肠化生和不完全性肠化生，不完全性肠化生又可进一步分为小肠型和大肠型。研究表明，大肠型不完全性肠化生与胃癌的关系更为密切，其发生癌变的风险相对较高。这是因为大肠型不完全性肠化生的上皮细胞在形态和功能上与大肠上皮细胞更为相似，具有更强的增殖能力和较低的分化程度，更容易受到致癌因素的影响而发生恶变。异型增生则是指胃黏膜上皮细胞出现形态和结构的异常，表现为细胞核增大、深染，核浆比例失调，细胞排列紊乱等。异型增生是胃癌前病变的重要阶段，根据异型增生的程度可分为低级别异型增生和高级别异型增生。低级别异型增生的细胞异型性相对较轻，病变局限于上皮层内；而高级别异型增生的细胞异型性更为明显，病变可累及上皮全层，且具有更高的癌变潜能。高级别异型增生被认为是一种原位癌，若不及时治疗，很容易发展为浸润性胃癌。慢性炎症在胃炎向胃癌发展的过程中起着至关重要的促进作用。炎症细胞如中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等在胃黏膜组织中浸润，它们会释放大量的炎性因子，如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）等。这些炎性因子可以通过多种途径促进肿瘤的发生发展。炎性因子可以诱导细胞增殖，促进胃黏膜上皮细胞的过度增殖，增加细胞发生基因突变的机会；炎性因子还可以抑制细胞凋亡，使受损的细胞不能及时被清除，从而导致细胞的异常积累；炎性因子还能促进血管生成，为肿瘤细胞的生长和转移提供充足的营养和氧气；炎性因子还可以调节免疫细胞的功能，抑制机体的免疫监视作用，使肿瘤细胞能够逃避机体的免疫攻击。幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，Hp）感染是导致胃炎和胃癌发生的重要因素之一，它与慢性炎症和胃癌的发生发展密切相关。幽门螺杆菌能够在胃内酸性环境中定植并生存，通过产生多种毒力因子，如尿素酶、细胞毒素相关基因A（CagA）、空泡毒素A（VacA）等，破坏胃黏膜的屏障功能，引发炎症反应。尿素酶分解尿素产生氨，中和胃酸，为幽门螺杆菌的生存创造条件，同时氨对胃黏膜具有直接的损伤作用；CagA蛋白可注入胃上皮细胞，激活细胞内的信号通路，诱导炎症因子的释放，促进炎症反应，长期的炎症刺激会导致胃黏膜细胞的增殖和凋亡失衡，增加胃癌的发病风险；VacA则可导致胃上皮细胞空泡化，破坏细胞的正常结构和功能，进一步加重胃黏膜的损伤。研究表明，幽门螺杆菌感染阳性者患胃癌的风险是阴性者的数倍，根除幽门螺杆菌可以显著降低胃癌的发生风险。4.2TGR5在胃炎向胃癌转变中的作用推测结合前文对TGR5在胃炎和胃癌中作用机制的研究，我们可以合理推测TGR5在胃炎向胃癌转变过程中可能发挥着重要的抑制作用。在胃炎阶段，TGR5主要通过抑制NF-κB信号途径来减轻炎症反应。如前文所述，NF-κB信号通路在胃炎的发病机制中起着关键作用，当细胞受到幽门螺杆菌感染、脂多糖刺激等炎症因素时，NF-κB被激活，促进炎性基因的转录，释放大量炎症因子，导致胃黏膜炎症损伤。而TGR5激活后，可通过多种方式抑制NF-κB信号通路，减少炎症因子的释放，从而减轻胃黏膜的炎症程度，降低炎症对胃黏膜细胞的损伤。这一作用对于阻止胃炎向胃癌的转变具有重要意义，因为持续的炎症刺激是胃癌发生的重要危险因素之一。减轻炎症反应可以减少炎性因子对胃黏膜上皮细胞的损伤，降低细胞发生基因突变和异常增殖的风险，从而在一定程度上抑制胃炎向胃癌的发展。在胃癌阶段，TGR5主要通过抑制STAT3信号途径来抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭，促进细胞凋亡。STAT3信号通路在胃癌的发生发展过程中异常激活，促进了胃癌细胞的恶性生物学行为。TGR5激活后，抑制了STAT3的磷酸化和转录活性，下调了一系列与胃癌细胞增殖、存活、迁移和侵袭密切相关基因的表达，如MMP2、C3、c-Myc、IL-6R、EGFR等，从而有效抑制了胃癌细胞的生长和转移。基于TGR5在胃炎和胃癌中的作用机制，我们可以推测在胃炎向胃癌转变的过程中，TGR5可能通过持续抑制炎症反应和调节细胞增殖、凋亡等过程，发挥阻止疾病进展的作用。在胃炎向肠上皮化生和异型增生发展的过程中，TGR5抑制炎症反应可以减少对胃黏膜上皮细胞的刺激，维持细胞的正常增殖和凋亡平衡，降低细胞发生异型增生的风险；即使在胃黏膜出现肠上皮化生和异型增生后，TGR5依然可以通过抑制异常细胞的增殖和促进其凋亡，阻止这些癌前病变进一步发展为胃癌。当癌前病变细胞出现时，TGR5激活后抑制STAT3信号途径，可减少这些细胞中与增殖相关基因的表达，如CyclinD1等，从而抑制癌前病变细胞的过度增殖；同时，TGR5促进细胞凋亡的作用可以清除这些可能发生恶变的异常细胞，进一步降低胃癌的发生风险。TGR5在胃炎向胃癌转变过程中可能通过抑制炎症反应和调节细胞生物学行为，成为阻止疾病进展的关键因素。深入研究TGR5在这一过程中的具体作用机制，将为胃炎和胃癌的防治提供新的理论依据和潜在的治疗靶点。五、结论与展望5.1研究总结本研究围绕TGR5在胃炎及胃癌中的作用机理展开了深入探究，通过一系列体内外实验，系统地揭示了TGR5在这两种疾病发生发展过程中的重要作用及潜在机制。在胃炎方面，体内实验中TGR5基因敲除小鼠在诱导胃炎后，炎症程度明显加重，而使用TGR5激动