（正式版）DB34∕T 5406-2026 《棘胸蛙》

34DB34/T5406—2026棘胸蛙Chinesespinyfrog2026-01-05发布2026-02-05实施安徽省市场监督管理局发布I1GB/T18654.6养殖鱼类种质检验第6部GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部GB/T18654.14养殖鱼类种质检验第14部分:注：别名：石蛤、石鸡、石蛙等），5.1.1外形2于体长1/2,指略扁，指端圆，第一指长于第二指；第二、第三指内侧缘蹼清晰，原拇指发达，指基部关节下瘤明显，近球形。掌突3个，内掌突大，卵圆形。后肢粗壮，胫长约为体长1/2,趾端球形，第一、第五趾游离侧缘膜明显，达踮基部，趾全蹼。关节下瘤明显近圆形；跗褶清晰，超过跗长1/2。见图1,棘胸蛙雌、雄背、腹面观见图2.图1棘胸蛙外形图(侧面观)图2棘胸蛙背、腹面观(左雌、右雄)体长范围3体长范围5.2内部结构5.2.1声囊雄蛙咽部有1对内声囊，开口于口咽腔；雌蛙无声囊。5.2.2脊椎脊椎骨10枚，其中颈椎骨1枚、躯椎骨7枚、荐椎骨1枚、尾杆骨1枚。属前凹后凸的参5.2.3生殖系统5.2.3.1雄蛙有一对浅黄色椭圆形睾丸，位于腹腔背侧、肾前腹面，睾丸前有金黄色指状脂肪体，数5.2.3.2雌蛙具一对多叶囊状卵巢，位于腹腔背侧、肾前腹面，生殖期膨大并含大量黄黑色卵粒。卵6.1生长体长范围体重范围6.2繁殖雌、雄蛙性成熟年龄均为2龄。6.2.2产卵季节产卵的季节为4～9月，产卵盛期为5～7月，一般雌性每年产卵2～3次。6.2.3产卵水温适宜产卵水温为18℃~24℃。4产粘性卵，具胶质外膜；多次产卵，每年产卵2～3次。卵球形，卵径1.2mm~1.5mm,动物极产卵量随雌体的大小而异，一般一年总产卵量为1000～2800粒。体细胞染色体数：2n=26;核型公式：2nBmA)图3棘胸蛙染色体组型(2n=26)7.2.1棘胸蛙线粒体Cytb基因为817bp,电泳图谱(Marker为DL1000)见图4。图4棘胸蛙线粒体Cytb基因电泳图谱5源性为100%。棘胸蛙线粒体Cytb基因如下：5’-AACACAATTCTTTCACTATTTCTACTAGGATTTTAACCTAGACTGATAGTCTGAAAAACTACTGTTGTACTATTCTATGGCCCCAGCCCGAAAATCTCACCCAATCTTAAAAATTATTAACTATGCATTTATTGACCTCCCTGCTTCTTGATGAAACTTTGGCTCCCTCCTCGGACTCTGCTTAATTATCCAAATCGCACAGGCCTATTTCTTGCAAACACATCTATAGCCTTTTCATCAATTGCCCATATTTGTCGGGATGTAAACAACGGCTGACTCCTTCGCAACCTTCACGTCCTTCTTTTTTATCTGCATCTATTTACACATTGGCCGAGGTTTATATTATGGATCATTCCTTTTCATGGAAACCAATCCTCCTTTTTTTAGTCATAGCCACAGCCTTTGTCGGATATGTTCTACCATGAGGCCAAATATCCTTCTGAGGCGCCTAACCTCCTCTCAGCCGCCCCCTATATCGGTACTAACCTAGTCCAATGAATCTGGGGCGGCTTCTCAGTAGACCGATTCTTCTCTTTCCACTTTATTCTCCCTTTCGCTATCGCCGGGGCAAGCATAATCCACTTATTATTCCTCCCAATCCAACCGGCCTTAATCAAAATCTAGATAAAGTCCCCTTCCACTCTTATTTCTCTTACAAAGACCTCCTCGTTGGCGCACTAGCGGGTCTATCAACCTTCTCCCCAAACCTCCTAGGTGACCCAGACAATTTTA按GB/T18654.2的规定执行。随机抽取蛙池，生物学检测样本不少于30只，繁殖检测雌、雄蛙样本各不少于15只。68.3.1.3.1脱水透明：样品依次经梯度乙醇（70%→80%→90%→95%→100％I→100％II）脱水，每8.3.1.3.3切片与贴片：用旋转式石蜡切片机连续8.3.1.3.4H&E染色、脱蜡至水：依次经二甲苯2次、梯度乙醇（100%→95%→80%→70至蒸馏解剖后，取股骨与胫骨骨髓，置于0.2％7以1500r/min离心10min,弃上清；加入4mL固定液(甲醇：冰乙酸=3:1),37℃固定15min;重复固定2次。加入少量固定液制备细胞悬液，滴片，文火烘干；用吉姆萨(Giemsa)工作液(按GB/T18654.12的规定配制)染色30min;蒸馏水冲净染液，空气干燥后即可用于观察。——F:5′-ATAAGGAGACGGATTTGAA-——R:5′-AAGTATAGGGTAGAGGCAA-扩增程序：94℃预变性5min;94℃变性30s,52℃退火30s,72℃延伸90s,共35个循环；72℃终延伸10min。8.5.3PCR产物纯化与回收取5μL扩增产物，经1.5%琼脂糖凝胶电泳检测后，切取目的条带，使