2026年病理学技术考试备考冲刺模拟试卷含答案解析

2026年病理学技术考试备考冲刺模拟试卷含答案解析一、A型题（最佳选择题）：每一道考题下面都有A、B、C、D、E五个备选答案，请从中选择一个最佳答案。1.在常规石蜡切片制作过程中，组织块从脱水箱取出后，进入透明剂前，必须经过的步骤是（）A.水洗B.脱水C.固定D.染色E.封固2.下列哪种固定液最常用于常规病理外检组织的固定？（）A.Zenker液B.95%乙醇C.10%中性缓冲福尔马林（NBF）D.Carnoy液E.Bouin液3.苏木精-伊红（H&E）染色中，细胞核被染成蓝色的原因是（）A.细胞核含有酸性物质，与碱性染料结合B.细胞核含有碱性物质，与酸性染料结合C.细胞核含有酸性物质，与酸性染料结合D.细胞核含有碱性物质，与碱性染料结合E.物理吸附作用4.关于组织脱水过程中使用乙醇的描述，错误的是（）A.脱水应从低浓度到高浓度梯度进行B.组织块大小应适中，过大则脱水不彻底C.100%乙醇脱水时间越长越好，以确保彻底脱水D.脱水不彻底会导致组织切片中出现白色空洞E.低浓度乙醇可用于组织块的水洗5.在免疫组化染色中，最常用的显示系统是（）A.碱性磷酸酶（AP）系统B.葡萄糖氧化酶（GOD）系统C.辣根过氧化物酶（HRP）-DAB系统D.荧光素标记系统E.胶体金标记系统6.导致石蜡切片中出现“裂纹”的最常见原因是（）A.组织脱水过度B.组织固定不足C.蜡块温度过低或室温过低D.切片刀过钝E.组织透明不足7.下列哪种特殊染色主要用于显示基底膜？（）A.Masson三色染色B.PAS染色（过碘酸-雪夫反应）C.网状纤维染色D.刚果红染色E.普鲁士蓝染色8.在冷冻切片制作中，组织支持剂通常使用（）A.石蜡B.OCT包埋剂C.明胶D.琼脂E.火棉胶9.关于抗原修复的描述，正确的是（）A.所有免疫组化标记都必须进行抗原修复B.热修复只能使用高压锅法C.酶消化修复主要用于显示被甲醛交联遮蔽的抗原D.修复液通常使用柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）或EDTA缓冲液（pH9.0）E.修复温度越高，时间越长，效果一定越好10.病理技术中，用于鉴别诊断淀粉样变性的染色方法是（）A.抗酸染色B.刚果红染色C.吉姆萨染色D.瑞氏染色E.粘液卡红染色11.组织切片脱蜡至水的过程中，如果脱蜡不干净，最直接的后果是（）A.细胞核染色不清B.细胞浆着色过深C.切片出现云雾状或着色不均D.组织结构破坏E.切片无法展开12.下列关于苏木精染液的“成熟”描述，错误的是（）A.自然氧化成熟需要时间较长B.可用氧化剂如氧化汞促进成熟C.成熟后的染液表面会有金属光泽氧化膜D.Harris苏木精配制后需立即使用效果最佳E.未成熟的苏木精染色能力弱13.在常规H&E染色中，分化液通常使用（）A.0.5%-1%盐酸乙醇B.0.5%-1%氨水C.70%乙醇D.95%乙醇E.苯二甲酸酐14.用于显示神经纤维的髓鞘和郎飞氏结的最佳染色方法是（）A.Nissl染色B.LuxolFastBlue染色C.Bielschowsky染色D.PAS染色E.Masson染色15.病理档案管理中，蜡块和切片的最佳保存条件通常是（）A.室温，干燥，避光B.4℃冰箱C.-20℃低温冰箱D.液氮罐E.37℃恒温箱16.下列哪种情况最适合使用冷冻切片技术？（）A.慢性炎症组织的常规诊断B.术中快速病理诊断C.肾穿刺活检的电镜标本制备D.细胞学涂片染色E.组织化学酶活性定位17.在免疫组化染色中，设立阳性对照的主要目的是（）A.节省试剂B.证明染色系统的有效性C.检测第一抗体的特异性D.消除内源性生物素的干扰E.替代阴性对照18.组织透明剂二甲苯若在组织中残留，进入水溶性染液时会发生（）A.染色变深B.染色变浅C.出现白色混浊D.组织自溶E.染色沉淀19.计算石蜡切片机上切片厚度的依据是（）A.组织块的大小B.标本手轮转动的刻度数值C.蜡块的硬度D.刀片的角度E.室温的高低20.关于脱钙的描述，错误的是（）A.脱钙前必须先固定组织B.常用脱钙剂包括硝酸、盐酸和EDTAC.脱钙终点判断常用物理法或化学法D.酸性脱钙剂对组织形态和抗原破坏较小E.EDTA脱钙温和但速度慢21.在细胞病理学涂片制作中，巴氏染色（Papanicolaoustain）主要用于（）A.血液涂片B.宫颈及阴道脱落细胞C.痰液涂片D.穿刺细胞涂片E.体液涂片22.造成免疫组化染色出现“非特异性背景染色”的原因不包括（）A.内源性过氧化物酶未阻断B.一抗浓度过高C.孵育时间过长D.DAB显色时间过短E.组织切片坏死23.电子显微镜技术中，用于增加样品反差的“电子染色”通常使用（）A.苏木精和伊红B.醋酸铀和柠檬酸铅C.锇酸和重铬酸钾D.甲醇和冰醋酸E.苯胺蓝和酸性复红24.糖原染色（PAS染色）中，过碘酸的作用是（）A.氧化糖分子中的乙二醇基变为醛基B.还原糖分子中的醛基C.与雪夫试剂反应生成红色D.固定组织中的糖原E.漂白背景25.病理技术质量控制（QC）中，HE染色切片的“细胞核与细胞浆色彩对比鲜明”属于（）A.室内质控B.室间质评C.仪器质控D.试剂质控E.人员资质考核26.下列关于伊红染液的描述，正确的是（）A.伊红是碱性染料B.伊红Y是水溶性的，通常配成水溶液C.伊红染细胞核D.在分化过程中，伊红容易被盐酸酒精脱去E.伊红着色不仅与pH有关，还与染液浓度有关27.制作脂肪组织石蜡切片时，为了防止脂肪溶解，应采取的特殊措施是（）A.使用丙酮固定B.使用冰冻切片C.增加脱水时间D.使用钙尔马林固定E.减少透明时间28.免疫荧光技术中，最常用的荧光素是（）A.罗丹明B.异硫氰酸荧光素（FITC）C.德克萨斯红D.藻红蛋白E.花青素29.在病理切片染色中，“返蓝”步骤的目的是（）A.使细胞核颜色更红B.使细胞核恢复蓝色C.使细胞浆颜色更红D.去除多余的伊红E.固定颜色30.关于全自动脱水机的使用，错误的是（）A.组织块放入脱水盒前应编号B.脱水试剂应定期更换C.起始浓度通常为70%乙醇D.蜡缸温度应设定在60℃以上E.可以将未经固定的组织直接放入脱水机31.显示心肌缺血早期改变的染色方法是（）A.PTAH染色B.Masson染色C.NADH脱氢酶染色D.油红O染色E.刚果红染色32.下列哪种细菌可用抗酸染色法检测？（）A.大肠杆菌B.葡萄球菌C.结核分枝杆菌D.肺炎链球菌E.幽门螺杆菌33.在免疫组化自动化染色机中，清洗玻片的主要目的是（）A.保持机器清洁B.防止交叉污染C.增加染色强度D.减少背景染色E.保护切片34.网状纤维染色（银染）中，网状纤维呈现的颜色是（）A.黑色B.棕黄色C.红色D.蓝色E.绿色35.组织切片中出现“刀痕”或“划痕”，主要原因是（）A.刀刃有缺口B.组织过硬C.蜡块太软D.水温太低E.染色时间过长36.下列哪种固定液对糖原和核酸的保存效果最好？（）A.甲醛B.戊二醛C.乙醇D.丙酮E.苦味酸37.关于病理技术中的“封片”步骤，错误的是（）A.封片前切片必须透明B.中性树胶是最常用的封固剂C.封片时避免产生气泡D.封片剂可以直接滴在干燥的切片上E.封片可长期保存切片38.在常规病理技术中，用于从组织中去除色素（如黑色素）的方法是（）A.酸性氧化法B.碱性还原法C.脱色剂处理D.漂白处理（如高锰酸钾-草酸）E.增加染色时间39.诊断恶性黑色素瘤时，除H&E外，常用的免疫组化标记物是（）A.CK（细胞角蛋白）B.Vimentin（波形蛋白）C.S-100,HMB-45,Melan-AD.LCA（白细胞共同抗原）E.Desmin（结蛋白）40.切片刀的研磨角度一般要求为（）A.10°-15°B.20°-25°C.30°-35°D.45°E.5°-10°41.在HE染色中，如果细胞核着色过浅（淡染），可能的原因是（）A.苏木精染色时间过长B.分化时间过长C.返蓝不足D.伊红浓度过高E.脱水不净42.关于全封闭组织处理仪（全封闭脱水机）的优势，描述错误的是（）A.减少甲醛等有毒气体的挥发B.试剂挥发少，浓度相对稳定C.环保，改善工作环境D.成本低廉E.处理效果相对稳定43.显示结缔组织中胶原纤维的特殊染色是（）A.网状纤维染色B.Masson三色染色C.弹性纤维染色D.脂肪染色E.糖原染色44.下列关于免疫组化Polymer二步法的描述，正确的是（）A.需要使用生物素标记的二抗B.需要使用卵白素/链霉卵白素复合物C.敏感性高于传统的ABC法D.背景染色通常较高E.适合于内源性生物素丰富的组织45.在病理诊断中，确定肿瘤组织来源（上皮或间叶）的首选抗体组合是（）A.Desmin+MyoglobinB.CK+VimentinC.S-100+HMB45D.LCA+CD20E.Actin+CD3446.组织切片在展片时，水槽的水温通常设定在（）A.室温B.30℃-35℃C.40℃-45℃D.60℃以上E.0℃-4℃47.关于核酸原位杂交（ISH）技术，叙述错误的是（）A.用于检测细胞内的DNA或RNAB.探针必须经过标记C.杂交前需对组织进行蛋白酶消化以增加通透性D.杂交反应不需要严格的温度控制E.显色系统可以使用酶标或荧光48.下列哪种试剂常用于消除内源性碱性磷酸酶的干扰？（）A.H2O2（甲醇溶液）B.左旋咪唑C.正常羊血清D.TritonX-100E.牛血清白蛋白49.在常规石蜡包埋中，熔点最高的石蜡通常用于（）A.组织浸蜡的第一步B.组织浸蜡的第二步C.组织包埋D.组织脱水E.组织透明50.病理技术中，用于显示铁血黄素颗粒的染色方法是（）A.PASB.MassonC.普鲁士蓝D.GiemsaE.Ziehl-Neelsen51.关于细胞凋亡的检测，TUNEL法的原理是（）A.检测细胞膜表面的受体B.检测细胞质内的酶活性C.标记DNA断裂末端的3'-OHD.检测线粒体的膜电位E.检测细胞核的形态52.在免疫组化染色中，DAB（二氨基联苯胺）显色后的沉淀颜色通常是（）A.蓝色B.红色C.棕黄色/褐色D.绿色E.黑色53.组织切片染色后，脱水透明过程中，如果乙醇浓度不够或透明时间短，会导致（）A.封片剂混浊B.细胞核褪色C.组织结构模糊D.切片干燥E.染色过深54.下列关于病理大体标本摄影的要点，错误的是（）A.摄影前应清理标本表面的血迹和杂物B.使用标准色卡进行色彩校正C.必须使用闪光灯D.背景颜色通常选择蓝色或黑色E.放置比例尺以显示大小55.为了防止组织在脱水过程中收缩过度，可以采取的措施是（）A.降低乙醇浓度B.增加脱水时间C.使用正丁醇代替部分乙醇D.提高温度E.减少脱水步骤56.在肾穿刺活检病理技术中，为了同时观察光镜、免疫荧光和电镜，标本处理应（）A.全部放入石蜡包埋B.全部放入电镜固定液C.分割标本，分别固定处理D.先做免疫荧光，再做石蜡切片E.只做石蜡切片即可57.显示真菌成分的特殊染色方法是（）A.抗酸染色B.网状纤维染色C.六胺银染色（GMS）或PAS染色D.刚果红染色E.普鲁士蓝染色58.下列哪种情况属于免疫组化染色中的“假阴性”？（）A.肿瘤细胞不表达该抗原B.组织固定时间过长导致抗原丢失C.阳性对照组织未着色D.DAB显色时间不足E.以上均可能造成假阴性59.在病理技术实验室安全中，处理二甲苯废液时，应（）A.直接倒入下水道B.混入酸性溶液中和后倒掉C.收集在专用废液桶中交由专业机构处理D.挥发到空气中E.掺入生活垃圾60.关于病理切片的数字化扫描（WSI），错误的是（）A.可以实现切片的永久保存B.便于远程会诊C.扫描分辨率越高越好，不受存储空间限制D.支持全景浏览和放大缩小E.可以进行图像定量分析二、B型题（配伍选择题）：每道题列出A、B、C、D、E五个备选答案，然后为每一道题选择一个最佳答案。每个备选答案可被选用一次、多次或不被选用。（61-65题共用备选答案）A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.戊二醛E.冰醋酸61.穿透力强，能引起组织硬化，是常规病理最常用的固定剂（）62.对糖原、核酸保存好，有沉淀作用，是优良的胞核固定剂（）63.渗透力强，固定速度快，常用于冷冻切片及细胞涂片固定（）64.主要用于电镜标本固定，交联能力强，对超微结构保存好（）65.不能单独使用，常与乙醇、甲醛混合使用，可防止组织过度硬化（）（66-70题共用备选答案）A.苏木精B.伊红C.盐酸酒精D.氨水E.二甲苯66.H&E染色中，属于碱性染料，染细胞核（）67.H&E染色中，属于酸性染料，染细胞浆（）68.用于H&E染色后的分化步骤（）69.用于H&E染色中使细胞核返蓝（）70.用于组织切片的透明和封片前的溶剂（）（71-75题共用备选答案）A.Masson三色染色B.刚果红染色C.抗酸染色D.普鲁士蓝染色E.AB-PAS染色71.用于鉴别诊断淀粉样变性，且在偏振光显微镜下呈苹果绿双折光（）72.用于显示组织中胶原纤维（绿色或蓝色）和肌纤维（红色）（）73.用于检测组织中的含铁血黄素沉积，呈蓝色（）74.用于检测结核杆菌等抗酸杆菌（）75.用于显示和区分酸性粘液和中性粘液（）（76-80题共用备选答案）A.CK（Cytokeratin）B.VimentinC.S-100D.LCA（CD45）E.Desmin76.上皮源性肿瘤的标记物（）77.间叶源性肿瘤的标记物（）78.肌源性肿瘤的标记物（）79.淋巴造血系统肿瘤的标记物（）80.神经源性肿瘤及黑色素瘤的标记物（）三、X型题（多项选择题）：每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案，其中至少有两个是正确答案。81.常规石蜡切片制作前的组织预处理步骤包括（）A.取材B.固定C.水洗D.脱水E.染色82.影响HE染色质量的因素包括（）A.组织固定的时间和质量B.切片的厚度C.染液的pH值D.分化和返蓝的时间E.封片剂的质量83.免疫组化染色中，常见的假阳性原因包括（）A.内源性生物素活性未阻断B.一抗组织特异性差C.孵育时间过长D.洗涤不充分E.DAB显色时间过长84.下列哪些属于组织脱水剂？（）A.乙醇B.丙酮C.正丁醇D.二甲苯E.乙醚85.病理技术中，组织固定的目的包括（）A.防止组织自溶和腐败B.保存组织内的抗原性C.使组织硬化便于切片D.产生折光率便于观察E.杀灭细菌86.冷冻切片的优点包括（）A.速度快，适合术中诊断B.能较好地保存脂质和酶活性C.避免了有机溶剂对组织的影响D.切片厚度通常比石蜡切片薄E.设备成本低廉87.关于病理切片的“捞片”操作，正确的有（）A.使用载玻片从水槽中捞取切片B.捞片时应选切片完整、无皱褶的区域C.捞片后应立即放入烤箱烤干D.捞片时载玻片应有标签标记E.水温过低会导致切片无法展开88.下列哪些特殊染色可用于显示细胞外基质成分？（）A.PAS染色B.网状纤维染色C.Masson三色染色D.弹性纤维染色E.抗酸染色89.免疫组化染色中，阻断非特异性背景染色的方法有（）A.使用正常血清封闭B.降低一抗浓度C.增加洗涤次数和时长D.在PBS中添加Tween-20E.提高孵育温度90.病理技术中常用的透明剂有（）A.二甲苯B.苯C.氯仿D.香柏油E.环己烷91.导致石蜡切片组织碎裂的原因可能有（）A.组织固定不充分B.脱水过度导致组织变脆C.组织内有钙化灶未脱钙D.切片刀角度过大E.蜡块温度过低92.下列关于病理大体标本取材的注意事项，正确的有（）A.切取病变最明显的部位B.切取病变与正常组织交界处C.注意保持标本的解剖学关系D.对于小标本应全部包埋E.取材刀片应锋利，避免挤压组织93.诊断脂肪肉瘤时，可辅助诊断的特殊技术包括（）A.油红O染色（冷冻切片）B.S-100免疫组化C.电镜观察脂滴D.AB-PAS染色E.抗酸染色94.实验室质量控制中，用于评估免疫组化染色对照的包括（）A.阳性对照B.阴性对照C.空白对照（PBS替代一抗）D.替代对照E.吸收对照95.下列哪些病变或情况需要进行脱钙处理？（）A.骨肿瘤B.骨髓纤维化C.动脉粥样硬化（钙化斑块）D.软骨组织E.含有异位骨化的软组织肿瘤96.数字病理切片扫描系统的主要组成部分包括（）A.全自动显微镜或扫描仪B.高分辨率数码摄像头C.图像拼接软件D.图像存储服务器E.显示器97.关于病理技术人员的职业防护，正确的有（）A.处理甲醛时应戴防毒面具和手套B.实验室保持良好通风E.废液分类收集处理98.常用的病理封固剂包括（）A.中性树胶B.甘油明胶C.加拿大树胶D.DPXE.水溶性封片剂99.下列关于苏木精染液配制，正确的有（）A.苏木精通常溶于乙醇或甘油中B.需要加入媒染剂（如钾明矾或铵明矾）C.需要加入氧化剂（如氧化汞或硫酸钠）D.配制后需过滤去除沉淀E.可用碳酸钠或锂carbonate调节pH促进成熟100.导致免疫组化染色失败（无阳性信号）的常见技术原因包括（）A.抗原修复方法不当B.一抗或二抗失效C.显色剂配制错误或失效D.组织脱片E.洗涤过度导致抗体洗脱四、共用题干单选题：以下提供若干个案例，每个案例下设若干个考题，请根据案例提供的信息，在每一道考题下面选择一个最佳答案。（101-103题共用题干）某患者在进行胃镜活检，病理诊断怀疑为恶性淋巴瘤。病理技术员接收标本后需要进行一系列处理。101.为了进行免疫组化标记LCA、CD3、CD20等抗体，首选的固定液是（）A.95%乙醇B.丙酮C.10%中性缓冲福尔马林D.Bouin液E.戊二醛102.在进行免疫组化染色前，技术人员决定进行抗原热修复，最常用的修复缓冲液是（）A.PBS（pH7.4）B.柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）C.Tris缓冲液（pH8.0）D.碳酸氢钠缓冲液E.醋酸缓冲液103.如果在染色过程中发现背景染色很深，且非特异性染色较强，下列哪种处理方法最不恰当？（）A.缩短一抗孵育时间B.增加PBS洗涤次数C.提高一抗浓度D.使用正常血清进行封闭E.在洗涤液中加入TritonX-100（104-106题共用题干）一女性患者，乳腺包块，术中送检冷冻切片进行快速诊断。104.冷冻切片制片中，组织支持剂OCT包埋后的主要处理步骤是（）A.脱水B.透明C.迅速冷冻D.固定E.染色105.如果冷冻切片出现大量细胞空泡，结构模糊，最可能的原因是（）A.恒冷箱温度过高B.恒冷箱温度过低C.组织冷冻速度过慢产生冰晶D.切片刀太钝E.染色时间太短106.冷冻切片固定液通常使用（）A.10%福尔马林B.95%乙醇或丙酮C.戊二醛D.Bouin液E.多聚甲醛（107-109题共用题干）病理技术室在配制试剂时，需要配制1000mL4%的多聚甲醛固定液（用于电镜或特殊免疫组化固定）。107.若使用粉末状多聚甲醛，称取的重量应为（）A.4gB.10gC.20gD.40gE.400g108.多聚甲醛粉末溶解时通常需要加热，并加入下列哪种物质助溶？（）A.盐酸B.氢氧化钠C.氯化钠D.乙醇E.冰醋酸109.配制好的固定液需要调节pH值，通常调至（）A.酸性（pH4.0-5.0）B.中性或弱碱性（pH7.2-7.4）C.强碱性（pH9.0以上）D.任意pHE.pH6.0五、判断题：请判断下列各题的正误，正确的在括号内画“√”，错误的画“×”。110.石蜡切片制作中，组织脱水必须从低浓度到高浓度乙醇依次进行，且必须经过100%乙醇。（）111.苏木精是一种天然染料，伊红是一种人工合成染料。（）112.免疫组化染色中，所有的阳性信号都必须定位于细胞核。（）113.组织块越大，固定液渗透到组织中心所需的时间越长。（）114.冷冻切片的质量优于石蜡切片，因此所有病理诊断都应首选冷冻切片。（）115.PAS染色不仅能显示糖原，还能显示真菌和基底膜。（）116.在HE染色中，如果细胞核着色过红，说明分化时间不足。（）117.病理技术中的“脱蜡”是指将组织中的蜡质去除，以便水溶性染液进入。（）118.免疫荧光染色必须在荧光显微镜下观察，且不能长期保存。（）119.组织切片封片时，封固剂越多越好，可以完全覆盖盖玻片。（）120.电镜标本制备中，后固定通常使用锇酸，以保存膜结构和增加反差。（）121.抗酸染色中，结核杆菌被染成红色，背景被染成蓝色。（）122.病理诊断报告一经发出，技术组就可以随意丢弃对应的蜡块和切片。（）123.自动化染色机完全替代了手工操作，因此技术员不需要掌握手工染色原理。（）124.Masson三色染色中，胶原纤维通常被染成蓝色或绿色。（）125.DAB显色液具有致癌性，操作时应戴手套并在通风橱中配制。（）六、填空题：请在每小题的空格中填入最恰当的答案。126.病理技术中，组织固定的核心机制是使细胞内蛋白质发生________，从而稳定结构。127.HE染色中，细胞核被苏木精染成蓝色，该过程称为________染色；细胞浆被伊红染成红色，该过程称为________染色。128.常规石蜡包埋中，石蜡的熔点通常在________℃之间。129.免疫组化染色中，用于阻断内源性过氧化物酶活性的试剂通常是________%的H2O2。130.显示网状纤维的银染法中，网状纤维呈现________色。131.病理切片机（轮转式切片机）切下的切片带，其移动方向是________。132.在冷冻切片技术中，防止产生冰晶的关键是________。133.常用的脱钙指示剂包括化学法和物理法，化学法常用________的饱和溶液。134.细胞学涂片染色中，除巴氏染色外，常用的染色方法还有________染色。135.数字病理切片的格式通常是________、SVS等。七、名词解释：请简要解释下列名词。136.组织固定137.脱水138.透明139.分化140.抗原修复141.免疫组化（IHC）142.冷冻切片143.网状纤维144.假阳性145.脱钙八、简答题：请简要回答下列问题。146.简述常规石蜡切片（HE染色）的基本制作流程。147.简述免疫组化染色中产生非特异性背景染色的常见原因及解决方法。148.简述冷冻切片与石蜡切片相比的主要优缺点。149.在病理技术中，为什么要进行组织脱水？常用的脱水剂有哪些？150.简述PAS染色（过碘酸-雪夫反应）的原理及其主要用途。九、综合应用题：请结合病理学技术知识进行综合分析和计算。151.某病理技术室需要配制1000mL70%的乙醇溶液用于组织脱水。现有95%的乙醇和无水乙醇（100%）。请计算需要多少毫升的95%乙醇和多少毫升的水来配制（假设忽略体积收缩效应，使用公式=进行计算，并写出详细步骤）。152.在一次HE染色过程中，技术员发现切片细胞核着色过浅，呈淡蓝色甚至灰色，而细胞浆着色鲜艳。请分析可能的原因（至少列出3点），并提出相应的调整措施。153.现有一例骨组织标本，需要进行常规病理诊断。(1)请列出该标本处理的关键步骤。(2)在脱钙过程中，如何判断脱钙终点？(3)如果脱钙不完全，对后续切片和染色会有什么影响？参考答案与解析一、A型题1.【答案】B【解析】组织从水溶液进入石蜡包埋剂（疏水性）之前，必须先经过脱水剂（如乙醇）去除组织内的水分，然后再经透明剂（如二甲苯）置换，才能顺利浸蜡。脱水是关键步骤。2.【答案】C【解析】10%中性缓冲福尔马林（NBF）穿透力强，组织收缩小，能较好地保存抗原和形态，是国际通用的常规病理固定液。3.【答案】D【解析】苏木精是碱性染料（带正电荷），细胞核内的核酸（DNA、RNA）和蛋白质含有酸性基团（带负电荷），两者结合形成盐，故细胞核被染成蓝色，这称为嗜碱性。4.【答案】C【解析】100%乙醇脱水时间过长会导致组织过度硬化、变脆，切片时容易碎裂。时间应根据组织大小适当调整。5.【答案】C【解析】辣根过氧化物酶（HRP）与DAB（二氨基联苯胺）显色系统是最常用、敏感性高且沉淀物稳定的显色系统。6.【答案】C【解析】裂纹通常是由于蜡块与室温温差过大，或蜡块本身过冷过硬，切片受力不均造成的。7.【答案】B【解析】PAS染色能显示糖原、粘蛋白、真菌和基底膜等富含多糖的物质，常用于显示基底膜。8.【答案】B【解析】OCT（OptimalCuttingTemperaturecompound）包埋剂是冷冻切片专用支持剂，冷冻后易切片，支持性好。9.【答案】D【解析】热抗原修复常用柠檬酸盐（pH6.0）或EDTA（pH9.0）缓冲液，通过高温煮沸打开甲醛交联，暴露抗原位点。10.【答案】B【解析】刚果红染色与淀粉样蛋白结合，在偏振光显微镜下呈现特征性的苹果绿双折光，是确诊淀粉样变性的金标准。11.【答案】C【解析】脱蜡不净会导致切片上有残留的石蜡，阻碍水溶性染液进入，导致切片呈现云雾状或染色不均。12.【答案】D【解析】Harris苏木精配制后需要“成熟”（氧化），未成熟者染色力弱。自然成熟需数周，氧化汞可加速成熟。13.【答案】A【解析】分化液通常使用0.5%-1%的盐酸乙醇，用于分化去除组织上过多结合的苏木精，使细胞核着色清晰。14.【答案】B【解析】LuxolFastBlue（克紫罗兰）是显示中枢神经系统髓鞘的经典染色方法。15.【答案】A【解析】蜡块和切片在室温、干燥、避光条件下可保存数十年。低温虽可保存但非必须，且占用空间。16.【答案】B【解析】冷冻切片制片速度快（通常15-30分钟），主要用于手术过程中的快速病理诊断。17.【答案】B【解析】阳性对照含有已知的目标抗原，如果阳性对照未着色，说明染色系统失效（如抗体失效、修复不当等）。18.【答案】C【解析】二甲苯不溶于水，若残留进入水溶性染液，会出现白色混浊（乳化现象），影响染色。19.【答案】B【解析】切片厚度由切片机手轮刻度控制，通常为3-5μm。20.【答案】D【解析】酸性脱钙剂（如盐酸、硝酸）对组织形态破坏较大，对抗原也有一定损伤；EDTA脱钙最温和，对形态和抗原保存最好。21.【答案】B【解析】巴氏染色染色透明度好，细胞核结构清晰，主要用于宫颈阴道涂片的筛查。22.【答案】D【解析】DAB显色时间过短会导致阳性信号弱或假阴性，而非背景染色。背景染色主要与内源性酶、非特异性吸附等有关。23.【答案】B【解析】醋酸铀（染核酸、蛋白质）和柠檬酸铅（染蛋白质、糖类）是电镜常规的双重电子染色，增加反差。24.【答案】A【解析】过碘酸（PeriodicAcid）是一种氧化剂，能氧化多糖分子中的乙二醇基（1,2-乙二醇）生成醛基。25.【答案】A【解析】这是室内质控的重要内容，技术员每日染色时应评估切片质量。26.【答案】E【解析】伊红是酸性染料，通常配成水溶性或醇溶性溶液，染细胞浆。其着色受pH影响，且分化步骤主要针对苏木精。27.【答案】B【解析】脂肪组织在常规有机溶剂（乙醇、二甲苯）处理中会被溶解，导致形态消失，必须用冷冻切片技术。28.【答案】B【解析】FITC（异硫氰酸荧光素）呈黄绿色荧光，应用最广泛。29.【答案】B【解析】经盐酸乙醇分化后，苏木精由红色变为红色/淡色，放入弱碱性溶液（如氨水或自来水）中，使细胞核恢复蓝色。30.【答案】E【解析】未经固定的组织直接脱水会导致组织自溶、收缩严重，形态结构破坏。必须先固定。31.【答案】C【解析】NADH脱氢酶是细胞呼吸链的关键酶，心肌缺血时酶活性最早丧失，该染色可早期诊断心肌梗死。32.【答案】C【解析】结核分枝杆菌细胞壁含有大量脂质（分枝菌酸），抗酸性强，不易着色，一旦被石炭酸品红染上则能抵抗盐酸酒精的脱色（抗酸染色）。33.【答案】B【解析】清洗主要是为了防止不同组织切片间的交叉污染（carryover）。34.【答案】A【解析】网状纤维（嗜银纤维）易被银盐还原，染成黑色。35.【答案】A【解析】刀刃有缺口或变钝会在切片上留下规律的划痕或刀痕。36.【答案】C【解析】乙醇是沉淀性固定剂，能很好地沉淀糖原和核酸，且不发生交联，有利于后续核酸提取。37.【答案】D【解析】封片前切片必须经过透明（如二甲苯），使折光率与玻璃一致。若切片干燥，封片剂无法渗入会导致气泡。38.【答案】D【解析】黑色素等色素可用氧化法（如高锰酸钾氧化后草酸还原）进行漂白脱色。39.【答案】C【解析】S-100、HMB-45、Melan-A是黑色素瘤的特异性标记物。40.【答案】B【解析】常规切片刀的研磨角度通常为20°-25°，以保持锋利的刀刃。41.【答案】B【解析】细胞核淡染最常见的原因是分化时间过长，把细胞核内的染料也去除了。42.【答案】D【解析】全封闭脱水机设备昂贵，试剂用量大，成本并不低廉，但环保效果好。43.【答案】B【解析】Masson三色染色中胶原纤维染成蓝色/绿色，肌纤维红色，便于区分。44.【答案】C【解析】Polymer法（EnVision法）将二抗与酶通过聚合物连接，避免了生物素系统的干扰，敏感性高，背景低。45.【答案】B【解析】CK是上皮标记，Vimentin是间叶标记，两者常用于区分癌（上皮）和肉瘤（间叶）。46.【答案】C【解析】展片水温通常在40℃-45℃，略低于蜡的熔点，使切片充分展开。47.【答案】D【解析】原位杂交的杂交反应对温度和离子强度要求非常严格，需在特定的Tm值下进行。48.【答案】B【解析】左旋咪醇是碱性磷酸酶的抑制剂，用于阻断内源性AP活性。49.【答案】C【解析】包埋用蜡通常熔点略高（56-60℃），硬度适中，利于切片。50.【答案】C【解析】普鲁士蓝反应：Fe3+与亚铁氰化钾反应生成蓝色的铁氰化铁沉淀。51.【答案】C【解析】TUNEL法利用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）将带标记的核苷酸标记到DNA断裂的3'-OH末端。52.【答案】C【解析】DAB氧化后沉淀呈棕黄色或褐色。53.【答案】A【解析】脱水不净或透明不彻底，封片剂（油性）与残留水分混合会导致封片剂混浊。54.【答案】C【解析】大体标本摄影应利用自然光或专业灯光，并非必须使用闪光灯，闪光灯可能造成反光过强。55.【答案】C【解析】正丁醇脱水能力较乙醇弱，但收缩性小，常用于易收缩组织的脱水。56.【答案】C【解析】不同检查目的要求不同固定液，必须分割标本分别处理。57.【答案】C【解析】六胺银（GMS）和PAS均能染真菌细胞壁多糖。58.【答案】E【解析】假阴性原因包括抗原丢失、修复不当、试剂失效、操作失误等。59.【答案】C【解析】二甲苯属于有毒有害化学品，必须交由专业危废处理机构处理。60.【答案】C【解析】扫描分辨率受存储空间、扫描速度限制，并非越高越好，应根据诊断需求选择。二、B型题61.【答案】A62.【答案】B63.【答案】C64.【答案】D65.【答案】E66.【答案】A67.【答案】B68.【答案】C69.【答案】D70.【答案】E71.【答案】B72.【答案】A73.【答案】D74.【答案】C75.【答案】E76.【答案】A77.【答案】B78.【答案】E79.【答案】D80.【答案】C三、X型题81.【答案】ABCD【解析】染色是切片后步骤。82.【答案】ABCD【解析】封片剂质量主要影响长期保存，对即时染色色彩对比影响相对较小，但也是因素之一。主要核心是ABCD。83.【答案】ABCDE【解析】这些都是导致假阳性的常见技术原因。84.【答案】ABC【解析】二甲苯是透明剂，乙醚一般不单独作脱水剂。85.【答案】ABCE【解析】固定主要防止自溶腐败，保存抗原（部分），硬化组织，杀菌。产生折光率主要是透明剂的作用。86.【答案】ABC【解析】冷冻切片通常比石蜡切片厚（5-8μm），设备成本较高。87.【答案】ABCDE88.【答案】ABCD【解析】抗酸染色用于细菌。89.【答案】ABCD【解析】提高孵育温度通常会加速反应但也可能增加非特异性结合，不是阻断背景的标准方法。90.【答案】ABCE【解析】香柏油是镜油，不是透明剂。91.【答案】ABCDE92.【答案】ABCDE93.【答案】ABC94.【答案】ABC95.【答案】ABCDE96.【答案】ABCDE97.【答案】ABCDE98.【答案】ABCDE99.【答案】ABCDE100.【答案】ABCDE四、共用题干单选题101.【答案】C【解析】淋巴瘤免疫组化首选10%中性福尔马林固定，既能保存形态又能保存大部分抗原。102.【答案】B【解析】柠檬酸盐pH6.0是最通用的热修复缓冲液。103.【答案】C【解析】提高一抗浓度会加重背景染色，应降低浓度。104.【答案】C【解析】OCT包埋后迅速冷冻是关键。105.【答案】C【解析】冷冻速度慢，大冰晶形成会破坏细胞结构，形成空泡。106.【答案】B【解析】冷冻切片常用95%乙醇或丙酮快速固定。五、判断题110.【答案】√111.【答案】×（苏木精和伊红都是天然染料，虽然现代也有合成品，但传统上均源自天然。严格来说，苏木精提取自苏木，伊红源自红藻。此题若指化学属性，均为天然或半合成。但通常教学说苏木精是天然，伊红是人工合成染料的一种代表。此处按常规教材观点，伊红通常归为人工合成酸性染料，苏木精为天然碱性染料前体。故原题表述在病理技术教材中常见，判定为正确更符合出题意图，或者考察伊红是合成染料。实际上，伊红Y是合成品。苏木精是提取的。所以“伊红是人工合成”是对的。题干说“苏木精是天然，伊红是人工”，这是对的。）修正：苏木精是从苏木科植物提取的天然产物（需氧化成熟为苏木红），伊红是人工合成的酸性染料。故题干正确。112.【答案】×（免疫组化阳性信号可位于细胞核、细胞浆或细胞膜，取决于抗原位置。）113.【答案】√114.【答案】×（冷冻切片虽然快，但形态结构不如石蜡切片清晰，且不能长期保存，不能完全替代石蜡切片。）115.【答案】√116.【答案】√（细胞核红说明分化不够，仍呈红色/紫色，未变成蓝色。）117.【答案】√118.【答案】√119.【答案】×（封固剂过多会导致溢出污染显微镜，且干固困难，适量即可。）120.【答案】√121.【答案】√122.【答案】×（蜡块和切片是重要的医学档案，必须按规定期限保存，不得随意丢弃。）123.【答案】×（原理是基础，自动化机器故障时需手工补救，且手工是理解自动化的前提。）124.【答案】√125.【答案】√六、填空题126.交联（或凝固）127.嗜碱性；嗜酸性128.56-60129.0.3（或3）130.黑131.由上向下132.快速冷冻（或使用液氮、骤冷）133.氢氧化铵（氨水）134.瑞-吉（瑞氏-吉姆萨）135.TIFF七、名词解释136.组织固定：用化学试剂（固定剂）浸泡组织，通过物理和化学作用，使细胞内蛋白质沉淀或交联，从而终止细胞生命活动，防止自溶和腐败，稳定组织和细胞形态结构的过程。137.脱水：利用脱水剂（如乙醇）逐步置换组织内的水分，为后续透明和浸蜡（亲水性环境向疏水性环境过渡）做准备的过程。138.透明：组织经脱水后，用透明剂（如二甲苯）置换出组织中的脱水剂，使组织变得透明，同时便于石蜡浸入的过程。透明剂兼具脱水剂和石蜡溶剂的双重性质。139.分化：在染色过程中，利用分化剂（如酸酒精）将组织上吸附过多的染料选择性去除，使颜色对比更加清晰、轮廓更加分明的步骤。140.抗原修复：通过加热（热修复）或酶消化（酶修复）等方法，逆转或破坏甲醛固定产生的蛋白质交联，从而暴露被遮蔽的抗原表位，提高免疫组化检测敏感性的技术。141.免疫组化（IHC）：应用抗原与抗体特异性结合的免疫学原理，通过化学反应使标记在抗体上的显色剂（如酶、荧光素）显色，从而确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质）的表达及其定位、定量的技术。142.冷冻切片：利用低温冷冻技术使组织变硬，在冷冻切片机上直接进行切片，不经石蜡包埋、脱水等繁琐步骤，主要用于术中快速诊断。143.网状纤维：直径较细（3型胶原），主要存在于网状结缔组织中，嗜银性强，经银染呈黑色，常作为支架结构。144.假阳性：在免疫组化或特殊染色中，由于非特异性吸附、内源性酶干扰、交叉反应等原因，导致不该出现阳性信号的部位出现了阳性着色。145.脱钙：用酸性溶液或螯合剂去除骨组织或钙化组织中钙盐的过程，使组织变软，便于后续切片。八、简答题146