2026年病理学技术(中级)考试试题及答案

2026年病理学技术(中级)考试试题及答案1.单项选择题（每题1分，共30分）1.1HE染色切片中，细胞核呈蓝色是因为A.苏木素与DNA结合后呈碱性显色B.伊红与RNA结合后呈酸性显色C.苏木素与RNA结合后呈酸性显色D.伊红与DNA结合后呈碱性显色答案：A1.2下列哪项不是石蜡包埋组织切片出现“裂片”的常见原因A.组织脱水不彻底B.切片刀角度过大C.展片水温过高D.透明时间过长答案：C1.3免疫组化染色中，用于阻断内源性过氧化物酶活性的试剂是A.3%H₂O₂甲醇溶液B.0.01mol/LPBSC.10%正常山羊血清D.0.1%胰蛋白酶答案：A1.4进行PAS染色时，Schiff试剂变红的原理是A.醛基与无色品红结合生成醌型结构B.羧基与碱性品红结合生成偶氮结构C.羟基与过碘酸结合生成酯键D.氨基与Schiff试剂结合生成肽键答案：A1.5冷冻切片出现“冰晶空洞”最主要的原因是A.组织速冻前未用OCT包埋B.组织块过大C.速冻速度过慢D.切片厚度大于15μm答案：C1.6电镜标本固定常用的戊二醛浓度为A.0.1%B.1%C.2.5%D.10%答案：C1.7下列哪种染料属于异染性染料A.苏木素B.伊红C.甲苯胺蓝D.橙黄G答案：C1.8用于显示含铁血黄素的特殊染色是A.PerlsblueB.VonKossaC.MassontrichromeD.SudanblackB答案：A1.9免疫荧光双标实验中，为避免交叉反应，应优先选择A.相同种属的一抗B.相同亚型的一抗C.直接标记不同荧光素的一抗D.间接法共用二抗答案：C1.10原位杂交检测HPV16E6mRNA，探针标记最常用A.地高辛B.生物素C.荧光素D.³²P答案：A1.11全自动染色封片一体机每日维护不包括A.清洗试剂喷嘴B.更换染色缸内二甲苯C.校准机械臂坐标D.重新编写染色程序答案：D1.12组织微阵列（TMA）打孔直径通常为A.0.1mmB.0.6mmC.2.0mmD.5.0mm答案：B1.13下列哪项不是造成免疫组化假阴性的技术因素A.抗原修复过度B.一抗浓度过高C.显色底物失效D.切片烘烤温度过高答案：B1.14流式细胞术检测细胞周期，DNA荧光染料首选A.FITCB.PIC.APCD.PerCP答案：B1.15用于显示神经纤维的Bielschowsky银染，关键步骤是A.氨银液现配现用B.用中性树胶封片C.用伊红复染D.用高锰酸钾预氧化答案：A1.16下列哪种固定液含苦味酸A.10%中性甲醛B.Bouin液C.Zenker液D.PLP液答案：B1.17石蜡切片脱蜡至水顺序正确的是A.二甲苯Ⅰ→二甲苯Ⅱ→100%乙醇→95%→80%→流水B.100%乙醇→二甲苯→95%→流水C.丙酮→二甲苯→95%→流水D.二甲苯→50%→流水答案：A1.18免疫组化热诱导抗原修复最常用缓冲液是A.pH6.0柠檬酸缓冲液B.pH7.4PBSC.pH8.0Tris-HClD.pH9.0EDTA答案：A1.19下列哪项属于荧光淬灭剂A.DAPIB.抗荧光淬灭剂（DABCO）C.甘油D.中性树胶答案：B1.20电镜包埋常用树脂是A.石蜡B.环氧树脂618C.OCTD.琼脂糖答案：B1.21进行Masson染色时，胶原纤维呈A.红色B.蓝色C.黑色D.黄色答案：B1.22组织固定后未及时脱水，最可能出现的形态改变是A.细胞核固缩B.胞浆空泡化C.自溶D.细胞增生答案：C1.23下列哪项不是细胞凋亡的形态特征A.染色质边集B.细胞皱缩C.线粒体肿胀破裂D.凋亡小体形成答案：C1.24免疫组化阳性对照应选用A.已知阳性组织B.待检组织自身C.PBS代替一抗D.阴性组织答案：A1.25切片封片时，中性树胶过稀可导致A.气泡增多B.染料褪色C.切片龟裂D.透明度降低答案：A1.26用于显示淀粉样物质的刚果红染色，在偏振光下呈A.苹果绿色双折光B.蓝色单折光C.红色荧光D.黄色偏振光答案：A1.27下列哪项不是冷冻切片优点A.抗原保存好B.切片薄至2μmC.快速出片D.脂肪组织易切答案：B1.28免疫组化显色底物DAB产物颜色为A.蓝紫色B.棕褐色C.红色D.绿色答案：B1.29切片出现“刀痕”应调整A.切片刀角度B.展片水温C.烘片温度D.脱水时间答案：A1.30用于骨组织脱钙的EDTA溶液浓度通常为A.0.1mol/LB.0.5mol/LC.1mol/LD.5mol/L答案：B2.多项选择题（每题2分，共20分；每题至少2个正确答案，多选少选均不得分）2.1关于抗原修复，下列正确的是A.高压热修复可暴露醛固定遮蔽的抗原表位B.酶消化修复适用于所有抗体C.修复后需自然冷却至室温D.修复液pH需根据抗体说明书选择E.过度修复可导致掉片答案：ACDE2.2造成HE染色核浆共染不清的原因包括A.苏木素氧化过度B.分化时间不足C.蓝化不充分D.伊红浓度过低E.切片过厚答案：ABCE2.3下列属于特殊染色的是A.PASB.PerlsC.TUNELD.MassonE.VanGieson答案：ABDE2.4免疫组化非特异性染色控制方法A.使用同型对照B.增加一抗浓度C.封闭内源性生物素D.延长封闭时间E.降低二抗浓度答案：ACDE2.5电镜标本脱水剂包括A.丙酮B.乙醇C.环氧丙烷D.异丙醇E.正丁醇答案：ABC2.6组织芯片优点A.节约试剂B.减少批间差C.高通量D.可重复取同一部位E.适用于所有抗体答案：ABCD2.7下列属于荧光染料的是A.Cy3B.AlexaFluor488C.HRPD.FITCE.DAB答案：ABD2.8石蜡切片脱钙后处理包括A.流水冲洗B.再次固定C.常规脱水D.透明E.直接包埋答案：ACD2.9原位杂交杂交前处理包括A.蛋白酶K消化B.酸水解C.乙酰化D.预杂交E.显色答案：ABCD2.10流式细胞术补偿调节需考虑A.荧光光谱重叠B.电压增益C.阈值设定D.同型对照E.细胞浓度答案：ABC3.填空题（每空1分，共20分）3.1免疫组化间接法中的“二抗”是针对________的抗体。答案：一抗种属IgG3.2石蜡切片常规厚度为________μm。答案：43.3用于显示横纹肌的PTAH染色，横纹呈________色。答案：蓝3.4电镜超薄切片染色常用________和________双重染色。答案：醋酸铀；柠檬酸铅3.5组织固定液10%中性甲醛的甲醛实际浓度为________%。答案：43.6免疫荧光切片封片常用________性甘油缓冲液以防淬灭。答案：碱3.7原位杂交中，RNA探针需加入________抑制剂以防RNase污染。答案：DEPC3.8进行PAS染色时，过碘酸氧化时间为________分钟。答案：5–103.9用于脂肪染色的SudanIII染液需________保存以防氧化。答案：避光冷藏3.10组织脱水程序中，无水乙醇脱水时间一般不超过________小时以防组织脆硬。答案：23.11免疫组化DAB显色后需用________流水冲洗终止反应。答案：自来水3.12切片封片时，中性树胶过稠可加________稀释。答案：二甲苯3.13电镜标本包埋后聚合温度通常为________℃。答案：603.14显示钙盐沉积的VonKossa染色，银盐曝光后呈________色。答案：黑3.15组织微阵列recipient蜡块打孔间距常取________mm以防融合。答案：0.23.16流式细胞术PI染色需用________消化细胞团。答案：RNase3.17免疫组化高压热修复时，修复液沸腾后需减压________分钟。答案：23.18冷冻切片OCT包埋剂主要成分为________和蔗糖。答案：聚乙烯醇3.19用于显示尼氏体的染色为________。答案：硫堇3.20病理档案蜡块保存温度宜低于________℃。答案：284.简答题（每题6分，共30分）4.1简述免疫组化抗原热修复原理及注意事项。答案：热修复通过高温使交联的抗原表位重新暴露；常用高压或微波法。注意事项：①修复液pH需匹配抗体；②防止切片干涸；③自然冷却防掉片；④避免过度修复导致形态破坏；⑤阳性对照同步操作。4.2列举石蜡切片“脱片”常见原因及预防措施。答案：原因：①载玻片未涂胶；②烘烤不足；③抗原修复过度；④组织坏死。预防：①APES或多聚赖氨酸处理玻片；②56℃烘烤≥2h；③修复液保持足量；④选取新鲜组织；⑤轻拿轻放。4.3说明电镜超薄切片“彩虹色”判断标准及对应厚度。答案：切片在水面呈银白色约60nm，金黄色约70nm，紫色约90nm；常规诊断以银白至金黄为宜，即60–70nm。4.4简述Masson三色染色步骤及结果判定。答案：①Bouin液二次固定；②Weigert铁苏木素染核；③丽春红酸性品红染胞浆肌纤维；④磷钼酸分化；⑤苯胺蓝染胶原；⑥醋酸分化；⑦脱水封片。结果：胶原蓝色，肌纤维红色，核蓝黑色。4.5写出流式细胞术检测细胞凋亡AnnexinV-PI双染实验流程。答案：①收集1×10⁶细胞；②PBS洗2次；③Bindingbuffer重悬；④加AnnexinV-FITC5μL，室温避光15min；⑤加PI5μL，冰浴5min；⑥上机检测，FITC/FL1、PI/FL2双参数分析；⑦早期凋亡AnnexinV+PI−，晚期凋亡AnnexinV+PI+。5.应用题（含计算/分析/综合，共50分）5.1计算题（10分）已知组织块尺寸5mm×5mm×2mm，经固定、脱水、透明、浸蜡后体积收缩率依次为5%、10%、8%、6%，求最终包埋后体积。答案：原体积=50mm³；固定后=50×(1−0.05)=47.5mm³；脱水后=47.5×(1−0.10)=42.75mm³；透明后=42.75×(1−0.08)=39.33mm³；浸蜡后=39.33×(1−0.06)=36.97mm³≈37mm³。5.2分析题（10分）某乳腺标本ER免疫组化染色阴性，但阳性对照及内对照均阳性，分析可能原因并给出解决方案。答案：原因：①肿瘤异质性，切片未取到阳性区；②组织处理过度，抗原丢失；③一抗失效；④抗体克隆号与既往不同。方案：①深切10张切片，取不同层面；②降低修复条件，改用pH9EDTA；③更换同批号抗体；④增设外部阳性对照；⑤必要时行FISH验证。5.3综合题（30分）病例：58岁男性，肺占位穿刺标本，需行HE、免疫组化（TTF-1、NapsinA、p40、Ki-67）、特殊染色（PAS-D）、原位杂交（ALKbreak-apart探针）。请写出完整技术路线，包括固定、脱水、包埋、切片、染色、结果判读标准及质控措施，并给出ALK阳性判读标准。答案：1.固定：10%中性甲醛固定6h，流水冲洗4h。2.脱水：70%→80%→95%→100%→100%乙醇各1h；二甲苯透明2×20min；石蜡浸蜡2×1h；包埋。3.切片：4μm连续切片，捞片于APES玻片，56℃烘烤2h。4.HE：常规苏木素5min，1%盐酸乙醇分化3s，氨水蓝化，伊红1min，脱水封片。5.免疫组化：a.高压热修复pH6.0柠檬酸，高压2min；b.3%H₂O₂阻断10min；c.一抗TTF-1(1:100)、NapsinA(1:200)、p40(1:100)、Ki-67(1:200)4℃过夜；d.HRP二抗37℃30min；e.DAB显色，苏木素复染。判读：TTF-1/NapsinA胞浆/核阳性为腺癌；p40基底细胞核阳性为鳞癌；Ki-67指数热点区计数500细胞。6.PAS-D：过碘酸10min，Schiff15min，37℃烘干，