四川广安市加德中学2024-2025学年高二下学期期末模拟生物试题(含解析)

广安加德学校2024-2025学年度下期期末模拟考试高二生物试题卷I选择题部分（共45分）本部分共15小题，每小题只有一个选项符合题目要求，每小题3分，共45分1.科研人员在加勒比地区瓜德罗普岛上红树林中发现了2厘米长的华丽硫珠菌，这是有史以来发现的体型最大的细菌。华丽硫珠菌利用氧化含硫化合物获得的能量将CO2合成糖类，维持自身生命活动。华丽硫珠菌（）A.是一种异养型微生物 B.遗传物质是核糖核酸C.在线粒体中合成ATP D.核糖体上合成蛋白质【答案】D【详解】A、该菌可利用氧化含硫化合物的能量将CO₂合成为自身糖类，属于化能自养型生物，A错误；B、所有具细胞结构的生物（原核、真核生物）遗传物质都是DNA（脱氧核糖核酸），不是核糖核酸（RNA），B错误；C、原核生物没有线粒体这一细胞器，不会在线粒体中合成ATP，C错误；D、原核生物唯一具有的细胞器是核糖体，所有细胞生物的蛋白质都在核糖体上合成，D正确。2.“三千年成都，两千年蜀锦”，蜀锦作为中国四大名锦之一，以其独特的工艺和绚丽的色彩而闻名。蜀锦在织造过程中多使用染色后的熟蚕丝线，蚕丝线的主要成分是蚕丝蛋白。下列叙述正确的是（）A.蚕丝蛋白中氮元素主要存在于游离的氨基中B.生蚕丝线煮制为熟蚕丝线后肽键几乎全部破坏C.蚕丝蛋白基因是由两条脱氧核苷酸链构成的D.蚕丝蛋白基因中含有腺嘌呤、胞嘧啶和尿嘧啶【答案】C【分析】基因一般是指具有遗传效应的DNA片段。组成蛋白质的基本单位是氨基酸，其结构特点：每种氨基酸都至少含有一个氨基和一个羧基，并且他们都连接在同一个碳原子上。【详解】A、蚕丝蛋白中的氮元素主要存在于-CO-NH-中，A错误；B、生蚕丝线煮制为熟蚕丝线后空间结构被破坏，但肽键没有被破坏，B错误；C、蚕丝蛋白基因是有遗传效应的DNA片段，由两条脱氧核苷酸链构成的，C正确；D、蚕丝蛋白基因是有遗传效应的DNA片段，故含有腺嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和鸟嘌呤，D错误。故选C。3.脂滴是细胞内储存脂肪的结构，脂滴膜由磷脂分子构成，脂滴表面镶嵌有多种蛋白，这些蛋白在脂滴的形成、转运和降解过程中发挥重要作用。下列叙述错误的是（）A.脂滴膜的基本支架由磷脂双分子层构成B.脂滴膜上的蛋白质分子是可以运动的C.脂肪是由脂肪酸和甘油反应形成的酯D.脂肪在生命活动需要时可以分解供能【答案】A【分析】流动镶嵌模型：（1）磷脂双分子层构成膜的基本支架，这个支架是可以流动的；（2）蛋白质分子有的镶嵌在磷脂双分子层表面，有的部分或全部嵌入磷脂双分子层中，有的横跨整个磷脂双分子层．大多数蛋白质也是可以流动的；（3）在细胞膜的外表，少数糖类与蛋白质结合形成糖蛋白．除糖蛋白外，细胞膜表面还有糖类与脂质结合形成糖脂。【详解】A、由于磷脂分子头部亲水，尾部疏水，所以裹在脂滴表面的膜结构最可能具有单层磷脂分子，A错误；B、脂滴表面镶嵌有多种蛋白，这些蛋白在脂滴的形成、转运和降解过程中发挥重要作用，说明这些蛋白质分子都是可以运动的，B正确；C、脂肪是由三分子脂肪酸和一分子甘油反应形成的酯，C正确；D、脂肪是细胞主要的储能物质，在生命活动需要时可以分解供能，D正确。故选A。4.如图为植物细胞结构的概念图，下列叙述正确的是（）A.b是遗传信息库，是细胞遗传和代谢的中心B.水分子大量通过c时，需要载体蛋白的协助C.土壤板结时，水稻根细胞在e中能产生CO2D.g上合成的生长素并不会直接构成细胞结构【答案】C【详解】A、根据概念图可推知：b是细胞核，细胞核是遗传信息库，是细胞遗传和代谢的控制中心，细胞代谢的中心是细胞质基质，A错误；B、据图可知，c为细胞膜，水分子大量跨膜运输时，以自由扩散或通过水通道蛋白以协助扩散方式进行，通道蛋白不属于载体蛋白，且自由扩散不需要载体蛋白协助，B错误；C、土壤板结时缺氧，水稻根细胞可在e（细胞质基质）中进行无氧呼吸，水稻无氧呼吸产生酒精和CO2​，C正确；D、g是核糖体，是合成蛋白质的场所，生长素本质是吲哚乙酸，不属于蛋白质，不在核糖体上合成，D错误。5.蔗糖是甘蔗叶肉细胞光合作用的主要产物，甘蔗叶肉细胞的液泡膜上部分物质运输过程如图所示。据图分析，下列叙述错误的是（）A.质子泵逆浓度运输H⁺时需要消耗能量B.H⁺—蔗糖载体运输H⁺的方式为协助扩散C.H⁺—蔗糖载体运输蔗糖的方式为被动运输D.液泡膜内外H⁺浓度差会影响蔗糖的运输速率【答案】C【分析】1、被动运输：（1）自由扩散（与膜内外物质的浓度差有关）：不需要载体和能量，如水、CO2、O2、甘油、乙醇等；（2）协助扩散（影响因素：浓度差、载体）：需要载体，但不需要能量，如红细胞吸收葡萄糖。2、主动运输：物质从低浓度一侧运输到高浓度一侧，需要载体蛋白的协助，同时消耗能量，这种方式叫主动运输。【详解】A、质子泵逆浓度运输H⁺时需要消耗ATP提供的能量，A正确；B、H⁺—蔗糖载体运输H⁺的方式是从高浓度向低浓度运输，通过载体蛋白，为协助扩散，B正确；CD、H⁺—蔗糖载体运输蔗糖的方式是从低浓度向高浓度运输，依赖于H+浓度差提供能量，为主动运输，所以液泡膜内外H⁺浓度差会影响蔗糖的运输速率，C错误，D正确。故选C。6.某河流流经城区多个居民区，曾经是城区主要的排污大河，水质污染严重。经过修复治理后该河流现已成为一道集行洪、蓄水、绿化、观光、休闲娱乐于一体的绿色长廊。下列相关分析正确的是（）A.修复过程中生物多样性日趋丰富，生态系统的恢复力稳定性增强B.修复过程中河岸合理布设多种植物，体现了生态工程的协调原理C.治理河水有机污染时，可引入本地水生植物增大对污染物的吸收D.治理后的河流绿色长廊，体现了生态系统的直接价值和间接价值【答案】D【分析】抵抗力稳定性是生态系统抵抗外界干扰并使自身结构和功能保持原状（不受损害）的能力。一般说来，生态系统中的组分越多，食物网越复杂，自我调节能力就越强，抵抗力稳定性就越高。恢复力稳定性是生态系统遭到一定程度破坏后恢复到原来状态的能力。生态系统受到不同干扰后的恢复速度和恢复时间不同。越简单的生态系统，恢复力稳定性越强，恢复的速度越快。【详解】A、河流修复过程中生物多样性日趋丰富，生态系统的抵抗力稳定性增强，恢复力稳定性减弱，A错误；B、河流修复过程中在沿河两岸种植多种林木，增加了生态系统中物种类型，提高了生态系统的自我调节能力，遵循了生态工程的自生原理，B错误；C、植物不能直接吸收河水中的有机污染物，C错误；D、经过修复治理后该河流现已成为一道集行洪、蓄水、绿化、观光、休闲娱乐于一体的绿色长廊，行洪、蓄水等生态功能体现了生态系统的间接价值，绿化、观光、休闲娱乐等体现了生态系统的直接价值，D正确。故选D。7.碳中和（二氧化碳净零排放）是可持续发展的重要保障。近年来，人们采用生态足迹定量判断一个国家或地区的可持续发展状况。下列叙述错误的是（）A.初级消费者的生态足迹比次级消费者生态足迹大B.我国实现碳中和目标一定程度上受限于人口基数C.一个地区的生态足迹越大，可持续发展能力越弱D.清洁能源的使用减少了碳排放，降低了生态足迹【答案】A【详解】A、由于能量在食物链传递过程中逐级递减，故初级消费者的生态足迹比次级消费者生态足迹小，A错误；B、“碳中和”是指某区域一定时间内二氧化碳排放总量与消耗总量相平衡，我国实现碳中和目标一定程度上受限于人口基数，B正确；C、一个地区的生态足迹越大，说明维持某一人口单位生存所需要的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积越大，对于资源的利用越多，可持续发展能力越弱，C正确；D、清洁能源的使用减少了碳排放，减少了吸纳废物的土地及水域的面积，降低了生态足迹，D正确。8.酸啤酒是利用醋酸菌和乳酸菌进行发酵，将麦汁中的麦芽糖等糖类转化为醋酸和乳酸，再结合酵母菌的酒精发酵制作而成。下列叙述正确的是（）A.醋酸菌、乳酸菌和酵母菌都属于单细胞真核生物B.醋酸发酵、乳酸发酵和酒精发酵过程都产生CO₂C.醋酸发酵和乳酸发酵可以在同一条件下同时进行D.酒精发酵阶段应该接种抗酸性较强的酵母菌菌种【答案】D【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃。培养乳酸菌时，所用培养基还需要额外添加维生素。【详解】A、醋酸菌、乳酸菌属于单细胞原核生物，A错误；B、醋酸发酵、乳酸发酵过程不会产生CO2，B错误；C、醋酸菌是好氧菌，在无氧条件下不能存活，而乳酸菌是厌氧菌，在有氧条件下不能存活，所以醋酸发酵和乳酸发酵不可以在同一条件下同时进行，C错误；D、酒精发酵之前，产生了较多的醋酸和乳酸，故酒精发酵阶段应该接种抗酸性较强的酵母菌菌种，D正确。故选D。9.乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。科研工作者欲采用稀释涂布平板法从土壤中分离出产乳糖酶的细菌并进行计数。下列叙述正确的是（）A.筛选菌种的培养基要以乳糖酶作为唯一氮源B.样品的稀释度会直接影响平板上的菌落数目C.该方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同D.接种以后未长出菌落的培养基可以直接丢弃【答案】B【分析】选择培养基是用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。设计选择培养基时，主要考虑某些微生物的特殊营养需求或它们对某些化学物质具有的抗性。【详解】A、筛选菌种的培养基要以乳糖作为唯一碳源，A错误；B、样品的稀释度过低，菌落数重叠，而稀释度过高，会导致菌落数减少，B正确；C、该方法统计的菌落数比活菌的实际数目少，因为当两个或两个以上细胞连在一起时观察到的只是一个菌落，C错误；D、接种以后未长出菌落的培养基灭菌后才可丢弃，D错误。故选B。10.植物细胞质中的叶绿体有相对独立的遗传体系，控制着许多优良性状。胞质杂交是植物体细胞杂交应用的一个重要方面，下图是利用胞质杂交培育抗病植株的实验流程，下列叙述正确的是（）A.过程①需纤维素酶和蛋白酶处理细胞壁B.利用聚乙二醇可诱导②和③过程的发生C.在③④⑤过程中都会形成新的细胞壁D.④和⑤过程通常在同一种培养基中进行【答案】C【分析】原生质体是去除细胞壁后各种结构的总称，包括细胞膜、细胞质、细胞核和细胞器等。在植物体细胞杂交过程中常采用人工诱导的方法促进原生质体的融合，诱导方法包括两大类：物理法和化学法。化学法一般常用聚乙二醇作为诱导剂。【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，过程①需纤维素酶和果胶酶处理细胞壁，A错误；B、过程②是植物1的叶肉细胞原生质体与植物2的叶肉细胞原生质体发生融合的过程，该过程可以利用聚乙二醇诱导，但不会诱导细胞壁的再生，B错误；C、过程③融合的原生质体会再生细胞壁，过程④⑤存在有丝分裂，故在③④⑤过程中都会形成新的细胞壁，C正确；D、过程④是脱分化形成愈伤组织，过程⑤再分化形成芽和根，④和⑤过程通常不在同一种培养基中进行，D错误。故选C。11.“细胞培养肉”是利用体外培养动物细胞的方式来获得构成肌肉组织的细胞，再经收集、塑形、食品化加工等过程制备可供食用的肉类制品。下列叙述错误的是（）A.用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理组织可获得分散肌肉母细胞B.往生物反应器中充入CO2的主要作用是维持培养液的pHC.生物反应器中的支架可为细胞贴壁生长提供更多贴附空间D.肌肉母细胞的原代培养是指肌肉母细胞的第一次细胞增殖【答案】D【详解】A、用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理可将动物组织分散成单个细胞，A正确；B、动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2，CO2的作用是维持培养液的pH，B正确；C、生物反应器中的支架提供了更多的细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长，即可为细胞贴壁生长提供更多贴附空间，C正确；D、动物组织经处理后的初次培养称为原代培养，不是指肌肉母细胞的第一次细胞增殖，D错误。故选D。12.线粒体疾病严重危害患者健康。科研人员按如图所示流程进行操作，可以使患线粒体疾病的母亲生育出线粒体正常的子代。据图分析，下列叙述正确的是（）A.甲为MⅡ期产生的第二极体，其内含有的细胞质较少B.丙为重组细胞，在精子入卵后被激活完成减数分裂IIC.丁中的B为滋养层细胞，将来发育成胎儿的各种组织D丁植入子宫前必须对受体进行免疫检查避免排斥反应【答案】B【分析】受精卵中的细胞质来自卵细胞，即线粒体DNA只能通过母亲传给后代，则遗传性线粒体疾病的遗传特点是母病，子女病，与父亲无关，属于母性遗传。【详解】A、甲细胞不含同源染色体，有姐妹染色单体，处于MⅡ期，是MⅠ期产生的极体，A错误；B、丙是供体细胞质和患者极体融合形成的重组细胞，在精子入卵后被激活释放极体，完成减数分裂II，B正确；C、囊胚期的内细胞团细胞将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎盘和胎膜，C错误；D、胚胎移植前不需要对供体和受体进行免疫检查，因为受体子宫对移入的胚胎不会发生免疫排斥反应，D错误。故选B。13.基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。下列有关基因工程操作所用工具和方法的叙述，正确的是（）A.限制酶可以切割磷酸二酯键形成平末端，也能切割氢键形成黏性末端B.T4DNA连接酶可连接黏性末端和平末端，因此该酶不具有专一性C.采用花粉管通道法和农杆菌转化法都可以将目的基因导入植物细胞D.DNA分子杂交技术可检测进入受体细胞的目的基因是否转录和翻译【答案】C【分析】基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体（旧称噬菌体衍生物）、动植物病毒。【详解】A、限制酶可以切割磷酸二酯键，不切割氢键，可以产生平末端也可以产生黏性末端，A错误；B、酶都具有专一性，B错误；C、将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法，C正确；D、目的基因是否转录和翻译的检测方法依次是分子杂交技术、抗原-抗体杂交技术，D错误。故选C。14.大肠杆菌经溶菌酶和研磨液处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述错误的是（）A.提取DNA时可加入等体积的预冷却的酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解B.将提取的DNA溶于2mol/L的NaCl溶液后，加入二苯胺试剂后即可呈现蓝色C.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理D.由电泳结果推测，质粒上有一个限制酶I和Ⅱ的切点，两个限制酶Ⅲ的切点【答案】B【详解】A、DNA在冷酒精中溶解度很低，提取DNA时加入等体积的预冷却的酒精，是为了让DNA析出，蛋白质等物质溶解，A正确；B、将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺试剂在沸水浴进行鉴定，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，B错误；C、DNA带负电，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，C正确；D、因为质粒的本质是环状的DNA，限制酶Ⅰ和Ⅱ处理后电泳只有一条条带，可能是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，限制酶Ⅲ处理后有两条条带，说明有两个限制酶Ⅲ的切割位点，D正确。15.生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，会引起人们对它安全性的关注，也会与伦理道德发生碰撞，带来新的伦理困惑与挑战。下列观点正确的是（）A.转基因生产的是自然界存在的物质，不需要进行安全检测B.设计试管婴儿能使后代更优秀，应该大力提倡使用该技术C.我国允许治疗性克隆，不需要对其作有效监管和严格审查D.生物武器危害大，我国反对生物武器及其技术和设备扩散【答案】D【分析】1、转基因生物所转入的仅仅是有限的一种或几种基因，而转入的基因是否可能会对其他生物或环境造成危害，都要经过分析、实践，一旦发现有害后果，科学家就会停止实验。2、转基因食品绝大多数是安全的，人们从食物中获得可以被人体吸收的小分子物质，这些物质在不同生物体内多数是相同的；转基因食品中只是增加了少量对人类无害的基因，不会从根本上改变生物的性质，转基因技术可以按照人们的意愿定向改造生物的遗传性状，所以对于人类来说，有很大的好处。由于转基因技术还不是很成熟，需要特别注意控制其副作用。【详解】A、转基因生产的是自然界存在的物质，但是也需要进行安全检测，A错误；B、我国不允许利用体外受精技术筛选早期胚胎性别，解决不孕夫妇生殖问题，支持的是采用试管婴儿的技术，B错误。C、我国允许治疗性克隆，需要对其作有效监管和严格审查，C错误；D、生物武器危害大，我国反对生物武器及其技术和设备扩散，D正确。故选D。卷II非选择题部分（共55分）本部分共5小题，请将答案工整地书写在答题卡指定位置16.柠檬酸是一种应用广泛的食品酸度调节剂。研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉（需氧型真菌）发酵生产柠檬酸的简要流程如图所示。回答下列问题：（1）甲过程所用的培养基能为黑曲霉提供碳源、______、水和无机盐等营养物质。对培养基灭菌应该采用的方法是__________。据图甲分析，在该培养基上接种黑曲霉采用的方法是______，该方法可以获得纯培养物的原因是____________________。（2）乙过程表示发酵工程的______环节。研究发现，振荡培养的黑曲霉比静置培养的黑曲霉生长繁殖速度______，原因是________________________________。（3）丙过程是发酵的中心环节。该过程以一定的速度不断添加新的培养基，同时又以同样的速度放出旧的培养基，可大大提高生产效率，原因是________________________________________________（答出两点）。【答案】（1）①.氮源②.高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）③.平板划线法④.连续划线可逐步稀释菌种，得到分散的单个细胞（2）①.扩大培养②.快③.振荡培养能提高培养液中氧气的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率（3）为菌种提供营养物质；排出代谢废弃物；调节相关发酵条件【小问1详解】培养基能为黑曲霉提供碳源、氮源、水、无机盐等营养物质，对培养基的灭菌采用的方法是高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）。具体分析，该培养基上接种黑曲霉的方法是平板划线法，平板划线除了第一次划线蘸取了菌液以后，后面的每次划线都不蘸取菌液，都是从上次划线末端开始划线，因此该方法通过连续划线可逐步稀释菌种，得到分散的单个细胞。【小问2详解】乙过程使用了液体培养基，并采用了适宜温度和振荡培养，为菌种繁殖提供了合适的条件，属于发酵过程的扩大培养的环节，黑曲霉是需氧型真菌，因此振荡培养提高培养液中氧气的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。【小问3详解】发酵过程中以一定的速度不断添加新的培养基，同时又以同样的速度放出旧的培养基，可大大提高生产效率，原因是为不断添加新的培养基，为菌种提供营养物质；放出旧的培养基，即排出代谢废弃物；此外，在发酵过程中，也可以调节相关发酵条件。17.下图表示细胞工程操作中的某些过程，请回答下列问题：（1）如果A、B分别是白菜和甘蓝的原生质体，制备原生质体时必须先用______________去除细胞壁，此时可选择适当的_______（填“高渗”或“低渗”）溶液以利于去除。C细胞再生出细胞壁后需要通过______________技术发育成杂种植株。（2）若该图表示抗丙肝病毒的单克隆抗体制备过程中的一环，A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，B细胞是已免疫的B淋巴细胞，则获得C细胞依据的原理是______________；若在体外培养C细胞时所用的培养液为合成培养液，通常需要加入________等天然成分，为获得大量的单克隆抗体，培养过程______（填“需要”或“不需要”）用胰蛋白酶定期处理，_____（填“需要”或“不需要”）分瓶培养，原因是________________________。（3）如果A、B分别是取自优良奶牛的卵母细胞和精子，为获得数量较多的A细胞，可以给优良母牛注射_______，使其超数排卵；在进行体外受精时，一般要把A细胞培养到_______期。【答案】（1）①.纤维素酶和果胶酶②.高渗③.植物组织培养（2）①.细胞膜具有一定的流动性②.血清③.不需要④.需要⑤.杂交瘤细胞具有无限增殖的特点，不会发生接触抑制，不需要用胰蛋白酶定期处理，需要分瓶培养以提供足够的空间和营养物质等（3）①.促性腺激素②.减数第二次分裂中（MⅡ中）【小问1详解】植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁；原生质体无细胞壁保护，低渗溶液中会吸水涨破，因此选择高渗溶液维持原生质体结构完整；杂种细胞再生细胞壁后，需要利用植物细胞全能性，通过植物组织培养技术发育为完整杂种植株。【小问2详解】动物细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性；动物细胞培养的合成培养基中，需要添加血清等天然成分补充未知的营养物质；杂交瘤细胞具有无限增殖的特点，不会发生接触抑制，不需要用胰蛋白酶定期处理，为获得大量的单克隆抗体，需要分瓶培养以提供足够的空间和营养物质等。【小问3详解】要让优良母牛超数排卵获得更多卵母细胞，需要注射促性腺激素；卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期才具备受精能力。18.CTLA-4、PD-1是存在于T细胞表面的受体蛋白。CTLA-4可阻断T细胞的抗原呈递，从而抑制细胞毒性T细胞增殖。PD-1与正常细胞表面的PD-L1一旦结合，T细胞即可“认清”对方，不触发免疫反应，而癌细胞会过量表达PD-L1来逃避免疫系统的“追杀”。科研人员通过动物细胞融合技术制备抗CTLA-4单克隆抗体的过程如图所示。回答下列问题：（1）为了在小鼠体内获得能产生特定抗体的B淋巴细胞，需要先给小鼠注射的抗原是________。图中过程①诱导细胞融合常用的方法有________、________和灭活病毒诱导法等。（2）单克隆抗体制备过程中，需要用特定的选择培养基进行第一次筛选，在该培养基上，未融合的细胞和________的细胞都会死亡，筛选得到的细胞具有的特点是________。将第一次筛选获得的细胞进行克隆化培养和________，经过多次筛选，就可以获得产生单克隆抗体的细胞。（3）抗体都是由两条H链和两条L链组成的4条肽链对称结构(如图)。研究人员将产生抗CTLA-4抗体的杂交瘤细胞与产生抗PD-1抗体的杂交瘤细胞融合，融合后的细胞除了产生图中的三种抗体外，还可产生多种类型的抗体，原因是________。图中所示的双特异性抗体对癌细胞的杀伤较抗CTLA-4单克隆抗体效果更好，原因是________。【答案】（1）①.CTLA-4蛋白②.PEG融合法③.电融合法（2）①.融合的具有同种核②.既能迅速大量增殖，又能产生抗体③.抗体检测（3）①.融合细胞表达出两种L链和两种H链，不同L链和H链可能组合成不同抗体②.双特异性抗体既能结合CTLA-4，促进细胞毒性T细胞增殖，又能结合PD-1，防止癌细胞逃避免疫监视【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【小问1详解】为了在小鼠体内获得能产生抗CTLA-4抗体的B淋巴细胞，需要先给小鼠注射的抗原是CTLA-4蛋白。诱导动物细胞融合常用的方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。【小问2详解】在选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞在选择性培养基都会死亡，有相应的杂交瘤细胞才能生长，筛选得到的细胞是杂交瘤细胞，该细胞既能迅速大量增殖，又能产生抗体。将第一次筛选获得的细胞进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，就可以获得产生单克隆抗体的。【小问3详解】因为融合细胞表达出两种L链和两种H链，不同L链和H链可能组合成不同抗体，故将产生抗CTLA-4抗体的杂交瘤细胞与产生抗PD-1抗体的杂交瘤细胞融合，融合后的细胞除了产生图中的三种抗体外，还可产生多种类型的抗体。因为双特异性抗体既能结合CTLA-4，促进细胞毒性T细胞增殖，又能结合PD-1，防止癌细胞逃避免疫监视，故双特异性抗体对癌细胞的杀伤较抗CTLA-4单克隆抗体效果更好。19.枯草芽孢杆菌可分泌降解纤维素的酶，这种酶由W基因编码，其相关信息如图甲所示，利用重组DNA技术使W基因在乳酸杆菌中表达，需使用图乙的质粒为载体，图中标注限制酶的部位是其酶切位点。回答下列问题：（1）基因表达载体中的启动子是_______识别和结合的部位，可驱动基因转录。为确保质粒进入受体细胞后能进行自我复制，质粒还应该存在的结构是________。（2）限制酶HindIII能特异性识别W基因下游端和质粒的特定核苷酸序列，并使特定部位的________键断开，产生的互补黏性末端可使用________酶进行连接。（3）切割W基因上游端的限制酶不能选择MfeⅠ，原因是________。若选择KpnⅠ和HindIII分别切割W基因的上游和下游，再用这两种酶去切割质粒，得到的W基因和切割后的质粒________(填“能”或“不能”)形成正确表达W基因的载体，原因是________。（4）构建的基因表达载体导入乳酸杆菌后，可接种到含________的培养基上筛选导入成功的目的菌。若要判定W基因在工程菌中是否表达，可以进行分子水平的检测，包括________(答出两点)。【答案】（1）①.RNA聚合酶②.复制原点（2）①.磷酸二酯②.DNA连接（3）①.MfeⅠ会破坏W基因②.不能③.W基因插入的方向相反（4）①.氨苄青霉素②.检测W基因是否转录出了mRNA，检测乳酸杆菌中是否产生了降解纤维素的酶【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【小问1详解】基因表达载体中的启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，可驱动基因转录。为确保质粒进入受体细胞后能进行自我复制，质粒还应该存在的结构是复制原点。【小问2详解】限制酶

HindIII能特异性识别

W基因的下游端和质粒的特定核苷酸序列，并使特定部位的磷酸二酯键断开，产生的互补黏性末端可使用DNA连接酶进行连接。【小问3详解】切割W基因上游端的限制酶不能选择MfeⅠ，原因是MfeⅠ会破坏

W基因。若选择KpnⅠ和HindIII分别切割W基因的上游和下游，再用这两种酶去切割质粒，得到的

W

基因